【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种灵芝多糖水凝胶的制备方法及应用。
技术介绍
1、术后难愈合伤口、糖尿病伤口、烧伤烫伤等都易造成皮肤伤口溃疡，其中糖尿病伤口是糖尿病常见的并发症之一，且糖尿病伤口不能经历正常伤口愈合的炎症、增殖和重塑三个阶段，导致生理过程紊乱，伤口难以愈合。在糖尿病伤口中，巨噬细胞极化失调，不能从促炎表型(m1)极化为抗炎表型(m2)，导致伤口长期处于炎症期，抑制了糖尿病伤口的愈合。此外，在糖尿病伤口愈合的过程中，高血糖或细菌感染引起微环境中活性氧(ros)过度积累，ros与各种细胞成分发生反应，分泌促炎因子，触发氧化应激和恶化的炎症反应以维持巨噬细胞在m1表型，进一步阻碍了伤口愈合。
2、在众多敷料中，水凝胶被认为是与伤口敷料一样很有前途的伤口制剂。水凝胶能够快速、稳定地封闭伤口，止血，促进组织修复，防止伤口感染。目前，市面上用于创面修复的是人表皮重组因子水凝胶，但价格较昂贵。多糖是一种天然高分子物质，来源广泛易得，具有良好的生物活性，生物相容性，低或无细胞毒性。化学交联法制备的水凝胶可减少交联剂的使用。所以多糖水凝胶是一种经济、绿色安全的产品。多糖是具有稳定性高、毒性低、亲水性强以及生物体内可降解等特点的天然高分子聚合物。它不仅可以调节免疫作用，还在抗肿瘤、抗氧化、降血糖等方面发挥着广泛的药理作用。多糖具有的羟基和氨基等官能团有助于用化学交联法制备多糖基水凝胶并在生物医学领域取得广泛应用。将其与高分子复合材料联合应用，有望提升高分子复合材料的生物活性，对促进伤口愈合至关重要。
3、灵芝是一种珍贵的多孔
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种灵芝多糖水凝胶及其制备方法和应用。制得的水凝胶具有多孔结构、粘附性好，保水性强、生物相容性良好，可以调节巨噬细胞表型，对创面损伤有明显修复作用，应用于创面修复领域，以解决现有技术存在的问题。
2、本专利技术灵芝多糖水凝胶的制备方法按照以下步骤进行：
3、一、制备氧化灵芝多糖：将灵芝多糖放入干燥反应容器中，加入乙醇溶液并搅拌，制备灵芝多糖溶液，再加入高碘酸钠，避光氧化10h后，向反应体系中加入与高碘酸钠等摩尔量的乙二醇，搅拌30min～50min，最后加入无水乙醇，沉淀后，抽滤并干燥，即得氧化灵芝多糖；
4、二、制备氧化灵芝多糖溶液：将氧化灵芝多糖溶解于去离子水中，制得氧化灵芝多糖溶液；
5、所述氧化灵芝多糖溶液的浓度为2～20wt.％；
6、三、制备壳聚糖溶液或壳聚糖衍生物溶液：将壳聚糖或壳聚糖衍生物溶解于加热的去离子水中，制得壳聚糖溶液或壳聚糖衍生物溶液；
7、所述壳聚糖溶液或壳聚糖衍生物溶液的浓度为2～8wt.％；
8、四、制备海藻酸钠溶液：将海藻酸钠溶解于加热的去离子水中，制得海藻酸钠溶液；
9、所述海藻酸钠溶液的浓度为3～9wt.％；
10、五、制备灵芝多糖水凝胶：将氧化灵芝多糖溶液与壳聚糖溶液或壳聚糖衍生物溶液于25℃下混合并搅拌混匀后，加入海藻酸钠溶液，搅拌均匀，加入交联剂，搅拌后静置成胶，得到灵芝多糖水凝胶；
11、所述灵芝多糖水凝胶中氧化灵芝多糖与壳聚糖或壳聚糖衍生物的质量比为(1～5)：1；壳聚糖或壳聚糖衍生物与海藻酸钠的质量比为(1～3)：1。
12、本专利技术灵芝多糖水凝胶用于糖尿病伤口愈合与修复。
13、与现有技术相比，本专利技术通过氧化灵芝多糖，使其部分羟基氧化成醛基，与壳聚糖及壳聚糖衍生物的氨基发生席夫碱反应，再与海藻酸钠互穿制得灵芝多糖水凝胶，主要具有以下优势：
14、1、本专利技术首次以灵芝多糖作为主要基质材料和活性物质，设计合成了水凝胶伤口敷料，用于促进糖尿病伤口的愈合与修复。灵芝多糖具有抗炎、抗氧化、免疫调节、抗菌、毒副作用低、安全有效等优势。所制备的水凝胶呈三维网状结构，具有良好粘附性、保水性、机械性能与抗氧化性能，既能促进创面气体和营养物质交换，保证创面组织的呼吸，又能使伤口免受氧化应激的损伤。
15、2、本专利技术所制备的灵芝多糖水凝胶中的主要基质材料为灵芝多糖，灵芝多糖主要由甘露糖、半乳糖与葡萄糖组成，而甘露糖可与甘露糖受体(mr)特异性结合，mr能介导灵芝多糖对巨噬细胞的免疫调节作用，抑制巨噬细胞向m1表型极化而促进向m2表型极化，这种相互作用可以降低炎症因子tnf-α和活性氧(ros)的表达，并提高伤口愈合阶段抗炎细胞因子il-10的表达，加速伤口组织的新生和适当的胶原沉积，促进慢性伤口的愈合。
16、3、本专利技术制备的灵芝多糖对成纤维细胞具有良好的增殖作用，细胞存活率均高于对照组的细胞存活率；其中含4％灵芝多糖的水凝胶具有更好的细胞增殖作用，溶血率均低于2％；对创面损伤有明显修复作用，21天创面愈合率为98.94±0.77％，由皮肤病理切片可观察到新生上皮和血管形成，胶原纤维排列整齐，表明灵芝多糖水凝胶具有促进伤口愈合作用。
17、4、本专利技术提供的水凝胶制备工艺简单、原料易得，是一种新颖的慢性伤口敷料，有望运用在伤口修复领域，拓展了灵芝多糖的应用范围。
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1.一种灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：灵芝多糖水凝胶的制备方法按照以下步骤进行：
2.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤一所述乙醇溶液中蒸馏水和无水乙醇的体积比为(1～4)：1。
3.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤一所述无水乙醇的加入量为反应容器中溶液总体积1/5。
4.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤三所述加热的去离子水的温度为30-60℃。
5.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤三所述壳聚糖衍生物为羧甲基壳聚糖、丙烯酰胺壳聚糖中的一种或两种。
6.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤四所述加热的去离子水的温度为30-60℃。
7.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤五所述交联剂为戊二醛、甲醛、京尼平或氯化钙。
8.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤五所述灵芝多糖水凝胶中氧化灵芝多糖与壳聚糖或
9.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤五所述壳聚糖或壳聚糖衍生物与海藻酸钠的质量比为2：1。
10.权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶用于糖尿病伤口愈合与修复。
...【技术特征摘要】
1.一种灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：灵芝多糖水凝胶的制备方法按照以下步骤进行：
2.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤一所述乙醇溶液中蒸馏水和无水乙醇的体积比为(1～4)：1。
3.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤一所述无水乙醇的加入量为反应容器中溶液总体积1/5。
4.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤三所述加热的去离子水的温度为30-60℃。
5.根据权利要求1所述的灵芝多糖水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤三所述壳聚糖衍生物为羧甲基壳聚糖、丙烯酰胺壳聚糖中的一种或...
【专利技术属性】
技术研发人员：隋小宇，李飞，韩翠艳，刘婷婷，何静，杨雪婷，
申请(专利权)人：齐齐哈尔医学院，
类型：发明
国别省市：
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