【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、自色谱工艺被引入市场用于分离液体混合物中的分析物以来，该技术受到了高度关注，因为与膜过滤技术相比，它可对某些分析物显示出高特异性。然而，与开发吸附材料和配体相关的成本，其中对于特定的目的需要特定的配体，连同缓慢的流速和低结合能力是色谱工艺相比于膜过滤的一些缺点。因此，色谱工艺主要用于准备工作或对纯度有要求的高价值产品。
2、多年来，人们对提高色谱工艺的生产率的兴趣一直增加，且已经开发的一种技术是移动床和模拟移动床(smb)，其显著提高了色谱工艺的生产率，并使更连续地运行工艺成为可能。
3、移动床色谱法提供了用于分离蛋白质的连续系统，并且涉及一种包括若干柱(至少两个)的转盘样结构，其中通过柱的流动之间的切换以时间控制的方式提供；特别地，通过改变恒定流量下柱的切换时间。由于移动床系统中的柱不能单独控制，所有柱同时从一个位置切换到下一个位置，因此这种转盘式连续色谱系统存在一些技术缺陷，因为无论柱是在被装载、洗涤、洗脱还是再生，柱中的保留时间如果优化得当，可能会有很大的不同。
4、这些问题导致了smb系统的发展，smb系统也具有至少两个(通常更多个)相同的色谱载体，它们相互连接并连接到流动相泵(例如进料装载泵、洗涤缓冲液泵或洗脱缓冲液泵)。这种连接可以通过多通路阀提供。smb系统的意图是，当分离循环需要时，特定的流(进料流、水流、缓冲液流、cip蒸气可以专用于特定的色谱载体。
5、smb系统中的连接以如下方式配置：
6、a)所有柱将以串联连接，形成单个连续回路；
7、b)通常，在每个柱之间将会有四种工艺流：流入的进料混合物，流出的纯化的快组分，流出的纯化的慢组分，和流入的溶剂或洗脱液；以及
8、c)每个工艺流(两个入口和两个出口)将在设定的时间后沿相同的方向推移。
9、smb提供的优势可能是可以建立工业规模的色谱系统，该系统可以连续操作，比批量色谱法需要更少的树脂(吸附材料)和更少的溶剂。连续操作有利于操作控制和集成到生产工厂中。
10、然而，smb的缺点是罐和色谱载体需要巨大的空间，缓冲液消耗高，水消耗高以及cip消耗高。
11、因此，具有提高的生产率的用于从液体混合物中分离分析物的改进的色谱系统和改进的色谱方法将是有利的，且特别是与目前可用的系统和方法相比提供提高的生产率的用于从液体混合物中分离分析物的更有效的色谱系统和有效的色谱方法，特别是与膨胀床吸附色谱(eba)有关的将是有利的，其中空间需求减少，缓冲液消耗、水消耗和cip过程中的化学品消耗和/或在膜上的时间减少。
技术实现思路
1、因此，本专利技术的目的涉及具有提高的生产率的用于从液体混合物中分离分析物的改进的色谱系统和改进的色谱方法。
2、特别地，本专利技术的目的是提供一种色谱系统，特别是膨胀床吸附色谱系统(eba系统)，以及一种改进的色谱方法，特别是用于从液体混合物中分离分析物的膨胀床吸附色谱方法(eba方法)，其解决了上述现有技术中的生产率、对罐和色谱载体的空间需求、高缓冲液消耗、水消耗和cip消耗的问题。
3、因此，本专利技术的一个方面涉及用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
4、(i)提供至少一个色谱载体，其中所述至少一个色谱载体包括能够结合所述液体混合物中的所述分析物的配体；
5、(ii)将所述液体混合物的第一部分(first portion)装载到所述至少一个色谱载体；
6、(iii)任选地，所述至少一个色谱载体进行洗涤步骤；和
7、(iv)将第一洗脱缓冲液(elution buffer)添加到所述至少一个色谱载体，提供包括所述分析物的洗脱液级分(fraction)；
8、其中，步骤(iv)中提供的包括所述分析物的所述洗脱液级分的至少一部分再循环通过所述至少一个色谱载体。
9、本专利技术的其他方面涉及用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
10、(i)提供至少一个色谱载体，其中所述至少一个色谱载体包括能够结合所述液体混合物中的所述分析物的配体；
11、(ii)将所述液体混合物的第一部分装载到所述至少一个色谱载体；
12、(iii)任选地，所述至少一个色谱载体进行洗涤步骤；和
13、(iv)将第一洗脱缓冲液添加到所述至少一个色谱载体，提供包括所述分析物的洗脱液级分；
14、(v)将所述液体混合物的第二(或其他)部分(portion)装载到所述至少一个色谱载体；
15、(vi)任选地，所述至少一个色谱载体进行洗涤步骤；和
16、(vii)将第二(或其他)洗脱缓冲液添加到所述至少一个色谱载体，提供包括所述分析物的第二(或其他)洗脱液级分；
17、(viii)任选地重复步骤(v)–(vii)，
18、其中，在(vii)中添加的第二(和其他)洗脱缓冲液包括含有所述分析物的先前的洗脱液级分的至少一部分。
19、本专利技术的另一方面涉及一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括通过将结合到一个或多个色谱载体中的配体的分析物置于洗脱缓冲液中而将所述分析物从液体混合物中色谱分离，提供包括所述分析物的洗脱液级分，其中所述洗脱液级分的至少一部分用作洗脱缓冲液。
20、本专利技术的又另一方面涉及一种包括一个或多个色谱载体的色谱系统，所述一个或多个色谱载体包括至少一个入口和至少一个出口，所述至少一个出口与至少一个洗脱液罐流体连接，其中所述至少一个洗脱液罐包括与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接的再循环系统。
21、本专利技术的另一方面涉及一种包括一个或多个色谱载体的色谱系统，所述一个或多个色谱载体包括至少一个入口和至少一个出口，所述至少一个出口与至少一个洗脱液罐和用于接收收获级分的至少一个收获罐流体连接，其中所述至少一个洗脱液罐包括与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接的再循环系统，并且其中所述收获罐可以与用于从所述分析物中移除至少一部分的洗脱液缓冲液(eluate buffer)的至少一个膜系统流体连接，并且所述至少一个膜系统与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接。
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1.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述洗脱液级分分为再循环级分和收获级分。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述分析物在所述洗脱液级分中的浓度决定了送至所述收获级分的洗脱液级分的部分和送至所述再循环级分的洗脱液级分的部分。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述分析物在所述洗脱液级分中的浓度通过内嵌传感器测定。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，用于分离分析物的方法包括两个色谱载体。
6.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
7.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括通过将结合到一个或多个色谱载体中的配体的分析物置于洗脱缓冲液中而将所述分析物从所述液体混合物中色谱分离，提供包括所述分析物的洗脱液级分，其中所述洗脱液级分的至少一部分用作洗脱缓冲液。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述洗脱缓冲液包括所述洗脱液级分的至少一部分，并且包括至少0.01mg/ml的所
9.一种包括一个或多个色谱载体的色谱系统，所述一个或多个色谱载体包括至少一个入口和至少一个出口，所述至少一个出口与至少一个洗脱液罐流体连接，其中所述至少一个洗脱液罐包括与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接的再循环系统。
10.一种主要由一个或多个色谱载体组成的色谱系统，所述一个或多个色谱载体包括至少一个入口和至少一个出口，所述至少一个出口与至少一个洗脱液罐和用于接收收获级分的至少一个收获罐流体连接，其中所述至少一个洗脱液罐包括与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接的再循环系统，并且其中所述收获罐可以与用于从所述分析物中移除至少一部分的洗脱液缓冲液的至少一个膜系统流体连接，并且所述至少一个膜系统与所述一个或多个色谱载体的所述至少一个入口流体连接。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述洗脱液级分分为再循环级分和收获级分。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，所述分析物在所述洗脱液级分中的浓度决定了送至所述收获级分的洗脱液级分的部分和送至所述再循环级分的洗脱液级分的部分。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述分析物在所述洗脱液级分中的浓度通过内嵌传感器测定。
5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，用于分离分析物的方法包括两个色谱载体。
6.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括以下步骤：
7.一种用于从液体混合物中分离分析物的方法，所述方法包括通过将结合到一个或多个色谱载体中的配体的分析物置于洗脱缓冲液中而将所述分析物从所述液体混合物中色谱分离，提供包括所述分析物的洗脱液级分，其中所述洗脱液级分的至少一部分用作洗脱缓冲液。
8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述洗脱缓冲液包括所述洗脱液级分的至少一部分，并且包括至少0.01mg/ml的所述分析物，诸如至少0.05mg/ml，例如至少0.1mg/ml，诸如至少0.5mg/ml，例如至少...
【专利技术属性】
技术研发人员：米凯尔·波尔松，肯尼思·哈洛，
申请(专利权)人：蓝科有限公司，
类型：发明
国别省市：
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