木聚糖酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术涉及基因工程领域，公开了一种木聚糖酶突变体及其应用。该突变体是基于瘤胃真菌木聚糖酶CDBFV，通过分子动力学模拟筛选出一段柔性较大的基序<supgt;36</supgt;GNNS<supgt;39</supgt;，该基序中N37、N38保守性较差，并构建了两个单点突变体N37P、N38V，在大肠杆菌中进行表达，85℃孵育3min相对活力分别为70.26%和55.13%，较野生型有提升；进而在热稳定性提升显著的N37P的基础上叠加优势突变体N88G，双突变体N37P/N88G的相对活力73.36%，比野生型CDBFV提高了24.7%；将N37P/N88G在毕赤酵母中进行分泌表达，85℃处理3min相对活力为88.84%，进而丰富了工业化耐热酶资源。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，具体地说，涉及一种木聚糖酶突变体及其应用。

技术介绍

1、木聚糖是常用饲料原料中的主要抗营养因子之一，消除木聚糖的抗营养作用对进一步提高饲料资源利用率、拓宽饲料资源和提高养殖经济效益具有重要意义。木聚糖酶是通过水解木聚糖分子的β-1,4-糖苷键将木聚糖水解，木聚糖酶通过降解木聚糖抗营养因子，可提高饲料营养价值以及动物对饲料的利用率，还减少了动物排泄物造成的环境污染。因此，木聚糖酶在发展绿色环保型畜牧养殖业中具有意义重大。

2、木聚糖酶无论是在饲料中应用还是在纸浆漂白、纺织品纤维修饰以及人类的食品生产中应用，都面临着对其酶学性质的考验，主要包括耐温性和不同ph下的耐受性。例如，木聚糖酶在饲料制粒阶段即处于湿热环境中，其耐热性能不好将会导致木聚糖酶在饲料制备期间不可逆地失活，严重影响使用效果；在纸浆预漂白过程中碱洗的物料具有较高的温度(>80℃)，如果木聚糖酶不耐温则需要将纸浆冷却，但这意味着成本的增加。因此，提供一种适用于工业生产的耐高温木聚糖酶具有重要的现实意义。

3、定点突变是利用合成的寡核苷酸作本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含木聚糖酶第37位氨基酸由N到P的突变；

2.木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含木聚糖酶第37位氨基酸由N到P的突变以及第88位氨基酸由N到G的突变；

3.编码权利要求1或2所述突变体的核酸分子。

4.含有权利要求3所述核酸分子的生物材料，其特征在于，所述生物材料为重组DNA、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体或工程菌。

5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微生物表达权利要求1或2所述突变体。

6.根据权利要求5所述的重组微生物，其特征在于，所述重组微生物为大肠杆菌（Esc...

【技术特征摘要】

1.木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含木聚糖酶第37位氨基酸由n到p的突变；

2.木聚糖酶突变体，其特征在于，所述突变体包含木聚糖酶第37位氨基酸由n到p的突变以及第88位氨基酸由n到g的突变；

3.编码权利要求1或2所述突变体的核酸分子。

4.含有权利要求3所述核酸分子的生物材料，其特征在于，所述生物材料为重组dna、表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体或工程菌。

5.一种重组微生物，其特征在于，所述重组微...

【专利技术属性】
技术研发人员：王海燕，辛凤姣，张广民，谷天一，张阿娜，雷恒，李勇，蔡辉益，
申请(专利权)人：北京挑战生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：