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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
技术实现思路
【技术保护点】
1.一种水溶液,包括琥珀酸盐、甘露醇,和葡萄糖、蔗糖和肌醇中的一种糖,谷氨酰胺或其类似物,以及抗氧化剂。
2.权利要求1所述的水溶液,其中糖为D-葡萄糖。
3.权利要求1或2所述的水溶液,其中谷氨酰胺或其类似物从L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、L-谷氨酰胺和D-谷氨酰胺中选择。
4.前述任意权利要求所述的水溶液,其中琥珀酸盐为琥珀酸钠、琥珀酸钾或琥珀酸镁。
5.前述任意权利要求所述的水溶液,其中抗氧化剂为丙酮酸钠或乙酰半胱氨酸。
6.前述任意权利要求所述的水溶液,还包括Na2HPO4和NaH2PO4。
7.前述任意权利要求所述的水溶液,还包括血清。
8.前述任意权利要求所述的水溶液,其中包含浓度低于80mM的NaCl,或最好低于70mM、60mM或50mM NaCl。
9.权利要求8所述的水溶液,其中包括浓度为5mM至30mM的琥珀酸钠,浓度为1mM至30mM的甘露醇,浓度为3mM至30mM的葡萄糖,浓度为50mg/L至900mg/L的L-谷氨酰胺或L-丙氨酰-L-谷氨酰胺,浓度为0.1mM
10.一种将多聚核苷酸递送至细胞的方法,在权利要求1-9所述的任何一种水溶液中进行,包括将电脉冲施加于包含多聚核苷酸和细胞的样品上。
11.一种将多聚核苷酸递送至细胞的方法,包括将电脉冲施加于包含多聚核苷酸和细胞的样品中,所述样品置于包含浓度低于80mM NaCl的培养基中,或最好低于70mM、60mM或50mM NaCl的培养基中。
12.权利要求11所述方法中,培养基包括琥珀酸盐、甘露醇、一种糖、谷氨酰胺或其类似物,以及一种抗氧化剂。
13.权利要求10-12任意一条所述方法中,多聚核苷酸是DNA或RNA。
14.权利要求13所述方法中,DNA是单链DNA或双链DNA。
15.权利要求13所述方法中,RNA是siRNA、sgRNA、信使RNA或双链RNA、反义RNA、tRNA或RNA适配体。
16.权利要求15所述方法中,RNA以RNA蛋白复合物的形式提供。
17.权利要求10-16任意一条所述方法中,细胞是哺乳动物细胞。
18.权利要求17所述方法中,培养基中还包括抑制cGAS-STING通路的药剂。
19.权利要求18所述方法中,药剂为靶向cGAS或STING蛋白的siRNA或抗体。
20.利用权利要求10-19任意一条所述方法,使多聚核苷酸进入细胞核中。
21.一种将生物分子递送至细胞的方法,包括在渗透压高于310mOsmol/kg的水溶液中,将电脉冲施加于包含生物分子和细胞的样品中,其中生物分子可以是RNA分子、蛋白质或它们的组合。
22.权利要求21所述方法中,其中水溶液的渗透压高于320mOsmol/kg、330mOsmol/kg、340mOsmol/kg或350mOsmol/kg。
23.权利要求21或22所述方法中,渗透压低于600渗透压。
24.权利要求21-23任意一条所述方法中,水溶液符合权利要求1-9中的任何一项。
25.权利要求21-24任意一条所述方法中,水溶液包括用于调整水溶液渗透压的非电解质溶剂。
26.权利要求25所述方法中,非电解质溶剂组分从葡萄糖、蔗糖、果糖、甘露醇、山梨醇、乳糖、海藻糖、甘油、PEG300、PEG400、PEG600、甘氨酸、脯氨酸、牛磺酸、甜菜碱和硼酸等中选择。
27.权利要求25或26所述方法中,非电解质溶液的浓度为10mM至300mM、20mM至300mM、30mM至300mM、40mM至300mM、50mM至300mM、10mM至200mM、20mM至200mM、30mM至200mM、40mM至200mM、50mM至200mM、10mM至100mM、20mM至100mM、30mM至100mM、40mM至100mM或50mM至100mM。
28.权利要求21-24任意一条所述方法中,水溶液包括用于调整水溶液渗透压的电解质溶剂。
29.权利要求28所述方法中,电解质溶剂组分从NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2、Ca(NO3)2、MgSO4和NaHCO3等中选择。
30.权利要求28或29所述方法中,其中非电解质溶液的浓度为3mM至90mM,4mM至90mM,5mM至90mM,6mM至90mM,7mM至90mM,8mM至90mM,9mM至90mM,10mM至90mM,15mM...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种水溶液,包括琥珀酸盐、甘露醇,和葡萄糖、蔗糖和肌醇中的一种糖,谷氨酰胺或其类似物,以及抗氧化剂。
2.权利要求1所述的水溶液,其中糖为d-葡萄糖。
3.权利要求1或2所述的水溶液,其中谷氨酰胺或其类似物从l-丙氨酰-l-谷氨酰胺、l-谷氨酰胺和d-谷氨酰胺中选择。
4.前述任意权利要求所述的水溶液,其中琥珀酸盐为琥珀酸钠、琥珀酸钾或琥珀酸镁。
5.前述任意权利要求所述的水溶液,其中抗氧化剂为丙酮酸钠或乙酰半胱氨酸。
6.前述任意权利要求所述的水溶液,还包括na2hpo4和nah2po4。
7.前述任意权利要求所述的水溶液,还包括血清。
8.前述任意权利要求所述的水溶液,其中包含浓度低于80mm的nacl,或最好低于70mm、60mm或50mm nacl。
9.权利要求8所述的水溶液,其中包括浓度为5mm至30mm的琥珀酸钠,浓度为1mm至30mm的甘露醇,浓度为3mm至30mm的葡萄糖,浓度为50mg/l至900mg/l的l-谷氨酰胺或l-丙氨酰-l-谷氨酰胺,浓度为0.1mm至0.6mm的丙酮酸钠,并且包含低于60mm的nacl。
10.一种将多聚核苷酸递送至细胞的方法,在权利要求1-9所述的任何一种水溶液中进行,包括将电脉冲施加于包含多聚核苷酸和细胞的样品上。
11.一种将多聚核苷酸递送至细胞的方法,包括将电脉冲施加于包含多聚核苷酸和细胞的样品中,所述样品置于包含浓度低于80mm nacl的培养基中,或最好低于70mm、60mm或50mm nacl的培养基中。
12.权利要求11所述方法中,培养基包括琥珀酸盐、甘露醇、一种糖、谷氨酰胺或其类似物,以及一种抗氧化剂。
13.权利要求10-12任意一条所述方法中,多聚核苷酸是dna或rna。
14.权利要求13所述方法中,dna是单链dna或双链dna。
15.权利要求13所述方法中,rna是sirna、sgrna、信使rna或双链rna、反义rna、trna或rna适配体。
16.权利要求15所述方法中,rna以rna蛋白复合物的形式提供。
17.权利要求10-16任意一条所述方法中,细胞是哺乳动物细胞。
18.权利要求17所述方法中,培养基中还包括抑制cgas-sting通路的药剂。
19.权利要求18所述方法中,药剂为靶向cgas或sting蛋白的sirna或抗体。
20.利用权利要求10-19任意一条所述方法,使多聚核苷酸进入细胞核中。
21.一种将生物分子递送至细胞的方法,包括在渗透压高于310mosmol/kg的水溶液中,将电脉冲施加于包含生物分子和细胞的样品中,其中生物分子可以是rna分子、蛋白质或它们的组合。
22.权利要求21所述方法中,其中水溶液的渗透压高于320mosmol/kg、330mosmol/kg、340mosmol/kg或350mosm...
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