System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 利用SNARE的核酸构建体制造技术_技高网

利用SNARE的核酸构建体制造技术

技术编号:40826657 阅读:5 留言:0更新日期:2024-04-01 14:48
本发明专利技术提供增强抗原特异性免疫应答的核酸构建体。该核酸构建体包含编码选自VAMP7、GOSR2、STX10、STX18、BNIP1、STX7、VTI1A、STX16、STX5、GOSR1、STX8、STX12、VAMP8和SEC22B中的任意SNARE蛋白的多核苷酸和编码抗原的多核苷酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

本专利技术涉及一种核酸构建体,其包含编码snare蛋白的多核苷酸和编码抗原的多核苷酸。


技术介绍

1、疫苗是通过施用抗原来建立对抗原的获得性免疫,由此实现感染预防、疾病的治疗的手段。以往,将减毒化的细菌或病毒直接作为疫苗使用的活疫苗、对细菌或病毒通过福尔马林或加热等进行处理使其失去感染能力的失活疫苗、将细菌产生的毒素分离纯化并用福尔马林等进行处理使其失活得到的类毒素这样的疫苗,主要通过皮下注射、肌肉内注射来给药。除此以外,为了提高效果、安全性、便利性,还进行着使给药部位为粘膜的粘膜疫苗、将抗原成分设为核酸的核酸疫苗等的开发。其中,作为低成本且能够迅速地制造的新模式(modality),核酸疫苗的开发快速发展。

2、在提高核酸疫苗的效果时,重要的课题之一是提高抗原的免疫原性,寻求能够将抗原引导至适当的组织和抗原提呈细胞并高效地引发免疫应答。在专利文献1中,公开了通过使用编码将过敏原蛋白质(抗原)插入溶酶体膜蛋白(lysosomal associated membraneprotein;lamp)的细胞器内稳定化结构域和跨膜结构域之间而成的融合蛋白的核酸,对于抗原的免疫应答得到增强。另一方面,报道了在lamp内腔添加抗原时,有时导致抗原特异性的抗体产生被显著减弱(非专利文献1)。另外,在专利文献2中,公开了通过使用编码包含抗原、跨膜区域和主要组织相容性复合体(mhc)分子链的细胞质区域的融合分子的核酸,抗原的免疫原性得到增加。专利文献2中虽然提到了包含抗原和snare(soluble n-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor,可溶性n-乙基马来酰亚胺-敏感因子附着蛋白受体)蛋白的细胞质区域的融合分子,但是完全没有记载由于该融合分子而使得抗原的免疫原性如何发生变化。

3、snare蛋白是具有20~30kda的snare基序的蛋白质家族。许多snare蛋白通过c末端的跨膜结构域锚定在脂质双层膜上,参与囊泡与目标的细胞内细胞器融合的过程(非专利文献2和3)。snare蛋白所参与的膜融合是真核细胞中包括囊泡转运、细胞器的膜形态形成、细胞外受体的再循环等的内吞作用过程、包括激素分泌、突触神经递质的释放的胞外分泌过程等细胞功能不可缺少的多种重要的生命现象所必须的。另外,利用snare蛋白的膜融合的分子机制可以认为在从作为单细胞的出芽酵母到包括人的高等动物在内的、全部的真核生物中是保守的。snare蛋白根据snare基序的氨基酸残基的特征进一步分类为qa-snare、qb-snare、qc-snare以及r-snare这4个亚家族。认为各snare蛋白分别定位于特异性的细胞内膜组分(内质网(er)、高尔基体、核内体、液泡和溶酶体等的细胞器、分泌囊泡、细胞质膜等),在特定的细胞内输送通路中的膜融合的过程中发挥功能。另外,还已知可能在外泌体中也包含snare蛋白。(专利文献1)日本特开2017-79742号公报(专利文献2)日本特表2008-500014号公报(非专利文献1)chen ac,et al.j immunother cancer.2020;8(1):e000258.

4、(非专利文献2)jahn r,scheller rh.nat rev mol cell biol.2006;7(9):631-643.

5、(非专利文献3)hong w.biochim biophys acta.2005;1744(2):120-144.


技术实现思路

1、本专利技术提供以下的1)~4)。

2、1)一种核酸构建体,其包含编码选自vamp7、gosr2、stx10、stx18、bnip1、stx7、vti1a、stx16、stx5、gosr1、stx8、stx12、vamp8和sec22b中的任意snare蛋白的多核苷酸、和编码抗原的多核苷酸。

3、2)以1)的核酸构建体为有效成分的抗原特异性th1型免疫应答诱导或增强剂。

4、3)以1)的核酸构建体为有效成分的抗原特异性细胞性免疫应答诱导或增强剂。

5、4)以1)的核酸构建体为有效成分的核酸疫苗。

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【技术保护点】

1.一种核酸构建体,其包含编码选自VAMP7、GOSR2、STX10、STX18、BNIP1、STX7、VTI1A、STX16、STX5、GOSR1、STX8、STX12、VAMP8和SEC22B中的任意SNARE蛋白的多核苷酸、和编码抗原的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的核酸构建体,其中,所述编码抗原的多核苷酸与所述编码SNARE蛋白的多核苷酸的下游连接。

3.如权利要求1或2所述的核酸构建体,其中,所述编码SNARE蛋白的多核苷酸和所述编码抗原的多核苷酸经由编码接头的多核苷酸和/或编码前蛋白转化酶识别序列的多核苷酸连接。

4.如权利要求1~3中任一项所述的核酸构建体,其为质粒载体、mRNA或病毒载体。

5.如权利要求1~4中任一项所述的核酸构建体,其中,所述抗原为选自肿瘤抗原、自身抗原、细菌抗原、真菌抗原和原生动物抗原中的至少1种。

6.一种抗原特异性Th1型免疫应答诱导或增强剂,其以权利要求1~5中任一项所述的核酸构建体为有效成分。

7.一种抗原特异性细胞性免疫应答诱导或增强剂,其以权利要求1~5中任一项所述的核酸构建体为有效成分。

8.一种核酸疫苗,其以权利要求1~5中任一项所述的核酸构建体为有效成分。

9.如权利要求8所述的核酸疫苗,其诱导或增强抗原特异性Th1型免疫应答。

10.如权利要求8所述的核酸疫苗,其诱导或增强抗原特异性细胞性免疫应答。

11.如权利要求8~10中任一项所述的核酸疫苗,其是肿瘤疫苗,所述抗原为选自肿瘤抗原中的至少1种。

12.如权利要求8~10中任一项所述的核酸疫苗,其是自身免疫疾病治疗用疫苗,所述抗原为选自自身抗原中的至少1种。

13.如权利要求8~12中任一项所述的核酸疫苗,其通过口服或非口服的方式给药。

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种核酸构建体,其包含编码选自vamp7、gosr2、stx10、stx18、bnip1、stx7、vti1a、stx16、stx5、gosr1、stx8、stx12、vamp8和sec22b中的任意snare蛋白的多核苷酸、和编码抗原的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的核酸构建体,其中,所述编码抗原的多核苷酸与所述编码snare蛋白的多核苷酸的下游连接。

3.如权利要求1或2所述的核酸构建体,其中,所述编码snare蛋白的多核苷酸和所述编码抗原的多核苷酸经由编码接头的多核苷酸和/或编码前蛋白转化酶识别序列的多核苷酸连接。

4.如权利要求1~3中任一项所述的核酸构建体,其为质粒载体、mrna或病毒载体。

5.如权利要求1~4中任一项所述的核酸构建体,其中,所述抗原为选自肿瘤抗原、自身抗原、细菌抗原、真菌抗原和原生动物抗原中的至少1种。

【专利技术属性】
技术研发人员:佐山慧门菅沼贵也堀智史久保竣山本征辉深川聪子石川准子
申请(专利权)人:花王株式会社
类型:发明
国别省市:

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