琅琊病毒、墨江病毒、尼帕病毒和雪松病毒的四重qRT-PCR方法技术

本发明专利技术公开了琅琊病毒、墨江病毒、尼帕病毒和雪松病毒的四重qRT‑PCR方法，属于生物检测领域。本发明专利技术基于琅琊病毒(LayV)、墨江病毒(MojV)、尼帕病毒(NiV)和雪松病毒(CedV)的全基因组序列，设计了相对保守区域的特异性引物和探针，建立了四重实时荧光qRT‑PCR检测方法。本方法与其他病毒核酸无交叉反应，最佳线性检测范围为10<supgt;1</supgt;～10<supgt;8</supgt;copies/μL，下限为10copies/μL，并且具有良好的重复性。因此，可用于检测亨尼帕病毒及其他相关临床标本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了琅琊病毒、墨江病毒、尼帕病毒和雪松病毒的四重qrt-pcr方法，属于生物检测领域。

技术介绍

1、尼帕病毒病是最近20年新出现的传染病，为尼帕病毒(nipah virus，niv)所致，严重者出现急性脑炎综合征或肺综合征，致死率达40％～100％。由于尼帕病毒病的高死亡率、人兽共患性、可发生人—人传播、无特效药和疫苗，世界卫生组织在《研究和发展蓝图》的优先病原体清单中将尼帕病毒列为需要监测和制定大流行应对措施的8种最危险病原体之一。病毒核酸的快速检测对于早期发现感染病例至关重要。琅琊病毒(langya virus，layv)以山东省琅琊镇命名，是一种系统发育独特的人畜共患亨尼帕病毒。对家畜进行的血清调查中，山羊和狗的血清阳性率分别为2％和5％。在所检测的25种野生小型哺乳动物中，layv rna主要在鼩鼱中检测到(27％)，但尚未有人际传播的记录。在中国，layv被鉴定为与墨江病毒(mojiang virus，mojv)的系统发育关系为最密切的亨尼帕病毒属的新成员。wu等研究指出从黄胸大鼠身上采集的九个肛拭子样本中检测出三个mojv阳性，推本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多重qRT-PCR检测病毒的引物和探针组，其特征在于，用于检测亨尼帕病毒属；所述亨尼帕病毒属包括琅琊病毒LayV、墨江病毒MojV、尼帕病毒NiV和雪松病毒CedV；

2.根据权利要求1所述的引物和探针组，其特征在于，所述探针的5’端修饰有报告基团；四种探针采用不同的报告基团修饰；可选的，所述报告基团包括FAM、HEX、VIC、ROX或Cy5。

3.根据权利要求1或2所述的引物和探针组，其特征在于，所述探针的3’端修饰有淬灭基团；可选的，所述淬灭基团为BHQ1和BHQ2。

4.根据权利要求1～3任一所述的引物和探针组，其特征在于，SEQ ID ...

【技术特征摘要】

1.一种多重qrt-pcr检测病毒的引物和探针组，其特征在于，用于检测亨尼帕病毒属；所述亨尼帕病毒属包括琅琊病毒layv、墨江病毒mojv、尼帕病毒niv和雪松病毒cedv；

2.根据权利要求1所述的引物和探针组，其特征在于，所述探针的5’端修饰有报告基团；四种探针采用不同的报告基团修饰；可选的，所述报告基团包括fam、hex、vic、rox或cy5。

3.根据权利要求1或2所述的引物和探针组，其特征在于，所述探针的3’端修饰有淬灭基团；可选的，所述淬灭基团为bhq1和bhq2。

4.根据权利要求1～3任一所述的引物和探针组，其特征在于，seq id no.3所示核苷酸序列与seq id no.9所示核苷酸序列采用淬灭基团bhq1修饰，seq id no.6所示核苷酸序列与seq id no.12所示核苷酸序列采用淬灭基团bhq2修饰。

5.一种检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求1～4任一所述多重qrt-pcr检测病毒的引物和探针组。...

【专利技术属性】
技术研发人员：武桂珍，雷雯雯，何文君，宋娟，刘军，韩卫芳，
申请(专利权)人：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所，
类型：发明
国别省市：