【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程领域，具体涉及高产油脂和虾青素的胶红酵母及应用。
技术介绍
1、虾青素(3,3-二羟基-β，-胡萝卜素-4,4'-二酮)是一种酮类胡萝卜素，具有抗氧化、抗炎、抗衰老、抗肿瘤和增强免疫功能。它广泛存在于海洋环境中，对各种海洋生物的生存起着重要作用。虾青素的主要天然来源是雨生红球藻、鱼虾蟹以及红法夫酵母。与其它来源相比，胶红酵母发酵虾青素具有许多优点，如培养要求简单、周期短、可利用营养物质广泛、生物量高以及抗逆性强。
2、生物柴油是未来可持续能源供应的潜在候选者之一，因为它有可能实现零二氧化碳净排放，并产生更少的气态污染物。生物柴油作为替代能源的产量在过去十年中显著增加。这有助于减缓化石燃料的消耗和减缓环境恶化。红酵母产生的最丰富的脂肪酸是c16:0(棕榈酸)、c16:1(棕榈油酸)、c18:0(硬脂酸)、c18:1(油酸)和c18:2(亚油酸)，其成分与植物油相似。由于其可利用廉价底物进行油脂合成，相比于植物油有更低的生产成本。
3、胶红酵母具有产生油脂和虾青素的能力，具有很高的商业价值，但是野生胶红酵母的油脂含量和虾青素产量很低，不能满足工业生产要求。与优化培养基、优化培养条件相比，基因改组可以从本质上使菌株进行改变，使该菌株有更广泛的应用前景。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是如何提高野生胶红酵母的油脂含量和虾青素产量低的问题。
2、为了解决上述问题，本专利技术提供了两种胶红酵母菌。
3、本专利
4、本专利技术提供的胶红酵母菌(rhodotorula mucilaginosa)zyj-8-gs24和zyj-8-gs-26是通过如下方法获得的：将胶红酵母菌zyj-8(cgmcc no.27493)出发菌株进行artp诱变，随后进行β-紫罗酮的筛选，将获得的高产虾青素和/或生物油脂的中间菌株制备原生质体，并通过对原生质体进行亲本灭活，以聚乙二醇(peg)为促融剂，进行细胞融合与再生，并通过定向筛选得到能够高产虾青素和/或生物油脂的所述胶红酵母菌cgmcc no.27494和cgmcc no.27495。
5、所述artp诱变筛选条件为使用artp诱变200s。
6、所述β-紫罗酮的筛选浓度为2.0mg/ml。
7、所述胶红酵母菌出发菌株为胶红酵母菌cgmcc no.27493，来源于凡纳滨对虾肠道。
8、所述制备原生质体的步骤，是分别制备所述胶红酵母菌的菌悬液，在一定条件下进行酶解破壁，从而制备成原生质体。
9、所述制备原生质体的步骤还包括亲本灭活步骤。
10、所述亲本灭活可为紫外灭活及加热灭活的方式。所述亲本灭活主要是为了便于后续融合子的筛选，在无选择性培养基的条件下，排除双亲本本类型的再生产物。原生质体融合目的是将双亲的遗传物质进行转化和互补，从而获得兼具双亲优良性状的新菌株，而灭活的亲本可大大减少后续融合子筛选的干扰，同时又能定向筛选双亲互补的融合子。
11、本专利技术还提供了一种菌剂，所述菌剂含有前文所述的胶红酵母菌和/或所述胶红酵母菌的代谢物。
12、前文所述的所述的胶红酵母菌的培养物，是将前文所述的的胶红酵母菌在细菌培养基中培养得到的物质。
13、上述菌剂的活性成分可为上述胶红酵母菌和/或上述胶红酵母菌的代谢物，上述菌剂的活性成分还可含有其他生物成分或非生物成分。
14、上述菌剂中，除所述活性成分外，还含有载体。所述载体可为生物肥料领域常用的且在生物学上是惰性的载体。所述载体可为固体载体或液体载体；所述固体载体可为矿物材料、植物材料或高分子化合物；所述矿物材料可为粘土、滑石、高岭土、蒙脱石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一种；所述植物材料可为玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一种；所述高分子化合物可为聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液体载体可为有机溶剂、植物油、矿物油或水；所述有机溶剂可为癸烷和/或十二烷。
15、上述菌剂可为多种剂型，如液剂、乳剂、悬浮剂、粉剂、颗粒剂、可湿性粉剂或水分散粒剂。
16、根据需要，上述菌剂中还可添加表面活性剂(如吐温20、吐温80等)、粘合剂、稳定剂(如抗氧化剂)、ph调节剂等。
17、上文中，所述代谢物可从所述胶红酵母菌的发酵液中获得。所述代谢物可为所述胶红酵母菌的无菌代谢物或所述胶红酵母菌的含菌代谢物。所述胶红酵母菌的无菌代谢物(无菌发酵滤液)具体可按照如下方法制备，在液体培养基中培养所述胶红酵母菌，过滤除去液体培养物(发酵液)中的所述胶红酵母菌即得到所述胶红酵母菌的无菌代谢物。所述胶红酵母菌的含菌代谢物具体可按照如下方法制备，在液体发酵培养基中培养所述胶红酵母菌，收集发酵液，该发酵液即为所述胶红酵母菌的含菌代谢物。
18、本专利技术还提供了前文所述的胶红酵母菌或所述的菌剂或所述的培养物在制备虾青素中的应用。
19、本专利技术还提供了前文所述的胶红酵母菌或所述的菌剂或所述的培养物在制备制备生物油脂的应用。
20、本专利技术还提供了前文所述的胶红酵母菌或所述的菌剂或所述的培养物在制备产虾青素和/或生物油脂的产品中的应用。
21、本专利技术还提供了前文所述菌剂的制备方法。
22、本专利技术提供的前文所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将前文所述胶红酵母菌作为活性成分，得到所述菌剂。
23、本专利技术还提供了一种制备虾青素的方法，包括如下步骤：在培养基中培养前文所述的胶红酵母菌，从所述发酵产物中得到虾青素。
24、本专利技术还提供了一种制备生物油脂的方法，包括如下步骤：在培养基中培养前文所述的胶红酵母菌，从所述发酵产物中得到生物油脂。
25、本专利技术以一株产油脂和虾青素胶红酵母(rhodotorula mucilaginosa)zyj-8(cgmcc no.27493)为原始菌株，通过常压室温等离子体(artp)诱变，分别通过氯仿提取油脂和β-紫罗酮平板筛选获得油脂和虾青素产量提高菌株zyj-8-y190和zyj-8-s23；分别将上述2株突变菌株进行原生质体制备,并等量混匀后均分为2份，一份采用100℃加热灭活，另一份采用紫外灭活，然后混合进行原生质体融合、再生,并在β-紫罗酮平板筛选获得虾青素含量提高的菌株，再利用氯仿提取油脂筛选到油脂和虾青素含量提高的菌株；然后将f1代菌株制备原生质体，进行第二轮基因组改组，连续经3轮原生质体融合后筛选，获得油脂和虾青素含量提高的突变株zyj-8-gs-2本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.胶红酵母菌，其特征在于：所述胶红酵母菌为胶红酵母菌(Rhodotorulamucilaginosa)ZYJ-8-GS24或/和ZYJ-8-GS-26，所述胶红酵母菌(Rhodotorulamucilaginosa)ZYJ-8-GS24，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.27494，所述胶红酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)ZYJ-8-GS-26，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.27495。
2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的胶红酵母菌和/或所述胶红酵母菌的代谢物。
3.权利要求1所述的胶红酵母菌的培养物，是将权利要求1所述的胶红酵母菌在细菌培养基中培养得到的物质。
4.权利要求1所述的胶红酵母菌、权利要求2所述的菌剂或权利要求3所述的培养物在制备虾青素中的应用。
5.权利要求1所述的胶红酵母菌或权利要求2所述的菌剂或权利要求3所述的培养物在制备生物油脂的应用。
6.权利要求1所述的
7.权利要求2所述菌剂的制备方法，包括如下步骤：将权利要求1所述胶红酵母菌作为活性成分，得到所述菌剂。
8.一种制备虾青素的方法，包括如下步骤：在培养基中培养权利要求1所述的胶红酵母菌，从所述发酵产物中得到虾青素。
9.一种制备生物油脂的方法，包括如下步骤：在培养基中培养权利要求1所述的胶红酵母菌，从所述发酵产物中得到生物油脂。
...【技术特征摘要】
1.胶红酵母菌，其特征在于：所述胶红酵母菌为胶红酵母菌(rhodotorulamucilaginosa)zyj-8-gs24或/和zyj-8-gs-26，所述胶红酵母菌(rhodotorulamucilaginosa)zyj-8-gs24，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no.27494，所述胶红酵母菌(rhodotorula mucilaginosa)zyj-8-gs-26，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为cgmcc no.27495。
2.一种菌剂，其特征在于：所述菌剂含有权利要求1所述的胶红酵母菌和/或所述胶红酵母菌的代谢物。
3.权利要求1所述的胶红酵母菌的培养物，是将权利要求1所述的胶红酵母菌在细菌培养基中培养得到的...
【专利技术属性】
技术研发人员：周志刚，杨雅麟，赵雅洁，药园园，夏锐，孟德龙，王梦昕，张震，冉超，丁倩雯，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：
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