抗原递送载体和构建物制造技术

本发明专利技术涉及用于递送抗原到免疫应答靶细胞的碳氟化合物载体。它进一步涉及碳氟化合物载体－抗原构建物以及这种载体与抗原的联合应用，在动物中作为疫苗和免疫疗法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及新的抗原递送构建物和它们在免疫方法中的应用。特别地，本专利技术涉及在抗人类免疫缺陷型病毒免疫中有用的构建物。
技术介绍
我们对哺乳动物免疫应答理解中最近进展已经引导通过预防性接种防止人类中的某些疾病并且通过免疫疗法的使用控制和治疗疾病。可以通过免疫介入处理的疾病的类型包括那些由感染物引起的、癌症、变态反应和自身免疫疾病。在这些情况，最普遍地，医学治疗的前提是抗原到适当的免疫识别细胞的有效递送。例如，预防性接种已经世界性地成功消灭了天花，通过给药携带野生型病毒所有抗原的病毒的活的减弱的株。相似地，在开发了基于来自细菌细胞壁的多糖抗原的疫苗后，由于嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)b型流感细菌的感染已经明显地在西方国家减少。而且，一些癌症例如人类黑素瘤对免疫治疗有响应，该治疗使用自体树突细胞(DC)作为细胞佐剂，并且规定从黑素体蛋白gp100衍生的肽作为肿瘤特异性抗原的源以产生细胞介导的免疫应答。对自身抗原的自身耐受性能通过注射破坏性的免疫应答的靶的特异的神经抗原(neuroantigen)在实验性自身免疫脑脊髓炎的治疗中被恢复。所以，能够通过这样的治疗提供特异性，无需长期的免疫抑制。对于感染性疾病，发生在疾病控制中最快的进步是针对进入的抗原，抗体能中和感染物或其分泌的毒素，无论这是通过IgM、IgG还是IgA介导的。同样，自身免疫疾病已经用能改善自身抗体行为的抗原治疗。然而，为了消灭病毒感染的细胞、癌症细胞和包含细胞内细菌的细胞，也需要细胞免疫应答。例如，细胞内病毒(例如逆转录病毒、致肿瘤核糖核酸病毒、正粘病毒(orthomyxoviruses)、副黏液病毒、披膜病毒类、杆状病毒、沙粒病毒、腺病毒、疱疹病毒、痘病毒、乳多泡病毒和风疹病毒)能复制并传播到相邻的细胞而不会暴露于抗体。细胞介导的免疫的重要性由于具有初级T-细胞缺陷的儿童不能清除这些病毒而着重，而具有免疫球蛋白缺陷但具有完整的细胞介导的免疫的病人不遭受这样的障碍。少量的但是重要的细菌、真菌、原生动物和寄生虫在宿主细胞中生存并复制。这些有机体包括分枝杆菌(结核和麻风病)、军团杆菌(军团病(Legionnaires Disease))、立克次氏体(落基山斑疹热(Rocky Mountain spotted fever))、衣原体、单核细胞增多性李司忒氏菌(Listeria monocytogenes)、布鲁氏菌、弓形体(Toxoplasmagondii)、利什曼原虫、锥虫、白色念珠菌(Candida albicans)、隐球菌、红酵母和肺囊虫。通过生存在细胞内部，这些有机体不被循环的抗体接触。天然免疫应答也是无效的。主要的抗这些有机体的免疫防御是细胞介导的免疫；包括两种CD8+溶细胞的T淋巴细胞和CD4辅助T淋巴细胞。能引起有效的和持续的细胞介导的免疫应答的疫苗和免疫疗法的开发依然是疫苗学(vaccinology)中最大的挑战之一。特别地，用于预防和治疗人类免疫缺陷型病毒(HIV)感染的安全和有效的疫苗的开发被候选疫苗不能刺激强的、持久的和疾病相关的细胞免疫所妨碍。负责消灭细胞内病原体或癌症细胞的宿主细胞介导的免疫应答被称为Th1应答。其特征在于诱导细胞毒素的T-淋巴细胞(CTL)和T-辅助淋巴细胞(HTL)，引起免疫效应机制以及免疫刺激细胞因子例如IFN-γ和IL-2的活化。Th1应答在控制病毒感染中的重要作用最近被Lu等人显示(NatureMedicine(2004))。这个有慢性HIV-1感染的个体的临床研究显示病毒负荷的抑制与表达HIV-1-特异的IL-2或IFN-γ的CD4+T细胞和特异HIV-1的CD8+效应细胞的应答都有正相关。目前通过疫苗和免疫疗法促进细胞免疫的免疫学战略包括病原体活的减弱版的开发和活载体的应用以递送合适抗原或编码这样抗原的DNA。这些进展被越来越严格的制度环境中的安全考虑限制。而且，由生产方法的规模可伸缩性和成本引起的问题经常限制生物起源的产品的商业竞争力。在本上下文中，基于肽使用的合理规定的合成疫苗已受到相当的注意，作为开发新的预防性疫苗和免疫疗法的潜在候选。T细胞和B细胞的表位(epitope)代表免疫原的唯一活性部分，其被适应性免疫系统识别。覆盖T或B细胞表位区域的小肽能被用作免疫原以诱导免疫应答，其最终与该序列所来自的天然抗原交叉反应。肽是非常吸引人的抗原，因为它们被很好地化学限定、高度稳定并且能被设计包含T和B细胞表位。T细胞表位，包括CTL和T辅助细胞的表位，能基于它们结合MHC分子的能力而被选择，以这样的方式能获得大的群体范围(The HLA Factsbook，Marsh，S.，Academic Press.2000)。而且，选择合适的T和B细胞表位的能力使免疫应答直接针对病原体的多个保守表位，其以高度序列变化为特征(例如HIV、丙型肝炎病毒(HCV)、和疟疾)。为了刺激T淋巴细胞应答，包含在疫苗或免疫治疗产物中的合成的肽优选地应该被抗原递呈细胞并且特别是树突细胞内化。树突细胞(DC)在T细胞介导的初次免疫应答的引发中起重要作用。这些细胞在成熟中的两个阶段与不同功能相关。幼树突细胞(iDC)位于多数组织或循环系统中并且被召集到炎症部位。它们是高度特化的抗原捕捉细胞，表达大量受体参与抗原摄入和吞噬。抗原捕捉和处理后，iDC移到淋巴结或脾中本地T细胞位置。在此过程中，DC失去它们的抗原捕捉能力变成免疫刺激成熟DC(mDC)。树突细胞是有效的递呈细胞，启动宿主对与I类和II类MHC分子关联的肽抗原的免疫应答。它们能刺激原初的CD4和CD8 T细胞。根据目前抗原处理和递呈路径的模型，外源抗原被内化进入抗原递呈细胞的细胞内分隔的区域，在那它们被降解为肽，其中一些结合MHC的II类分子。然后成熟的II类MHC/肽复合物被传输到细胞表面呈递给CD4 T-淋巴细胞。相反，内源抗原在被输送到细胞质结合新的I类MHC分子之前在细胞质中被蛋白体(proteosome)的作用降解。与肽复合的稳定的I类MHC分子然后被运输到细胞表面刺激CD8 CTL。外源抗原在称作交叉呈递的过程中通过专职的APC也能被呈递给I类MHC分子。包含细胞外抗原的吞噬体(Phagosome)可与内质网融合，抗原可能获得将肽加载到I类MHC分子必需的机械。这是很认知的，然而，自由肽自己经常是弱的免疫原(FieldsVirology，Volume l，Third Edition，1996)。为了优化肽疫苗或疗法的效力，多种疫苗战略被开发，引导抗原进入抗原呈递细胞以靶向I类MHC路径并引起细胞毒性的T-淋巴细胞(CTL)应答。作为合成递送系统的例子，脂肪酰链被共价连接到肽作为递送表位进入I类MHC细胞内区域的方法以诱导CTL的活性。这样的脂肽，例如在美国专利5,871,746中描述了单十六酰链连接代表来自HIV Env蛋白的表位的肽。其它技术也被提供以将表位递送进入细胞内区域并因而诱导CTL。这些包括例如Penetratin、TAT和它的衍生物的载体、DNA、病毒载体、病毒小体(virosome)和脂质体(liposome)。然而，这些系统或者引起很弱的CTL应答、有相联系的毒性问题或是复杂的并且以商业本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种Ｃ↓［ｍ］Ｆ↓［ｎ］－Ｃ↓［ｙ］Ｈ↓［ｘ］－Ｌ结构或其衍生物的碳氟化合物载体，其中ｍ＝３到３０，ｎ＜＝２ｍ＋１，ｙ＝０到１５，ｘ＜＝２ｙ，（ｍ＋ｙ）＝３－３０以及Ｌ是有助于共价连接到抗原的配基。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：多米尼克博内特，卡尔顿B布朗，伯特兰乔治，菲利普J赛泽，
申请(专利权)人：免疫目标指定系统公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]