一种石蒜NBS基因及其提高石蒜中加兰他敏含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种石蒜NBS基因及其提高石蒜中加兰他敏含量的方法，涉及人工基因应用技术领域。本发明专利技术通过对长筒石蒜根、叶片、鳞茎转录组测序，组装拼接后构建了一条石蒜NBS基因，其序列如SEQ ID NO:1所示，通过将其引入石蒜植株，经过遗传转化，测定结果显示pBWA(V)HS‑NBS‑GLosgfp转基因植株比空载体pBWA(V)HS‑GLosgfp植株下加兰他敏(GAL)含量明显提高，因此本发明专利技术成功构建了一条能够提高石蒜中加兰他敏含量的基因。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及人工基因应用，具体涉及一种石蒜nbs基因及其提高石蒜中加兰他敏含量的方法。

技术介绍

1、石蒜属植物是原产中国的特色观赏和药用花卉，迄今为止，从石蒜科植物中分离出超过600种结构各异的生物碱类化合物，植物化学研究表明这类化合物具有多种药理学功能，药用价值极高。例如水仙环素具有抗肿瘤的活性；石蒜碱可以阻断细胞周期，诱发癌细胞系hl-60的细胞凋亡；网球花胺具有抗癌活性等。其中加兰他敏(gal)是一种石蒜科植物特有的异喹啉生物碱，作为乙酰胆碱酯酶抑制剂，可影响大脑尼古丁受体以及抑制乙酰胆碱酯酶活性，是治疗阿尔茨海默症(alzheimer’s disease,ad,老年痴呆症早期症状)的首选药物之一，该药已在欧美和中国主要市场批准上市。

2、包括加兰他敏在内的许多植物次生代谢产物在植物中的含量较低且资源有限，这极大的限制了这类具有极高药用价值的植物天然产物的商业化应用。例如加兰他敏在夏雪片莲中的含量仅为0.05-0.17％左右，利用hplc方法在石蒜鳞茎中测定的含量约在0.30-5.15mg/g，且不同种间和不同地理来源的含量差异较大；本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种石蒜NBS基因，其特征在于，所述NBS基因序列如SEQ ID NO:1所示。

2.一种提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.如权利要求2所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述共培养的培养基配方为：蔗糖30g/L+琼脂7.5g/L+MS+3.0mg/L 6-BA+1.5mg/L NAA+100μmAS，pH为5.8。

4.如权利要求3所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(4)暗培养时间为3d，培养温度25±1℃。

5.如权利要求2所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其...

【技术特征摘要】

1.一种石蒜nbs基因，其特征在于，所述nbs基因序列如seq id no:1所示。

2.一种提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.如权利要求2所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述共培养的培养基配方为：蔗糖30g/l+琼脂7.5g/l+ms+3.0mg/l 6-ba+1.5mg/l naa+100μmas，ph为5.8。

4.如权利要求3所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(4)暗培养时间为3d，培养温度25±1℃。

5.如权利要求2所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(5)中，所述含有抗生素的培养基的配方为：蔗糖30g/l+琼脂7.5g/l+ms+6.0mg/l 6-ba+1.5mg/lnaa+25mg/l kana+100mg/l头孢。

6.如权利要求5所述的提高石蒜中加兰他敏含量的方法，其特征在于，步骤(5)的暗培养的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李青竹，蔡友铭，张永春，杨柳燕，许俊旭，孙翊，杨贞，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：