【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及唾液酸提取，尤其是涉及一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法。
技术介绍
1、唾液酸是脑神经节苷脂和修饰神经细胞黏附分子的聚唾液酸链的重要成分，对促进婴儿大脑和神经系统发育、增强婴儿认知能力、抗病毒和促进肠道发育等有重要作用。自身肝脏组织合成和外源食物供给是机体唾液酸的主要来源，但由于婴幼儿肝脏合成唾液酸的能力有限，而婴儿(尤其是早产儿)大脑的快速发育又对膳食中营养物质的供应有极高需求，所以在生命初期，必须保证充足的外源性唾液酸摄入才能满足机体发育的需要。
2、母乳(或母体)是婴幼儿(或胎儿)营养素的主要来源，其中含量丰富的唾液酸对促进孕晚期胎儿或出生后婴幼儿的生长发育极其重要。所以唾液酸产品是婴幼儿配方奶粉的必需成分。另外，唾液酸还有抗识别作用、抗病毒作用、抑制白细胞粘附和抗炎作用。
3、鉴于唾液酸在母婴食品中应用的被持续关注，开发高效、安全、经济的唾液酸工业生产方法具有重要的经济和社会意义。目前，唾液酸的制备方法主要包括化学合成法、酶合成法、微生物发酵法和天然原料提取法。
4、其中，酶法合成法与化学合成法都需要昂贵的底物n-乙酰葡萄糖胺和丙酮酸，成本较高；化学合成过程还需大量有机溶剂，合成条件也较为苛刻，难以在工业规模化生产中广泛应用；微生物发酵法产物浓度低，常伴有副产物；全细胞生物转化法由于使用的是活细胞，在转化过程也存在着分解代谢和二次产物的问题。
5、天然提取法以食物原料为基础进行分离提取，有着安全可靠的优势。禽蛋蛋黄来源广泛，价格低廉，富含功能成分，尤其是禽
6、然而，由于唾液酸在蛋黄中的含量偏低，不恰当的分离制备方法使其损失严重，且丧失活性，因此如何获得高质量的唾液酸成为研究的难题之一。现有的蛋黄唾液酸提取技术一般包括有机试剂脱脂、苯酚预处理或酸化处理、柱层析脱色或脱盐、离子交换法纯化等步骤，普遍存在化学试剂污染、步骤繁琐，耗时、能耗和成本高、污染严重且唾液酸产品质量不稳定等实际问题。
7、此外，在分离过程中，每一步骤的操作都将不可避免地导致唾液酸有不同程度的损失；同时由于操作步骤繁多，导致产品得率很低，仅为50～60％左右。因此，开发出一种满足婴幼儿配方食品的安全要求、操作简单、纯化周期短、得率高的唾液酸规模化生产新技术，不仅可以丰富婴幼儿配方食品所需功能性配料的种类，而且对提高禽蛋附加值，优化禽蛋产业结构具有重要应用价值。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，旨在解决现有唾液酸制备技术中普遍存在化学试剂污染、生产周期长、能耗和成本高、污染严重的问题。
2、为实现上述目的，本专利技术提供了一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，s1、制备蛋黄溶液；
3、s2、通过亚临界水反应萃取步骤s1所得蛋黄溶液中的唾液酸，反应结束后进行固液分离，收集上清液；
4、s3、将步骤s2中所得上清液减压浓缩至原来体积的1/8～1/5；
5、s4、将步骤s3所得浓缩液进行树脂吸附纯化，收集的层析峰进行纳滤脱盐后得到唾液酸溶液；
6、s5、将步骤s4中所得唾液酸溶液浓缩干燥后得到唾液酸纯品。
7、优选的，所述步骤s1中制备蛋黄溶液包括：向蛋黄原料中均匀加入一定体积的蒸馏水。
8、优选的，所述蛋黄原料为新鲜禽蛋黄，蒸馏水加入量为新鲜禽蛋黄体积的0.6～3倍。
9、优选的，所述蛋黄原料为蛋黄粉，蒸馏水加入量为蛋黄粉体积的8～20倍。
10、优选的，所述步骤s2中亚临界水反应萃取包括：
11、将蛋黄溶液置于高压反应釜中密封并充入氮气，在0～20mpa、100～170℃条件下制备亚临界状态水，用亚临界水反应萃取5～40min。
12、优选的，所述步骤s3中减压浓缩为：将上清液置于旋转蒸发仪中，在0.09mpa、75℃条件下浓缩。
13、优选的，所述步骤s4中树脂吸附纯化包括：使用凝胶型大孔吸附树脂作为层析填料，将步骤s3中获得的上清液注入到树脂中，用0～5mol/l的氯化钠进行对等度洗脱，收集层析峰。
14、优选的，所述大孔吸附树脂为凝胶型碱性阴离子树脂，洗脱液的离子强度为0.1～0.5m，洗脱流速为0～3ml/min。
15、优选的，据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤s4中纳滤条件为：使用nf90膜组件，在20～40℃、操作压力20～40bar下进行膜过滤，收集截留液。
16、因此，本专利技术采用上述一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，具有如下技术效果：
17、(1)根据蛋黄成分组成特点设计唾液酸提取方案：首先根据脂质、脂溶性色素和唾液酸分子极性的差异，采用亚临界水法将其分离，再利用唾液酸与其它共存蛋白质分子电荷性质的巨大差异采用阴离子树脂吸附法将其纯化；通过亚临界水法同时实现唾液酸的水解和蛋黄脱色，整个过程中仅需一步，大幅简化操作步骤的同时也降低了购买层析填料的成本；
18、(2)本专利技术整个过程仅需10～12小时即可完成，与现有方法3～5天的周期相比，时间大幅缩短，提高效率同时降低人工成本；
19、(3)本专利技术利用亚临界水法从蛋黄中制备唾液酸，通过控制亚临界水反应的温度和时间，提高唾液酸的溶出率，减少唾液酸的降解，所得唾液酸样品纯度达到98％以上，在保持高纯度的同时，回收率大幅提高，回收率从现有方法的约60％提高至90％以上，充分利用了禽蛋资源；
20、(4)本专利技术的唾液酸制备过程仅以水作为唯一萃取剂，不使用任何有机试剂或酸碱溶液，有效避免了常规技术方法造成的酸水排放和环境污染问题，最大限度地保持了唾液酸产品的生物活性，制备得到的唾液酸产品安全性高，适合添加到婴幼儿配方奶粉中。
21、下面通过附图和实施例，对本专利技术的技术方案做进一步的详细描述。
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1.一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述步骤S1中制备蛋黄溶液的操作为向蛋黄原料中均匀加入蒸馏水后搅拌即得。
3.根据权利要求2所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述蛋黄原料为新鲜禽蛋黄，蒸馏水加入量为新鲜禽蛋黄体积的0.6～3倍。
4.根据权利要求2所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述蛋黄原料为蛋黄粉，蒸馏水加入量为蛋黄粉体积的8～20倍。
5.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤S2中亚临界水反应萃取方法为：
6.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤S3中减压浓缩方法为：将上清液置于旋转蒸发仪中，在0.09Mpa、75℃条件下浓缩。
7.根据权利要求6所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤S4中树脂吸附纯化方法为：使用凝胶型大孔吸附树脂作为层析填
8.根据权利要求7所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂为凝胶型碱性阴离子树脂，洗脱液的离子强度为0.1～0.5M，洗脱流速为0～3mL/min。
9.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤S4中纳滤条件为：使用NF90膜组件，在20～40℃、操作压力20～40bar下进行膜过滤，收集截留液。
...【技术特征摘要】
1.一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述步骤s1中制备蛋黄溶液的操作为向蛋黄原料中均匀加入蒸馏水后搅拌即得。
3.根据权利要求2所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述蛋黄原料为新鲜禽蛋黄，蒸馏水加入量为新鲜禽蛋黄体积的0.6～3倍。
4.根据权利要求2所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于：所述蛋黄原料为蛋黄粉，蒸馏水加入量为蛋黄粉体积的8～20倍。
5.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征在于，所述步骤s2中亚临界水反应萃取方法为：
6.根据权利要求1所述的一种基于亚临界水萃取的唾液酸提取方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：单媛媛，侯博林，刘金龙，单玲玲，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：
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