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用于探测在免疫荧光图像上存在荧光图案的方法和装置制造方法及图纸

技术编号:40870642 阅读:2 留言:0更新日期:2024-04-08 16:37
本发明专利技术提出一种用于探测在生物细胞基质的免疫荧光图像上存在荧光图案的方法,所述方法具有步骤:以液体的病人样品培育细胞基质,所述病人样品潜在地具有一抗和以荧光染料标记出的二抗,照射细胞基质以及检测免疫荧光图像;确定定位信息,所述定位信息指示细胞基质的相应的部分区域在荧光图像中的定位,并且基于整个荧光图像借助第一神经网络确定荧光图案在相应的部分区域上存在的第一部分置信度;基于定位信息从荧光图像中提取与细胞基质的相应的部分区域对应的部分图像区域;基于相应的部分图像区域借助第二神经网络确定荧光图案在相应的部分区域上存在的第二部分置信度;基于第一和第二部分置信度确定荧光图案在所述荧光图像中存在的置信度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于探测在生物细胞基质的免疫荧光图像上存在荧光图案的方法以及装置。本专利技术此外涉及数字图像处理方法、计算机程序产品、数据载体信号、计算单元以及数据网络装置。


技术介绍

1、可以通过图像采集单元例如显微镜检测生物细胞基质的免疫荧光图像。为了辅助诊断性提问的目的,关于在荧光图像上存在要期待的荧光图案的信息可能是有利的。

2、免疫荧光显微镜或间接免疫荧光显微镜是用于确定针对确定的抗原的人体抗体的存在的体外测试,以便可以回答或评估诊断性提问。这样的抗原例如处于生物细胞基质的确定的区域中。因此通过如下方式细胞基质作为基质起作用,所述细胞基质利用以血液或稀释的血液亦或血清或稀释的血清形式的病人样品来培育。因此病人样品潜在地具有确定的一抗,所述一抗可以表明病人的疾病的存在。这样的一抗或特异性抗体于是可以结合到基质的抗原上。于是可以通过如下方式标记出这样结合的一抗,即,在另一个培育步骤中所谓的二抗、优选抗人抗体可以结合到已结合的一抗上并且之后通过以荧光染料标记出二抗而可见。这样的荧光染料优选是绿色的荧光染料、特别是荧光染料fitc。一抗与荧光标记的二抗共同的这样的结合于是可以之后通过如下方式可见,即,以确定的波长的激励光照射基质并且因此激励结合的荧光染料至发射荧光辐射。

3、根据诊断性提问,可以考虑在确定的基质区域上的一个或完全确定的荧光图案类型的存在。因此得出任务,借助数字图像处理在免疫荧光显微镜的过程中在以规定的方式培育的细胞基质中探测在免疫荧光显微镜的荧光图像中存在潜在的荧光图案。

4、生物细胞基质在这里特别是可以是细胞系的细胞涂片、细胞系的菌落和/或特别是来自组织切片的包括生物组织细胞的生物组织。

5、在间接免疫荧光测试(iift)中,优选用于检定抗胰岛自身抗体(islet cellantibodies=ica),使用灵长类胰腺的基质的冷冻固定的组织切片。胰腺可以分成外分泌和内分泌区域。抗胰岛细胞抗体只与该器官的内分泌的部分、即也称为“islet”的朗格汉斯胰岛反应,并且针对产生胰岛素的β细胞。作为抗原鉴定的是谷氨酸脱羧酶的65kda亚型(gad65)、酪氨酸磷酸酶同源的ia-2蛋白质(ia-2α和ia-2β)、阳离子转运蛋白znt8、胰岛素和胰岛素前体胰岛素原。

6、β细胞的造成的破坏导致胰岛素缺乏并且这样导致1型糖尿病。在70至80%的1型糖尿病患者中,可以在临床表现的时刻检定有胰岛细胞抗体。所述胰岛细胞抗体因此是在1型糖尿病和2型糖尿病(老年糖尿病)之间的重要区别特征。

7、关于1型糖尿病的特别的发展情况、成人隐匿性自身免疫性糖尿病(latentautoimmune diabetes in adults=lada),胰岛细胞抗体也作为用于病人的胰岛素依赖性的判据起作用。lada在3至12%的具有表型2型糖尿病的病人中存在,该型糖尿病的特征在于胰岛素抵抗和β细胞胰岛素分泌受损。

8、在90%的病人中,已经在糖尿病表现数年之前可检定有胰岛细胞抗体。所述胰岛细胞抗体作为所谓的前糖尿病阶段的标记适用。因此可以保证对具有提高的疾病风险的人的及早的鉴定。通过合适的干预,借此也许能够阻止疾病的爆发。

9、用于胰岛细胞抗体的滴定浓度随着疾病的进展又减小。针对胰岛细胞(gad65)的自身抗体的非常高的浓度可以作为对肌强直综合症、小脑退化和边缘脑炎的提示。

10、在间接免疫荧光测试中,胰腺组织的朗格汉斯胰岛在阳性结果中示出微斑的、光滑的直至粒状的荧光。

11、可以在间接免疫荧光测试(iift)中此外优选使用如下基质,在所述基质中,多个crithidia luciliae细胞固定在所述基质上。这样的基质特别是是细胞涂片。例如可以借助乙醇进行这样的固定。于是可以使用所述基质用于探测病人样品的自身抗体到双链脱氧核糖核酸(dns)上的结合。针对脱氧核糖核酸(dns)的自身抗体的检定例如对于诊断sle(同义词:lupus erythematodes disseminatus)有决定性的意义。在这里必须原则上区分两种类型:抗dsdns的抗体和针对单链变性dns(单链dns,ssdns)的抗体。抗dsdns的抗体与表位反应,所述表位处于dns的与此相反,针对ssdns的抗体主要结合到来自嘌呤或嘧啶碱的区域的表位。但所述抗体也可以识别脱氧核糖磷酸骨架的表位。几乎仅在脱氧核糖磷酸骨架中。sle中发现抗dsdns抗体。分别按照检定方法和疾病活性,其流行度为20%至90%。抗dsdns抗体有时也在具有其他的自身免疫性疾病和感染的病人中以及在少有的情况中在临床健康的人中被检定。后者在抗dsdns第一次检定的5年内在85%的情况中发展为sle。不过当没有抗dsdns的抗体存在时,不能够完全排除sle。sle是来自于结缔组织疾病组中的系统性自身免疫性疾病。所述诊断依据american college of rheumatology(acr)的1997版修订的11个判据。在存在所述11个判据中的4个判据时,可以以80至90%的确定性作出sle的诊断。因此间接免疫荧光可以是用于确定抗dsdns的人体抗体的体外测试。例如所谓的生物芯片可以作为基质起作用,所述基质以crithidia luciliae涂片涂敷。这些涂片例如以稀释的病人样品培育。在阳性反应中,特异性抗体结合到抗原上。结合的抗体(igg)在第二培育步骤中例如以荧光素标记出的抗人抗体染色并且在荧光显微镜中可见。


技术实现思路

1、本专利技术的任务是,提供一种用于分析生物细胞基质的免疫荧光图像的自动化的方法,所述方法可以探测在细胞基质上存在荧光图案。

2、按照本专利技术的任务通过按照权利要求1的按照本专利技术的方法解决。

3、按照本专利技术,所述方法具有不同的步骤。

4、图1a示出示例性的荧光图像fb1、在该示例中胰腺的组织切片的荧光图像。在所述荧光图像fb1的示例中,不存在要期待的荧光图案。图1b示出另一个荧光图像fb2、同样在该情况中胰腺的荧光图像,其中在这里存在要期待的荧光图案。

5、对于以胰腺切片形式的基质的示例,所谓的胰岛或者说islet是哪些适应于确定的或相关的部分区域。

6、图2a为此对于荧光图像fb1示出区域tba作为部分图像区域,所述部分区域主要具有islet或者说胰岛。在区域tba中,不存在要期待的荧光图案。图2b为此对于荧光图像fb2示出部分图像区域tbb1、tbb2、tbb3,所述部分图像区域包括相应的islet或者说胰岛,要期待的荧光图案在所述islet或者说胰岛上存在。这些部分图像区域tbb1、...、tbb3又一次在图2c中单独且放大地示出。

7、图3a对于以crithidia luciliae细胞的细胞涂片形式的细胞基质的示例示出荧光图像fb11,在所述荧光图像中基本上不存在要期待的荧光图案。图3b示出以crithidialuciliae细胞的细胞涂片形式的细胞基质的荧光图像的示例,在所述荧光图本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于探测在生物细胞基质的免疫荧光图像上存在荧光图案的方法,

2.按照权利要求1所述的方法,

3.按照权利要求1所述的方法,

4.按照权利要求所述的方法3,

5.按照权利要求1所述的方法,

6.按照权利要求1所述的方法,

7.用于数字图像处理的方法,

8.计算机程序产品(CPP),所述计算机程序产品包括指令,所述指令在所述程序通过计算机执行时引起所述计算机实施按照权利要求7所述的用于数字图像处理的方法。

9.数据载体信号(SI2),所述数据载体信号传输按照权利要求8所述的计算机程序产品(CPP)。

10.用于探测在生物细胞基质的免疫荧光图像(FB)上的至少一个荧光图案的装置,

11.计算单元(R),其构成用于在数字图像处理的过程中执行如下步骤:

12.数据网络装置(DV),

【技术特征摘要】

1.用于探测在生物细胞基质的免疫荧光图像上存在荧光图案的方法,

2.按照权利要求1所述的方法,

3.按照权利要求1所述的方法,

4.按照权利要求所述的方法3,

5.按照权利要求1所述的方法,

6.按照权利要求1所述的方法,

7.用于数字图像处理的方法,

8.计算机程序产品(cpp),所述计算机程序产品包括指令,所述指令在所...

【专利技术属性】
技术研发人员:J·克劳特J·霍克S·格拉赫C·克劳泽M·哈恩J·福格特
申请(专利权)人:欧蒙医学实验诊断股份公司
类型:发明
国别省市:

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