一种猪肉肌纤维类型组成的ｍＲＮＡ定量检测方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种建立在肌球蛋白重链不同亚型基因ｍＲＮＡ表达基础上的比组织化学染色法更为准确、可靠的猪肉肌纤维类型组成的定量分子检测方法。为了达到上述目的，本发明专利技术采用以下技术方案：一种猪肉肌纤维类型组成的ｍＲＮＡ定量检测方法，其步骤包括引物与探针设计、总ＲＮＡ提取与质量检测和ｃＤＮＡ第一链的合成，其特征在于：所述引物设计的探针是根据猪ＭｙＨＣ基因不同亚型ｃＤＮＡ上游序列差异合成ＴａｑＭａｎ探针。通过上述技术方案，可以通过建立在肌球蛋白重链不同亚型基因ｍＲＮＡ表达基础上的猪肉肌纤维类型组成的定量分子检测方法比组织化学评定更为准确、可靠，本方法采用这种分子定量分型的方法，可以对不同品种猪不同部位肌肉中不同类型肌纤维进行定量测定及分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种肌纤维类型组成的mRNA定量检测方法，具体为一种猪肉肌纤维 类型组成的mRNA定量检测方法。
技术介绍
我国的猪种资源丰富，分为地方品种、培育品种及外来品种三大类，不同的猪种之 间具有很大的差异。北京黑猪是我国较为成熟的培育品种之一，具有体型较大、生长速度较 快等优点，但其与外来品种在肉品质上的差异研究较为稀少。肉品质是一个综合的、相对模 糊的复杂概念，因此在不同国家、不同地区都具有不同的评价体系与标准。国内通常选用的 评价指标与测量方法对引进猪品种及中国地方猪品种的常规肉品质性状进行了测定，并进 行对测定结果进行了比较分析，为研究影响猪肉品质候选基因提供研究基础。与此同时，越来越多的研究表明，肌纤维作为肌肉基本组成单位，其自身理化性质 在很大程度上可能影响肉品质性状。有关肌纤维性质的研究早在上世纪70年代就已经开 始，但目前的研究主要集中于肌纤维性质的生物学特点以及简单的肌纤维类型分布状况的 探索。传统的研究肌纤维性质的方法主要为免疫组织化学方法，不同的染色方法得到的结 论不尽相同无法准确定义肌纤维类型。传统的研究肌纤维性质的方法多为组织化学染色 方法，不同染色本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种猪肉肌纤维类型组成的ｍＲＮＡ定量检测方法，包括引物与探针设计、总ＲＮＡ提取与质量检测和ｃＤＮＡ第一链的合成，其特征在于：所述引物和探针是根据猪ＭｙＨＣ　Ⅰ、ＭｙＨＣ　Ⅱ　ａ、ＭｙＨＣ　Ⅱ　ｂ和／或ＭｙＨＣ　Ⅱ　ｘ基因ｃＤＮＡ上游序列差异设计的，所述探针为ＴａｑＭａｎ探针，所述的猪ＭｙＨＣ　Ⅰ基因参考序列ＧｅｎＢａｎｋ登录号为“Ｕ７５３１６”，其基因引物序列为５’－ＧＧＧＡＡＡＡＴＣＴＧＡＡＣＡＡＧＣＴＧＡＴＧＡＣＴＣＴＡＴＴＡＣＣＣＣＴＧＧＡＧＡＣＴＴＴＧＴＣＴ－３’，其ＴａｑＭａｎ探针为５’－ＴＴＧＣＧＣＴＣＣＡＣＡＣＡＴＣ－３’，所述的猪ＭｙＨＣⅡ　ａ基因参考序列ＧｅｎＢａｎｋ登录号为...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王楚端，翟丽维，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]