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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微载体制备,具体涉及一种含ecm的生物活性细胞微载体及其制备方法和应用。
技术介绍
1、细胞微载体是一种微尺度的颗粒,其在细胞立体培养中能使贴壁细胞在悬浮状态下贴附在颗粒表面单层生长,因而具有比普通平面培养更大的接触面积,利于细胞的大规模培养和收集。贴壁细胞在微载体表面增殖,需要经历以下三个阶段:细胞与微载体表面接触并黏附,生长以及扩增至单层细胞。由于细胞只有在良好黏附于微载体表面才能够进一步生长和增殖,因此细胞与微载体表面接触并黏附是更为关键的环节。而细胞能否在微载体表面黏附,主要取决于微载体表面的细胞相容性以及细胞与微载体的接触概率。
2、目前,微载体大多为聚合物基微载体,一般由单一聚合物组分(包括均聚物、共聚物以及多种聚合物共混物组分)组成,如聚甲基丙烯酸甲酯(pmma)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)等,但其细胞相容性较差,细胞不易在其表面黏附;有研究报道可以采用化学方法进行表面修饰,如加入多巴胺修饰胶原等方法,从而促进细胞的黏附与增殖,但同时增加了微载体的制备步骤,增加了工艺难度、微载体制备的周期和成本。
技术实现思路
1、有鉴于此,本专利技术的目的在于提供一种含ecm的生物活性细胞微载体及其制备方法和应用。
2、为达到此目的,本专利技术采用以下技术方案:
3、第一方面,本专利技术提供了一种含ecm的生物活性细胞微载体,其包括聚丙交酯-乙交酯微球和包被在所述聚丙交酯-乙交酯微球内部的脱细胞基质;
4、所述脱
5、优选地,所述脱细胞基质与聚丙交酯-乙交酯微球的质量比为(0.5~1):1。
6、优选地,所述聚丙交酯-乙交酯微球的分子量为5~10万。
7、优选地,所述含ecm的生物活性细胞微载体的粒径为100~1200μm。
8、第二方面,本专利技术提供一种上述含ecm的生物活性细胞微载体的制备方法,包括以下步骤:
9、将脱细胞基质、聚丙交酯-乙交酯的混合物,采用电流体喷射技术,制备得到含ecm的生物活性细胞微载体。
10、优选地,所述脱细胞基质、聚丙交酯-乙交酯的混合物由脱细胞基质和聚丙交酯-乙交酯溶液混合后得到。
11、优选地,所述聚丙交酯-乙交酯溶液中的溶剂为n-甲基吡咯烷酮、二氯甲烷、氯仿或六氟异丙醇中的任意一种或多种,其中聚丙交酯-乙交酯的浓度为5~10wt%。
12、优选地,所述电流体喷射技术具体为:将脱细胞基质、聚丙交酯-乙交酯的混合物电子喷射至酒精溶液中,形成含ecm的生物活性细胞微载体。
13、优选地,所述酒精溶液的浓度为20~100wt%。
14、优选地,所述电子喷射技术的电压为4.5~7.5kv。
15、第三方面,本专利技术提供一种骨修复填充材料,其包括上述技术方案涉及的含ecm的生物活性细胞微载体。
16、与现有技术相比,本专利技术的有益效果为:
17、本专利技术提供了一种含ecm的生物活性细胞微载体,其包括聚丙交酯-乙交酯微球和包被在所述聚丙交酯-乙交酯微球内部的脱细胞基质(ecm)。其中,脱细胞基质由猪皮经过脱细胞处理得到,来源广泛易于制备,脱细胞基质保持了猪皮组织的微结构并且含有不同成分的细胞外基质,有利于细胞的黏附和生长,具有可降解性而且生物相容性良好。聚丙交酯-乙交酯(plga)由丙交酯和乙交酯通过开环聚合得到,具有可降解性和良好的生物相容性。本专利技术将二者共混后,控制二者比例,采用电流体喷射技术(ehd)制备得到细胞微载体,能够有效保证细胞的黏附和生长,适合体外细胞扩增以及组织修复,可用于组织工程中的各种细胞体外扩增培养,还可直接通过注射的方式应用于体内,修复受损的组织。
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1.一种含ECM的生物活性细胞微载体,其特征在于,包括聚丙交酯-乙交酯微球和包被在所述聚丙交酯-乙交酯微球内部的脱细胞基质;
2.根据权利要求1所述的含ECM的生物活性细胞微载体,其特征在于,所述脱细胞基质与聚丙交酯-乙交酯微球的质量比为(0.5~1):1。
3.根据权利要求1或2所述的含ECM的生物活性细胞微载体,其特征在于,所述聚丙交酯-乙交酯微球的分子量为5~10万。
4.根据权利要求1或2所述的含ECM的生物活性细胞微载体,所述含ECM的生物活性细胞微载体的粒径为100~1200μm。
5.一种如权利要求1~4中任一项所述的含ECM的生物活性细胞微载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述脱细胞基质、聚丙交酯-乙交酯的混合物由脱细胞基质和聚丙交酯-乙交酯溶液混合后得到;
7.根据权利要求5或6所述的制备方法,其特征在于,所述电流体喷射技术具体为:将脱细胞基质、聚丙交酯-乙交酯的混合物电子喷射至酒精溶液中,形成含ECM的生物活性细胞微载体。
9.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述电子喷射技术的电压为4.5~7.5kV。
10.一种骨修复填充材料,其特征在于,包括权利要求1~4中任一项所述的含ECM的生物活性细胞微载体或根据权利要求5~9中任一项所述的制备方法制备得到的含ECM的生物活性细胞微载体。
...【技术特征摘要】
1.一种含ecm的生物活性细胞微载体,其特征在于,包括聚丙交酯-乙交酯微球和包被在所述聚丙交酯-乙交酯微球内部的脱细胞基质;
2.根据权利要求1所述的含ecm的生物活性细胞微载体,其特征在于,所述脱细胞基质与聚丙交酯-乙交酯微球的质量比为(0.5~1):1。
3.根据权利要求1或2所述的含ecm的生物活性细胞微载体,其特征在于,所述聚丙交酯-乙交酯微球的分子量为5~10万。
4.根据权利要求1或2所述的含ecm的生物活性细胞微载体,所述含ecm的生物活性细胞微载体的粒径为100~1200μm。
5.一种如权利要求1~4中任一项所述的含ecm的生物活性细胞微载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
6.根据权利要求5所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:章培标,周小松,王宇,王宗良,郭敏,武振旭,
申请(专利权)人:中国科学院长春应用化学研究所,
类型:发明
国别省市:
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