用于自身免疫的新型mRNA疫苗制造技术

本公开描述了包含Endotope构建体、STAT1c和miR142靶位点的序列的核酸构建体。在一种实例中，公开了包括Endotope构建体和包含编码组成型活性STAT1(例如STAT1c)的核酸序列的STAT1构建体的组合物，其中Endotope和STAT1构建体各自包括miR142靶位点。在替代的实例中，公开了单一构建体，其包括Endotope构建体和STAT1构建体连同miR142靶位点。核酸构建体可以包装到聚阳离子分子或脂质体中以产生用于有效细胞转染的纳米颗粒。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】

技术介绍

1、自身免疫是针对特定组织中表达的自身抗原(自身ag)的适应性免疫应答的结果。例如，1型糖尿病(t1d)是由β细胞ag反应性糖尿病t细胞对产生胰岛素的β细胞进行自身免疫性破坏所致。t1d影响着数百万美国人，并且其发病率每年都在不可避免地增加1-3。尚无治愈的方法，并且终身用外源性胰岛素替代胰岛素并不能排除严重并发症。与非asit疗法4,5不同，ag特异性免疫疗法(asit)旨在靶向并消除致病淋巴细胞群，而不影响其他免疫细胞且不危及我们的整体免疫保护。几种asit和非asit策略已在临床上进行了研究5,6，但仍没有fda批准的对于t1d的疗法。asit涉及以各种形式和途径递送自身抗原，目的是使对这些ag反应的t细胞脱敏(耐受)。然而，所涉及的ag呈递细胞(apc)的性质通常未知或无法得到很好的控制。

2、造血细胞，特别是树突状细胞(dc)，在调节免疫方面发挥双重作用。根据条件，它们可以引发t细胞免疫(“战斗信号”或免疫原性)或者t细胞耐受(“停止信号”或致耐受性)。当由免疫原性dc呈递自身抗原时，它们可能会抵消致耐受性apc的作用，或本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.用于向受试者给药的两种或更多种核酸构建体，包括(a)第一核酸构建体；和(b)第二核酸构建体；所述第一核酸构建体包括编码至少一种内体靶向信号的至少一种核酸序列、编码至少一种CD4表位的至少一种核酸序列、编码至少一种切割位点的至少一种核酸序列、编码至少一种CD8表位的至少一种核酸序列、以及至少一种miR142靶位点核酸序列；所述第二核酸构建体包括编码STAT1的至少一种核酸序列和至少一种miR142靶位点核酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸构建体，所述核酸构建体是DNA。

3.根据权利要求1所述的核酸构建体，所述核酸构建体是mRNA。>

4.根据权利...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.用于向受试者给药的两种或更多种核酸构建体，包括(a)第一核酸构建体；和(b)第二核酸构建体；所述第一核酸构建体包括编码至少一种内体靶向信号的至少一种核酸序列、编码至少一种cd4表位的至少一种核酸序列、编码至少一种切割位点的至少一种核酸序列、编码至少一种cd8表位的至少一种核酸序列、以及至少一种mir142靶位点核酸序列；所述第二核酸构建体包括编码stat1的至少一种核酸序列和至少一种mir142靶位点核酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸构建体，所述核酸构建体是dna。

3.根据权利要求1所述的核酸构建体，所述核酸构建体是mrna。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的核酸构建物，其中，所述至少一种cd4表位或cd8表位包括参与自身免疫性疾病病症的抗原的至少一部分。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的核酸构建体，其中，所述抗原是选自以下的至少一种：胰岛素原、胰岛素、gad65、ia-2、igrp、znt8、杂合胰岛素肽、charmogranin a、iapp、ica69、ia-2β、regii、gpr78、hsp60、hsp70、seq id no：11-17、髓磷脂碱性蛋白质、蛋白脂质蛋白质、髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白、次要抗原、髓磷脂相关抗原、髓磷脂相关少突胶质细胞碱性蛋白质、2',3'-环-核苷酸3'-磷酸二酯酶、s100β、转醛醇酶、胶原蛋白、软骨糖蛋白39、聚集蛋白聚糖g1、类风湿因子、瓜氨酸肽、氨甲酰化抗原、pad4、braf、hsp65、基底膜层粘连蛋白、ll37、颗粒蛋白前体、桥粒黏蛋白3、pso p27、埃兹蛋白、乳腺丝抑蛋白、过氧化物氧还蛋白2、hsp 27、xvii型胶原蛋白、角蛋白13、hnrnp-a1、flj00294、hnrnp-c1/c2、scg、glcdac05、α-内磺肽、nol8、gfgr3、成束蛋白、信号识别颗粒亚基14、epf、cuzd1、gp2、hmgb1/hmgb2、asca自身抗体、fam84a、vii型胶原蛋白、补体c3、泛素化因子e4a(ube4a)、cbir1鞭毛蛋白自身抗体、α3(iv)nc1、bp180自身抗体、半乳凝素-3自身抗体、过氧化氢酶、α-烯醇化酶或乳铁蛋白自身抗体。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的核酸构建体，其中，所述自身免疫性疾病病症选自由以下组成的组：1型糖尿病、类风湿性关节炎、多发性硬化、银屑病、克罗恩病和溃疡性结肠炎。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸构建体，其中，所述至少一种cd4表位的氨基酸序列选自seq id no:31、33、35、37、39、41或43，或者包括与其具有至少95％同一性的序列。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸构建体，其中，所述至少一种cd8表位的氨基酸序列选自seq id no:53、55、56或57，或者包括与其具有至少95％同一性的序列。

9.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸构建体，其中，所述stat1的序列被突变以防止去磷酸化。

10.根据权利要求1-6中任一项所述的核酸构建体，其中，所述stat1的序列选自seq idno:1或2，或者包括与其具有至少95％同一性的序列。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的核酸构建体，其中，所述mir142靶位点核酸序列选自seq id no:9或10，或者包括与其具有至少95％同一性的序列。

12.一种分离的核酸构建体，包括编码至少一种内体靶向信号的至少一种核酸序列、编码至少一种cd4表位...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷米·J·克鲁索，雷布玛·菲尔代萨·菲特，豪尔赫·波斯蒂戈·费尔南德斯，
申请(专利权)人：纽约市哥伦比亚大学理事会，
类型：发明
国别省市：