基于LAMP检测有青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的引物组合物、试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于基因工程领域，涉及基于LAMP检测有青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的引物组合物、试剂盒及方法。本发明专利技术提供的基于LAMP检测有青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的引物组合物，是根据青枯雷尔氏菌的RsfliC基因序列和烟草疫霉菌特有的半胱氨酸蛋白酶基因PpCys45序列设计所得，其LAMP反应通过6条引物特异性识别靶序列上的6个独立区域，说明所述引物组合物对青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的LAMP检测特异性和准确性大大提高。本发明专利技术基于LAMP检测青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的方法，克服了现有技术中青枯雷尔氏菌和烟草疫霉菌的生物学检测方法所需周期长、繁琐、特异性差的问题及PCR检测技术需要热循环仪器，无法快速检测青枯雷尔氏菌和烟草疫霉菌的问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程领域，涉及基于lamp检测有青枯雷尔氏菌或烟草疫霉菌的引物组合物、试剂盒及方法。

技术介绍

1、青枯雷尔氏菌(ralstonia solanacearum)引起烟草青枯病是危害世界烟草生产的重要病，已成为制约烟叶生产的重要因素。烟草青枯病在田间发病时往往表现为烟草叶片的一侧萎蔫、变黄，发病严重时，可以造成烟草的整株死亡，是烟草生产上破坏最为严重的病害之一。

2、烟草疫霉菌(phytophthora nicotianae)是引起烟草黑胫病的主要病原菌，主要危害烟草的根和茎基部，致使维管束组织坏死，最终导致烟株萎蔫枯死。烟草黑胫病发病率高、危害严重，是困扰烟草生产的主要病害。更为重要的是，烟草疫霉菌产生的病残体可以在烟田土壤中存留若干年，导致黑胫病非常顽固，防控措施效果有限，极大地增加了病原菌检测工作的难度。

3、传统检测青枯雷尔氏菌和烟草疫霉菌的方法是可以直接通过肉眼观察病原物的菌组织或子实体等病征，还可以通过染色镜检对于形态特殊的病原体进行直观的检查，或采用组织分离培养法获得病原菌纯培养物，接种发病进行致病性检本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于LAMP检测有青枯雷尔氏菌的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括六条特异性引物，所述六条特异性引物具体为正向内引物Rs-FIP、反向内引物Rs-BIP、正向外引物Rs-F3、反向外引物Rs-B3、环引物Rs-LF和环引物Rs-LB；所述正向内引物Rs-FIP、反向内引物Rs-BIP、正向外引物Rs-F3、反向外引物Rs-B3、环引物Rs-LF和环引物Rs-LB的碱基序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:6所示。

2.基于LAMP检测有青枯雷尔氏菌的试剂盒...

【技术特征摘要】

1.基于lamp检测有青枯雷尔氏菌的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括六条特异性引物，所述六条特异性引物具体为正向内引物rs-fip、反向内引物rs-bip、正向外引物rs-f3、反向外引物rs-b3、环引物rs-lf和环引物rs-lb；所述正向内引物rs-fip、反向内引物rs-bip、正向外引物rs-f3、反向外引物rs-b3、环引物rs-lf和环引物rs-lb的碱基序列分别如seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq idno:6所示。

2.基于lamp检测有青枯雷尔氏菌的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括如权利要求1所述的引物组合物。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含正向内引物rs-fip和反向内引物rs-bip各1μl、正向外引物rs-f3和反向外引物rs-b3各0.5μl、环引物rs-lf和环引物rs-lb各1μl。

4.基于lamp检测有烟草疫霉菌的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物包括六条特异性引物，所述六条特异性引物具体为正向内引物pp-fip、反向内引物pp-bip、正向外引物pp-f3、反向外引物pp-b3、环引物pp-lf和环引物pp-lb；所述正向内引物pp-fip、反向内引物pp-bip、正向外引物pp-f3、反向外引物pp-b3、环引物pp-lf和环引物pp-lb的碱基序列分别如seq id no:7、seq id no:8、seq i...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘冠泽，杜文英，陶奕融，李葵秀，李满桥，梁绮文，郝冰，卢迎春，李沐洁，李春燕，
申请(专利权)人：云南农业大学，
类型：发明
国别省市：