利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合、试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体公开了利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合、试剂盒及方法。本发明专利技术创新了引物设计方法，筛选出六种优势拟柱孢藻多重PCR引物组合，结合优化的PCR反应体系和条件，能够在多种类蓝藻背景下检测出拟柱孢藻DNA，解决了环境eDNA检测存在的难题，能够将多重PCR检测与环境eDNA检测结合，实现更精准地监测拟柱孢藻的动向。本发明专利技术检测方法可有效节省时间，节省成本，灵敏性高、特异性强、效率高、专业要求低，当目标物种浓度低时检出率更为良好，且可以通过胶图判断。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合、试剂盒及方法。

技术介绍

1、拟柱孢藻是属于蓝藻门、念珠藻目的一种淡水蓝藻，在中国是一种入侵物种。由于其独特的生理特征，包括优秀的固氮功能、低光适应机制、广温性、灵活的磷利用策略以及耐受光强波动，增强了其入侵性、忍耐性和扩张性。拟柱孢藻分泌的拟柱孢藻毒素，对饮用水安全和公共卫生构成了巨大挑战。目前拟柱孢藻自南向北，从热带亚热带地区向温带地区不断扩散，此外，福建、云南、湖北、太湖流域以及山东等地也均检测到拟柱孢藻的存在。基于其藻毒素对水质安全的隐患以及形成水华对生态多样性的破坏，所以，建立一种快速准确鉴别拟柱孢藻的方法有重要意义。

2、环境dna是指从环境样本中直接获取的dna，包括动植物、微生物在空气、土壤、水体等环境中释放的dna。环境dna技术是指从环境样品中直接提取目的基因片段后利用各种分子技术进行定性或定量分析的方法。利用环境dna技术可以有效检测到水体中的隐秘物种，如处于初步入侵阶段、生物量较少的入侵物种，提高调查结果的准确性。但是难度在于环境样本环境复杂，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合，其特征在于：为以下六种引物组合之一：

2.利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合。

3.根据权利要求2所述的利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：还包括Taq酶、PCR缓冲液和无菌无酶水。

4.根据权利要求3所述的利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：还包括正对照DNA。

5.利用多重PCR检测水中入侵物种拟柱孢藻的方法，其特征在于：包括以下步骤：

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【技术特征摘要】

1.利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合，其特征在于：为以下六种引物组合之一：

2.利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的引物组合。

3.根据权利要求2所述的利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：还包括taq酶、pcr缓冲液和无菌无酶水。

4.根据权利要求3所述的利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的试剂盒，其特征在于：还包括正对照dna。

5.利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的方法，其特征在于：包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的利用多重pcr检测水中入侵物种拟柱孢藻的方法，其特征在于：步骤s1中...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨虹，陈子涵，王辉，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：