脂肪酶突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了脂肪酶突变体及其制备方法和应用。所述脂肪酶突变体的氨基酸序列包括以下序列中任意一种：(1)在SEQ ID NO:2所示序列基础上发生W180A和/或I240C突变的序列；或，(2)由如(1)所述序列经取代、缺失或添加一个或至少两个氨基酸残基获得，且与(1)所述序列功能相同或相似的序列；或，(3)与(1)或(2)所述序列具有至少90％序列同一性，且与(1)所述序列功能相同或相似的序列。本发明专利技术在野生型脂肪酶中引入突变，提高了脂肪酶催化活性，进而能够提高维生素A棕榈酸酯的产量，具有较高的工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，涉及脂肪酶突变体及其制备方法和应用。

技术介绍

1、维生素a棕榈酸酯具备良好的稳定性，因而成为维生素a常用的制剂形式，被广泛用于营养保健及动物饲料添加剂中。目前，市售维生素a棕榈酸酯主要通过化学法合成，反应过程复杂且条件苛刻，且容易产生异构体，给后续分离纯化造成困难。生物催化转化可以高效地解决化学合成法中存在的缺陷，因而极具应用价值。

2、例如，cn114854717a公开了蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)来源的脂肪酶wh-bc240及其突变体，通过其转酯活性或酯交换活性一步法高效催化维生素a棕榈酸酯的合成，催化转化维生素a醋酸酯合成维生素a棕榈酸酯反应生产效率可达564g l-1d-1，较难满足高生产需求；cn113957114a公开了一种酶法合成维生素a棕榈酸酯的方法，包括如下步骤：在有机溶剂中加入维生素a醋酸酯、棕榈酸、固定化酶进行酯交换反应，反应中还加入烷基氧离子咪唑盐和缚酸剂，所用固定化酶为脂肪酶；cn106544391a公开了酶催化制备维生素a棕榈酸酯的方法，包括以下步骤：1)将维生素a醋酸酯与本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.脂肪酶突变体，其特征在于，所述脂肪酶突变体的氨基酸序列包括以下序列中任意一种：

2.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的脂肪酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括SEQ ID NO:3所示的序列。

4.重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求2或3所述的核酸分子。

5.重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求4所述的重组载体。

6.权利要求1所述的脂肪酶突变体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

7.根据权利要求6所述的脂肪酶突变体的制备方法...

【技术特征摘要】

1.脂肪酶突变体，其特征在于，所述脂肪酶突变体的氨基酸序列包括以下序列中任意一种：

2.核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的脂肪酶突变体。

3.根据权利要求2所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包括seq id no:3所示的序列。

4.重组载体，其特征在于，所述重组载体含有权利要求2或3所述的核酸分子。

5.重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求4所述的重组载体。

6.权利要求1所述的脂肪酶突变体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

7.根据权利要求6所述的脂肪酶突变体的制备方法，其特征在于，所述表达载体包括pet-26b(+)载体、...

【专利技术属性】
技术研发人员：张光祥，张雅萍，张永振，黎源，
申请(专利权)人：万华化学集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：