【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本公开整体涉及蜡-微球基质组合物及其制备和使用方法。
技术介绍
1、许多当前的测序平台使用“边合成边测序”(“sbs”)技术和基于荧光的检测方法。期望将允许更具成本效益、更快速和更方便的测序和核酸检测的替代测序方法和改善的样品及文库制备过程作为sbs的补充。
2、用于sbs技术的当前方案通常采用将dna或rna转化为适于测序的片段化模板文库的样品制备过程。样品制备方法通常涉及多个步骤、材料转移以及昂贵的仪器来实现片段化，并且因此往往是困难、繁琐、昂贵且低效的。
3、通常按任何合适的方式制备包含多核苷酸的文库，以将寡核苷酸衔接子附着到目标多核苷酸上。测序可导致确定目标多核苷酸的全部或部分序列。通过使用转座酶介导的片段化和加标签，可使在准备用于簇形成和测序的溶液中将核酸转化成衔接子修饰的模板所涉及的步骤数量减少或在一些情况下甚至最小化。该过程称为“标签片段化”(tagmentation)，其涉及通过转座体复合物修饰核酸，该转座体复合物包含与包括转座子末端序列的衔接子复合的转座酶，如例如wo 2016/130704中所...
【技术保护点】
1.一种方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一熔融条件包括温度的改变。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述第一熔融条件包括高于约40℃的温度。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法还包括：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第一释放条件包括添加水溶液。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述第一释放条件包括将所述组合物与所述水溶液混合。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述多个冻干微球中的至少一个冻干微球包含围绕...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种方法，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一熔融条件包括温度的改变。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述第一熔融条件包括高于约40℃的温度。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法还包括：
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述第一释放条件包括添加水溶液。
6.根据权利要求5所述的方法，其中所述第一释放条件包括将所述组合物与所述水溶液混合。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述多个冻干微球中的至少一个冻干微球包含围绕内部隔室的壳，其中所述内部隔室包含所述一种或多种试剂。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，所述方法还包括：
9.根据权利要求8所述的方法，其中所述第二释放条件释放所述一种或多种试剂。
10.根据权利要求8或权利要求9所述的方法，其中所述第二释放条件不同于所述第一释放条件。
11.根据权利要求8至10中任一项所述的方法，所述方法还包括：
12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，其中所述分离条件包括温度的改变。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述分离条件包括处于或低于约40℃的温度。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，所述方法还包括：
15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含样品制备试剂、样品提取试剂、文库制备试剂、富集试剂、成簇试剂、测序试剂或它们的任何组合。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂选自一种或多种酶、盐、表面活性剂、缓冲剂、酶抑制剂、引物、核苷酸、有机渗透物、磁珠、分子探针、拥挤剂、小分子、带标记的核苷酸或它们的任何组合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述多个冻干微球包含一种或多种干试剂、一种或多种小珠、一种或多种粉末、一种或多种饼或它们的任何组合。
18.根据权利要求10所述的方法，其中所述第二释放条件释放一种或多种试剂。
19.根据权利要求11所述的方法，其中所述第三释放条件释放一种或多种试剂。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含多种试剂，其中所述多种试剂含有至少两种不同的试剂。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含多种试剂，其中所述多种试剂含有与至少一种其他试剂相同的至少一种试剂。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述多个微球包含多于一种试剂。
23.根据权利要求1至21中任一项所述的方法，其中所述多个微球包含一种试剂。
24.根据权利要求1至23中任一项所述的方法，其中将所述组合物暴露于所述第一熔融条件、所述第一释放条件和所述分离条件依序地或按顺序发生。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的方法，其中所述蜡组分包含选自以下的蜡：鲸蜡、日本蜡、石蜡、纯地蜡、地蜡、蜂蜡、小烛树蜡、褐煤蜡、巴恩斯达尔蜡、小冠椰子蜡、巴西棕榈蜡或它们的任何组合。
26.根据权利要求1至25中任一项所述的方法，所述方法还包括使所述至少一个再水合的冻干微球的所述一种或多种试剂流过流通池。
27.根据权利要求26所述的方法，所述方法还包括在边合成边测序过程期间使所述至少一个再水合的冻干微球的所述一种或多种试剂流过流通池。
28.一种制备蜡-微球基质的方法，所述方法包括：
29.根据权利要求28所述的方法，其中所述蜡-微球基质包含随机分布的所述多个冻干微球。
30.根据权利要求28所述的方法，其中所述蜡-微球基质包含均匀分布的所述多个冻干微球。
31.根据权利要求28至30中任一项所述的方法，其中所述蜡-微球基质处于高于约40℃的温度。
32.根据权利要求31所述的方法，所述方法还包括：
33.根据权利要求32所述的方法，其中所述降低所述蜡-微球基质的温度包括处于或低于约40℃的温度。
34.根据权利要求28至33中任一项所述的方法，其中所述多个冻干微球中的至少一个冻干微球包含围绕内部隔室的壳，其中所述内部隔室包含所述一种或多种试剂。
35.根据权利要求28至34中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含样品制备试剂、样品提取试剂、文库制备试剂、富集试剂、成簇试剂、测序试剂或它们的任何组合。
36.根据权利要求28至35中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂选自一种或多种酶、盐、表面活性剂、缓冲剂、酶抑制剂、引物、核苷酸、有机渗透物、磁珠、分子探针、拥挤剂、小分子、带标记的核苷酸或它们的任何组合。
37.根据权利要求28至36中任一项所述的方法，其中所述多个冻干微球包含一种或多种干试剂、一种或多种小珠、一种或多种粉末、一种或多种饼或它们的任何组合。
38.根据权利要求28至37中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含多种试剂，其中所述多种试剂包含至少两种不同的试剂。
39.根据权利要求28至38中任一项所述的方法，其中所述一种或多种试剂包含多种试剂，其中所述多种试剂含有与至少一种其他试剂相同的至少一种试剂。
40.根据权利要求28至39中任一项所述的方法，其中所述蜡组分包含选自以下的蜡：鲸蜡、日本蜡、石蜡、纯地蜡、地蜡、蜂蜡、小烛树蜡、褐煤蜡、巴恩斯达尔蜡、小冠椰子蜡、巴西棕榈蜡或它们的任何组合。
41.根据权利要求28所述的方法，所述方法还包括：
42.根据权利要求41所述的方法，其中混合包括：
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【专利技术属性】
技术研发人员：塞巴斯蒂安·里库尔特，
申请(专利权)人：因美纳有限公司，
类型：发明
国别省市：
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