一种软枣猕猴桃的组织培养方法及其在软枣猕猴桃遗传转化中的应用技术

本发明专利技术公开了一种软枣猕猴桃的组织培养方法及其在软枣猕猴桃遗传转化中的应用，该组织培养方法包括：以软枣猕猴桃的成龄叶片作为外植体，依次进行愈伤组织诱导、丛生芽分化诱导以及生根诱导培养；其中成龄叶片为叶龄为20‑30天的叶片。本发明专利技术提供一种利用软枣猕猴桃的成熟叶片进行植物再生及遗传转化的方法，该方法与用其他外植体进行组培快繁获取再生植株相比，其成活率高。不仅为软枣猕猴桃提供了一种快速繁殖生产技术，同时利用这个再生方法进行遗传转化，也可以提高遗传转化的成功率，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物基因工程，具体而言，涉及一种软枣猕猴桃的组织培养方法及其在软枣猕猴桃遗传转化中的应用。

技术介绍

1、软枣猕猴桃果实是一种珍稀的、天然的、绿色的可食用浆果，因其潜在的营养价值和商用价值，是一种世界珍稀的、纯天然的、绿色的可食用浆果，是极具有开发前景的第三代水果之一。人们对软枣猕猴桃的需求在不断的增加，虽然东北有部分地区己经有相对较规范的种植基地，但是在目前优质品种缺乏的情况下，软枣猕猴桃的产量依旧是供不应求，价格也是居高不下。因此，深入研究软枣猕猴桃的快速繁殖，将会对其产业发展起到较大的推动作用，从而缓解供应不足的现象。另外，随着种植面积的增加，软枣猕猴桃缺少优良品系、环境适应性不强，及果实不耐贮藏等问题严重影响了产业的发展。

2、农杆菌介导的遗传转化对于猕猴桃品种改良具有重要意义，相较于传统的育种方式，它具有时效快，操作简单等优势。目前在国内外的研究中，已有关于软枣猕猴桃遗传转化的相关报道。但大部分的研究都是利用原生质体培养，通过peg介导法进行遗传转化。目前将叶片作为外植体，通过农杆菌介导法进行遗传转化的研究在猕猴桃上有较本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种软枣猕猴桃的组织培养方法，其特征在于，包括：以软枣猕猴桃的成龄叶片作为外植体，依次进行愈伤组织诱导、丛生芽分化诱导以及生根诱导培养；

2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导所采用的培养基组分包括MS(含蔗糖)+0.5mg/L NAA+0.1-0.4mg/L6-BA+0.1-0.4mg/L KT；

3.根据权利要求2所述的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导、丛生芽分化诱导以及生根诱导培养的培养温度为24-26℃。

4.如权利要求1-3任一项所述的软枣猕猴桃的组织培养方法在软枣猕猴桃的遗传转化中的应用。

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【技术特征摘要】

1.一种软枣猕猴桃的组织培养方法，其特征在于，包括：以软枣猕猴桃的成龄叶片作为外植体，依次进行愈伤组织诱导、丛生芽分化诱导以及生根诱导培养；

2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导所采用的培养基组分包括ms(含蔗糖)+0.5mg/l naa+0.1-0.4mg/l6-ba+0.1-0.4mg/l kt；

3.根据权利要求2所述的组织培养方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导、丛生芽分化诱导以及生根诱导培养的培养温度为24-26℃。

4.如权利要求1-3任一项所述的软枣猕猴桃的组织培养方法在软枣猕猴桃的遗传转化中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述软枣猕猴桃的遗传转化步骤包括：待转化的外植体与含有目的基因的侵染液混合后，将浸染了浸染液的外植体接种到筛选培养基和丛生苗再生培养基中，得到再生植株，然后对获得的再生植株进行抗性鉴定；

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述筛选培养基的组分包括：ms(含蔗糖)+2mg/l 6-ba+0.2mg/l naa+0.5g/l lh+0.4mg/l草铵膦+抗生素，其培...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙丹，曹馨文，艾军，耿佳麒，石广丽，王振兴，陈帅明，
申请(专利权)人：吉林农业大学，
类型：发明
国别省市：