菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆、表达载体构建及其在调控植物干旱中的应用制造技术

本发明专利技术公开了菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法、表达载体及其在调控植物干旱中的应用，先提取金菠萝(下称MD2)叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以cDNA为模板，通过特异性引物AcWRKY31‑F，AcWRKY31‑R进行PCR扩增获得AcWRKY31的全长基因序列。将AcWRKY31基因连接到pENTR载体上并进行转化，连接成功并测序无误后，将已连接到GATEWAY入门载体pENTR上的目的载体与中间载体pGWB605进行LR重组反应。构建成功后，将目的载体转入农杆菌GV3101中，利用农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，CTAB法提取DNA进行PCR鉴定，获得菠萝转基因AcWRKY31的阳性菠萝植株。转基因菠萝植株在干旱胁迫下，过表达AcWRKY31增强了转基因菠萝对干旱胁迫的敏感性。说明AcWRKY31基因具有增强菠萝对干旱敏感性的作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物基因工程，具体是涉及菠萝转录因子acwrky31基因在植物耐干旱上的应用。

技术介绍

1、菠萝(ananas comosus)作为一种重要的热带经济水果作物，由于其独特的风味，广受消费者的喜爱。但近年来，由于种植环境的变化和不科学的农业耕作，导致菠萝在生长发育过程中受到各种生物胁迫和非生物胁迫的危害，严重影响菠萝的品质和产量。

2、不断变化的环境对于植物的生长和发育具有一定的胁迫性，干旱、低温和高盐等非生物胁迫因素对植株生长发育的负面影响变得十分突出，随着全球气候的不断变化，各个地区的降雨量分布极不平衡，干旱的地区更加干旱。有报道称，全球普遍发生的干旱事件，将导致小麦减产21％，玉米减产40％。在干旱条件下，植物的生长变得缓慢，尤其明显的是当叶片形态发生变化时，如叶片面积和数量显著减少，此外有报道称，植物根系生物量也会随着干旱胁迫的加剧而增加。

3、干旱胁迫通常发生在土壤中有效水分的减少以及大气条件通过蒸腾或蒸发导致水分持续流失的情况下。它会导致植物气体交换受到限制，严重破坏植物的代谢和细胞结构，最终导致酶催化反应本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.菠萝转录因子AcWRKY31基因在调控植物干旱中的应用，其特征在于，它在调控菠萝抗干旱性方面的应用。

2.菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法，其特征在于，利用基因工程方法，具体操作如下：

3.根据权利要求2所述的菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法，其特征在于，

4.一种菠萝转录因子AcWRKY31基因表达载体，其特征在于，利用了权利要求2所述的菠萝转录因子AcWRKY31基因为目的基因的表达载体。

5.根据权利要求4所述的菠萝转录因子AcWRKY31基因表达载体，其特征在于：利用了权利要求2所述的菠萝转录因子AcWRKY...

【技术特征摘要】

1.菠萝转录因子acwrky31基因在调控植物干旱中的应用，其特征在于，它在调控菠萝抗干旱性方面的应用。

2.菠萝转录因子acwrky31基因的克隆方法，其特征在于，利用基因工程方法，具体操作如下：

3.根据权利要求2所述的菠萝转录因子acwrky31基因的克隆方法，其特征在于，

4.一种菠萝转录因子acwrky31基因表达载体，其特征在于，利用了权利要求2所述的菠萝转录因子acwrky31基因为目的基因的表达载体。

5.根据权利要求4所述的菠萝转录因子acwrky31基因表达载体，其特征在于：利用...

【专利技术属性】
技术研发人员：王路路，秦源，柴改凤，罗甜甜，王小媚，程焱，郑平，黄东平，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：