System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒及其检测模型制造技术_技高网

一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒及其检测模型制造技术

技术编号:40757382 阅读:9 留言:0更新日期:2024-03-25 20:10
本发明专利技术公开了一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒及其检测模型,试剂盒包括:背景板,设置于背景板上的NC膜,设置于背景板上并用于容纳样品的样品垫,包被在NC膜上并位于T线的三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原,固定在结合垫上的EuNPs‑mAb检测探针,结合在C线上的GAM‑IgG,设置于背景板上的吸收垫;本发明专利技术基于铕纳米粒子的灵敏多重侧流免疫层析方法,可在10分钟内完成检测,检测效果好,可靠性高,AOZ、AMOZ和NFS的平均回收率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化学检测领域,特别是一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒及其检测模型


技术介绍

1、硝基呋喃类抗生素包括呋喃他酮(furaltadone,ftd)、呋喃唑酮(furazolidone,fzd)和呋喃苯烯酸钠(sodium nifurstylenate,nfs),已广泛用作饲料添加剂,用于治疗某些细菌性感染(wang,liu,wang,chen,&jiang,2018)。由于其代谢产物具有致癌和致突变性,nf类抗生素被列为禁用药物。

2、自1995年起,欧盟(eu)成员国禁止使用硝基呋喃(european commission,2005)。美国和中国也严格禁止在畜牧业中使用硝基呋喃(federal register,2002;regulationof department of agriculture of china,2002)。2019年中国也禁止使用nfs(regulation of department of agriculture of china,2019)。根据食品和饲料快速预警系统(rapid alert system for food and feed,rasff)门户网站的统计数据,2001-2021年水产养殖业中兽药残留量最多的抗生素类药物中,硝基呋喃及其代谢物占19.5%(guardone,tinacci,armani,&trevisani,2022)。因此,监测水产样品中nf代谢产物是保障公众健康和稳定经济增长的重要手段。

3、值得注意的是,nf抗生素在动物体内代谢迅速。ftd主要代谢物为3-氨基-5-吗啉代甲基-2-恶唑烷酮(3-amino-5-morpholinomethyl-2-oxazolidinone,amoz),fzd主要代谢物为3-氨基-2-恶唑烷酮(3-amino-2-oxazolidinone,aoz)(yan et al.,2018)。它们的代谢物与蛋白质结合,从而可以在动物体内稳定存在数周,甚至数月(wang,kou,wang,ma,&wang,2020)。因此,aoz和amoz分别为fzd和ftd标志性代谢物。由于aoz,amoz具有高极性和低分子量的特点,所以利用2-硝基苯甲醛(2-nba)对硝基呋喃的代谢产物进行衍生化检测(cheng et al.,2023)。相反,nfs可以直接检测,无需衍生(song et al.,2019)。2019年,欧盟将动物源性食品中硝基呋喃及其代谢物的参考行动点(reference points for action,rpa)从1.0μg·kg-1降至0.5μg·kg-1(european commission,2019)。这项法规对检测技术提出了更高的要求。目前,nf代谢物的主要分析方法有高效液相色谱-二极管阵列检测(high performance liquid chromatography-diode array,hplc-dad)(fernando,munasinghe,gunasena,&abeynayake,2017)和液相色谱/串联质谱(liquidchromatography/tandem mass spectrometry,lc-ms/ms)(melekhin et al.,2021)。尽管这些方法灵敏度高、稳定性好,但价格昂贵、操作复杂和耗时使它们只能在实验室中进行。此外,基于抗体特异性识别的免疫分析方法是简单方便的。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,elisa)在小分子药物的检测中具有实用价值,并成功地应用于呋喃妥因(1-aminohydantoin hydrochloride,ahd)(sun,luo,zhang,zhang,&le,2018),aoz(ding,liu,song,kuang,&

4、xu,2017),呋喃西林(semicarbazide hydrochloride,sem)(cheng et al.,2023)和amoz(xie,wang,yan,gan,&le,2021)的检测。但对于同时检测多种代谢物时,需要用工作人员分别测试几个平板,因此该方法不适用于各种污染物的现场检测。由于一种食品可能被多种nf污染,因此单个目标测试不足以满足需求。

5、为满足同时检测多种污染物的需要,侧流免疫层析法(lateralflowimmunochromatographic assay,lfia)应运而生。基于胶体金纳米粒子(aunps)的lfia已经成为一种成熟的即时检测的技术(jia et al.,2022)。由于其具有快速、简便、稳定、便携等优点,已被广泛应用于水产品中兽药残留的检测。然而,aunps的缺点是缺乏稳定的精密度和定量能力(lu et al.,2021)。近年来,荧光标记物被广泛应用于lfia方法中,如量子点(qd)(lu et al.,2021)、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,fitc)(cao,chen,&

6、zhao,2019)和镧系元素(xu et al.,2021)。由于eunps具有较长的荧光寿命和较大的斯托克斯位移,因此被广泛应用,它可以帮助lfia分析减少荧光背景信号的干扰,提高其灵敏度(liu et al.,2022)。eunps-fia在抗生素残留检测领域取得了良好的应用(wanget al.,2021)。

7、在这项研究中,构建了基于eunps的多重lfia(eunps-mlfia)用于同时检测三种nf抗生素和代谢物的残留。该方法简便、快速、可靠,适用于单一水产中多种分析物的检测。此外,eunps-mlfia测定对于在食品安全监测领域中的应用将引起消费者和农民的极大兴趣。


技术实现思路

1、为解决现有技术的不足,本专利技术的目的在于提供了一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒及其检测模型,本专利技术基于铕纳米粒子的灵敏多重侧流免疫层析方法,同时检测水产品中呋喃他酮(furaltadone,ftd)和呋喃唑酮(furazolidone,fzd)的代谢产物以及呋喃苯烯酸钠(sodium nifurstylenate,nfs)残留,检测效率高、效果好,是一种监测多种nf抗生素的有力工具。

2、为了实现上述目标,本专利技术采用如下的技术方案:

3、一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,包括:背景板,设置于背景板上的nc膜,设置于背景板上并用于容纳样品的样品垫,包被在nc膜上并位于t线的三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原,固定在结合垫上的eunps-mab检测探针,结合在c线上的gam-igg,设置于背景板上的吸收垫。

4、前述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原为npaoz-ova、npamoz-bsa、nfs-ova。

5、前述的一种同时检测三种硝基呋本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,包括:背景板,设置于背景板上的NC膜,设置于背景板上并用于容纳样品的样品垫,包被在NC膜上并位于T线的三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原,固定在结合垫上的EuNPs-mAb检测探针,结合在C线上的GAM-IgG,设置于背景板上的吸收垫。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测中三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,所述三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原为NPAOZ-OVA、NPAMOZ-BSA、NFS-OVA。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,所述NPAOZ-OVA位于T1位置,NPAMOZ-BSA位于T2位置,NFS-OVA位于T3位置。

4.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,EuNPs-mAb检测探针由EuNPs-NPAOZ-mAb、EuNPs-NPAMOZ-mAb和EuNPs-NFS-mAb混合而成。

5.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,所述EuNPs-NPAOZ-mAb、EuNPs-NPAMOZ-mAb和EuNPs-NFS-mAb的混合比为:1:1:1-7:8:9;优选为:2:3:4。

6.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,PBS缓冲液的pH值的范围为5-9;优选为弱碱性,更优选为8。

7.一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的检测模型,其特征在于,包括:

8.一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的检测模型,其特征在于,包括:

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【技术特征摘要】

1.一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,包括:背景板,设置于背景板上的nc膜,设置于背景板上并用于容纳样品的样品垫,包被在nc膜上并位于t线的三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原,固定在结合垫上的eunps-mab检测探针,结合在c线上的gam-igg,设置于背景板上的吸收垫。

2.根据权利要求1所述的一种同时检测中三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,所述三种硝基呋喃类抗生素的人工抗原为npaoz-ova、npamoz-bsa、nfs-ova。

3.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝基呋喃类抗生素的试剂盒,其特征在于,所述npaoz-ova位于t1位置,npamoz-bsa位于t2位置,nfs-ova位于t3位置。

4.根据权利要求1所述的一种同时检测三种硝...

【专利技术属性】
技术研发人员:张明洲马骉付贤树梅青周宇欣
申请(专利权)人:中国计量大学
类型:发明
国别省市:

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