烟草多酚氧化酶NtPPO6及其编码基因、基因编辑载体和应用制造技术

技术编号：40806943 阅读：22 留言：0更新日期：2024-03-28 19:30

本发明专利技术公开了烟草多酚氧化酶NtPPO6及其编码基因、基因编辑载体和应用。本发明专利技术的烟草多酚氧化酶编码基因NtPPO6，其核苷酸序列为：(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；或(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。经检测发现，在烟草中敲除NtPPO6基因，可以显著降低烟草植株中多酚氧化酶的活性，提高烟草植株中绿原酸的含量；而且敲除NtPPO6基因的烟草植株株高增加，平均叶片减少，中部最大叶宽、顶叶宽、顶叶长增加。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及烟草多酚氧化酶ntppo6及其编码基因、基因编辑载体和应用，属于植物基因工程。

技术介绍

1、多酚氧化酶(ppo，polyphenol oxidase)是在自然界中广泛存在的一类铜结合酶，广泛存在于植物、动物和微生物中。根据其底物的特异和作用机制，可分为三类：酪氨酸酶(ec 1.14.18.1)、儿茶酚氧化酶(ec 1.10.3.1)和漆酶(ec 1.10.3.2)。

2、多酚氧化酶具有多种功能：(1)参与了植物的生长和发育过程，如花朵开放、果实成熟和叶片的黄化等；(2)将植物中多酚类物质(如酪酸、儿茶酚等)转化为具有较高活性的氧化产物，如喹啉、喹啉醇等，这种氧化反应通常以分子氧为底物，产生的氧化产物具有多种生物活性，包括抗氧化、抗菌和抗肿瘤等；(3)多酚底物被ppo氧化，被认为是许多水果和蔬菜在收获、储存、运输和加工过程中棕色变色的主要原因，因此抑制多酚氧化酶的活性可以提高食品的保鲜性和品质；(4)多酚氧化酶还可以应用于环境保护领域，能够催化工业废水和水体中的有机物的氧化降解，从而减少水体污染；(5)多酚氧化...

【技术保护点】

1.烟草多酚氧化酶编码基因NtPPO6，其特征在于：其核苷酸序列为：

2.烟草多酚氧化酶NtPPO6，其特征在于：其氨基酸序列为：

3.基因编辑载体，其特征在于：所述基因编辑载体中包含根据NtPPO6基因所设计的靶位点敲除序列，所述NtPPO6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根据权利要求3所述的基因编辑载体，其特征在于：依据所述靶位点敲除序列所设计的敲除引物序列如下所示：

5.一种如权利要求1所述的烟草多酚氧化酶编码基因NtPPO6或权利要求3或4所述的基因编辑载体在烟草品种育种中的应用。