【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及收集临床样品并制备它们用于分析，例如通过分子生物学处理技术如核酸扩增和/或检测；更具体地，涉及用于该目的的采样装置，特别适用于临床护理点(poc)或需求点(pon)环境，而且还用于送至远程实验室进行测试。本专利技术的某些方面涉及可用于制备用于核酸扩增和/或检测的样品的方法和组合物。
技术介绍
1、聚合酶链式反应(pcr)是简便的核酸扩增方法，用于测试生物样品中是否存在特定核酸(dna或rna)。除其他用途外，其还用作鉴定病原体或疾病标志物的诊断方法。扩增核酸样品的其他方法包括等温扩增方法，如重组酶聚合酶扩增(rpa)和环介导等温扩增(lamp)。
2、在任何此类诊断测试之前，需要一定量的样品制备，以便将核酸与所使用的扩增过程兼容的状态呈现。基于实验室的提取方法通常旨在提供高浓度的高纯度核酸，目的在于获得尽可能多的核酸。这是以简单性为代价的，并且基于实验室的提取技术通常需要使用与临床环境不兼容的试剂和设备如离心机。
3、临床样品的制备只需要足够的核酸来进行测试。这是一个重要的区别，因为其提供了提取过程的显著简化。例如，众所周知，使用简单的滤纸可以从生物样品中的靶标(甚至可以从复杂的样品基质如全血)捕获足够的核酸，以便经由pcr进行后续诊断(fuehreret al.j clin microbiol.2011,49(4),1628-1630；bu et al.analytical biochemistry375(2),370-372；zou et al(2017)nucleic acid pur
4、可以获取生物样品的一种方式涉及使用可以保留在采样装置内的多孔笔尖，该采样装置可以类似于例如笔。美国专利申请公开us2016/0349153中描述了一种此类装置，其描述了一种具有含有多孔笔尖形式的烧结多孔基质的外壳的装置，该多孔笔尖可以通过毛细管作用吸收液体样品。我们的国际专利申请pct/ep2021/057315中描述了不同的装置，该装置包括用于容纳缓冲液的储液器，用于冲洗笔尖上吸附的样品以进行后续处理和分析。
技术实现思路
0、专利技术概述
1、此处描述的是用于收集和处理生物样品，特别是但不限于用于dna和rna分析程序的目的的一次性装置。该装置为分子诊断测试提供足够的核酸。尽管本文主要结合核酸的分子诊断测试中的用途来描述该装置，但是应当理解，可以利用本专利技术来收集和/或处理其他生物分子，例如蛋白质、脂质、代谢物、维生素、药物、有机物、农药、小分子等；也可以是细胞碎片，如细胞膜或细胞外壳碎片、或亚细胞细胞器。我们已经确定，特定的笔尖配置允许样品从笔尖有效释放，而不需要通过施加压力来主动冲洗缓冲液体通过笔尖。
2、根据本专利技术的第一方面，提供了用于获得和任选地处理生物样品以供分析的装置，所述装置包括：
3、(a)中空吸头，包括第一和第二总体圆柱形部分，并在吸头的第一和第二端处具有第一和第二开口，其中第二部分和第二开口具有比第一部分和第一开口更小的直径，并且其中第一部分和第一开口配置为可拆卸地附接至采样仪器；和
4、(b)多孔笔尖，其第一端处具有暴露或可暴露的工作表面，用于获取生物样品，适合于吸收由此获取的生物样品物质的多孔结构，并且用于液体经过笔尖的流通；以及第二端处具有清洗表面，用于将清洗流体施加到笔尖；并且
5、其中第二部分和第二开口配置为可拆卸地容纳笔尖，并且其中多孔笔尖具有大于宽度的长度。
6、令人惊讶的是，我们发现，这种吸头和笔尖的配置不仅允许样品通过工作表面被吸收到多孔结构中，而且还允许清洗液施加到清洗表面，从而仅通过毛细管作用和重力从笔尖洗脱样品(例如用于后续处理或分析)。无需施加压力来主动推动清洗液通过笔尖来洗脱样品。此外，该装置的运行方式意味着样品生成气溶胶的风险降低了——其可能含有病原体。由于样品首先被吸收到笔尖中，然后通过毛细管作用和重力冲洗掉，因此不需要用力移液样品(该过程会生成气溶胶)。
7、注意，笔尖的长度和宽度可以由笔尖和吸头的结构来限定。一般而言，笔尖具有限定工作表面的第一端和限定清洗表面的第二端。在这些第一端和第二端之间延伸的轴线限定了笔尖的长度，而宽度垂直于该轴线。当笔尖总体是圆柱形时，宽度可以是圆柱形的直径；尽管在一些实施方案中，笔尖不需要具有恒定的宽度；这里最大宽度的部分小于长度。
8、当笔尖被容纳在第二部分和第二开口内时，笔尖的工作表面被暴露，并且清洗表面位于吸头内。优选地，清洗表面位于吸头内且与吸头的第一部分和第二部分之间的过渡部处于同一水平面上。也就是说，吸头以第一部分的形式在笔尖的清洗表面上方变宽。
9、笔尖上方的吸头高度允许清洗液的“头部”足以打破笔尖中保持的液体的表面张力，并允许材料在重力作用下流动。这可以使用清洗液中的粘度和表面张力调节剂来调节。优选地，吸头的第一部分的长度大于同一部分的直径；并且优选地也大于笔尖的长度。出乎意料的是，为了吸收样品所需的笔尖的毛细管作用预计会使笔尖饱和并保留样品，而不使用压力迫使清洗流体通过笔尖。然而，我们发现该结构允许几乎相同体积的液体滴过饱和材料，从浸入其中的样品材料中释放提取的核酸和蛋白质。释放的效率是出乎意料的。
10、空心吸头结构的使用允许吸头和笔尖附接到采样仪器上。方便地，这可以是移液器或类似的处理装置。例如，多吸头移液器和/或机器人移液器可用于快速处理和加工多个样品。替代性地，采样仪器可以简单地是与吸头接合以允许抓握和操纵的手柄。
11、在使用中，可以设想吸头和笔尖如下操作。用户将吸头和笔尖附接到移液器上。然后将笔尖放入患者的口中，并允许吸收唾液(其中包含用于测试的核酸)。然后，使用者将移液器保持在试管或样品板上，并将吸头从移液器中弹出，以便将吸头和笔尖释放到试管中。然后可以使用相同的移液器将清洗液添加到吸头内的笔尖的上表面。在重力和/或毛细管作用下，清洗液然后进入笔尖并将样品从笔尖的下表面洗脱到试管中。然后可以移除笔尖和吸头，并使用任何合适的程序分析洗脱的样品。在一些实施方案中，试管或样品板可以含有吸水构件或吸水纸，其将进而吸附任何洗脱的样品。在其他实施方案中，可以首先将唾液样品收集在试管或其他容器中。然后，吸头/笔尖组合可以从试管中收集唾液样品，其方式与直接从口腔中收集唾液样品的方式大致相同。在又一变型中，可将笔尖单独放置在具有唾液样品的试管中。然后笔尖将吸收唾液，然后用户可以将笔尖放置在位于移液器上的吸头内，并以类似的方式进行进一步处理。
12、本专利技术提供了获得和制备用于分析的样品的便利方法，特别是通过核酸扩增方法如pcr、rpa或lamp，但也潜在地通过其他分析方法如免疫检测。这至少部分本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.用于获得并任选地处理生物样品以供分析的装置，所述装置包括：
2.权利要求1的装置，其中所述吸头的所述第一部分的长度大于同一部分的宽度；并且优选地也大于所述笔尖的长度。
3.权利要求1或2的装置，其中所述笔尖通过干涉配合保持在所述吸头内。
4.前述权利要求中任一项的装置，其中所述笔尖是烧结多孔笔尖。
5.前述权利要求中任一项的装置，其中所述笔尖包含用于处理在所述笔尖上获得的所述样品的一种或多种活性剂。
6.权利要求5的装置，其中所述一种或多种活性剂为冻干或干燥形式。
7.权利要求5或权利要求6的装置，其中所述一种或多种活性剂包括聚乙烯吡咯烷酮。
8.权利要求5至7中任一项的装置，其中所述一种或多种活性剂包括氯己定和/或柠檬醛。
9.权利要求5至8中任一项的装置，其中所述一种或多种活性剂包含保护核酸免于降解的药剂；优选烷基多葡糖苷。
10.权利要求5至9中任一项的装置，其中当将清洗缓冲液施加到所述笔尖的所述清洗表面时，重力拉动所述清洗缓冲液穿过所述笔尖并从所述笔尖置换经处理
11.权利要求10的装置，其中所述经处理的生物样品包含核酸，并且所述释放和置换的核酸无需浓缩或纯化即可与分子诊断测试直接兼容。
12.权利要求10的装置，其中所述经处理的生物样品包含蛋白质，并且所述释放和置换的蛋白质与免疫诊断测试直接兼容。
13.权利要求10、11或12中任一项的装置，其中所述清洗缓冲液的施加和生物样品的置换生成气溶胶的风险低。
14.前述权利要求中任一项的装置，其中所述笔尖包括位于所述工作表面和清洗表面中的任一个或两个处的弯曲面或圆形面。
15.聚乙烯吡咯烷酮在制备用于扩增的核酸中的用途。
16.权利要求15的用途，其进一步包括氯己定和/或柠檬醛在制备用于扩增的核酸中的用途。
17.制备和扩增核酸的方法，所述方法包括：
18.权利要求17的方法，其中所述核酸扩增过程是PCR。
19.权利要求17或18的方法，其中所述样品在聚乙烯吡咯烷酮存在下经历核酸扩增过程。
20.权利要求17至19中任一项的方法，其中所述裂解缓冲液还包含用作核酸扩增混合物的适当试剂。
21.权利要求17至20中任一项的方法，其中所述裂解缓冲液还包含氯己定和/或柠檬醛。
22.权利要求17至21中任一项的方法，其中聚乙烯吡咯烷酮以小于或等于5％、4％、3％、2.5％、2％、1.5％或1％存在于所述裂解缓冲液中。
23.权利要求17至22中任一项的方法，其中所述裂解缓冲液包含0.9％PVP和0.1％氯己定或柠檬醛。
24.核酸扩增混合物，其包含聚乙烯吡咯烷酮和用于进行核酸扩增过程的一种或多种另外的试剂。
25.权利要求24的混合物，其还包含氯己定或柠檬醛；更优选0.9％聚乙烯吡咯烷酮和0.1％氯己定或柠檬醛。
26.用于收集生物样品的多孔笔尖，所述多孔笔尖包含在其中干燥的聚乙烯吡咯烷酮。
27.权利要求26的笔尖，还包含在其中干燥的氯己定或柠檬醛。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.用于获得并任选地处理生物样品以供分析的装置，所述装置包括：
2.权利要求1的装置，其中所述吸头的所述第一部分的长度大于同一部分的宽度；并且优选地也大于所述笔尖的长度。
3.权利要求1或2的装置，其中所述笔尖通过干涉配合保持在所述吸头内。
4.前述权利要求中任一项的装置，其中所述笔尖是烧结多孔笔尖。
5.前述权利要求中任一项的装置，其中所述笔尖包含用于处理在所述笔尖上获得的所述样品的一种或多种活性剂。
6.权利要求5的装置，其中所述一种或多种活性剂为冻干或干燥形式。
7.权利要求5或权利要求6的装置，其中所述一种或多种活性剂包括聚乙烯吡咯烷酮。
8.权利要求5至7中任一项的装置，其中所述一种或多种活性剂包括氯己定和/或柠檬醛。
9.权利要求5至8中任一项的装置，其中所述一种或多种活性剂包含保护核酸免于降解的药剂；优选烷基多葡糖苷。
10.权利要求5至9中任一项的装置，其中当将清洗缓冲液施加到所述笔尖的所述清洗表面时，重力拉动所述清洗缓冲液穿过所述笔尖并从所述笔尖置换经处理过的生物样品。
11.权利要求10的装置，其中所述经处理的生物样品包含核酸，并且所述释放和置换的核酸无需浓缩或纯化即可与分子诊断测试直接兼容。
12.权利要求10的装置，其中所述经处理的生物样品包含蛋白质，并且所述释放和置换的蛋白质与免疫诊断测试直接兼容。
13.权利要求10、11或12中任一项的装置，其中所述清洗缓冲液的施加和生物样品的置换生成气溶胶的风...
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