一种泥蚶线粒体COI基因扩增引物的筛选方法技术

技术编号:4073786 阅读:511 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术筛选了一对用于泥蚶线粒体COI序列扩增的引物,其方法是利用美国国立生物技术信息中心上已有的泥蚶线粒体COI序列,下载后用BioEdit软件比对分析,在确定的保守区域后用引物设计软件Primer?Premier?5设计多对引物。用泥蚶个体的DNA分别和合成的多对引物在反应体系下进行PCR反应,最后经琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出一对引物COINF和COINR。经实验证明,该对引物具有条带单一、扩增效率大于90%的优点,能够满足泥蚶遗传多样性研究的需要,对泥蚶的资源保护和利用、多样性评估、遗传育种等方面将起到重要作用。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种泥蚶线粒体COI基因扩增引物的筛选方法,其特征是a、登陆美国国立生物技术信息中心,下载已有的泥蚶线粒体COI序列;b、将下载的序列用BioEdit软件比对分析,确定序列两端保守区域;c、在确定的保守区域用引物设计软件Primer Premier 5设计多对引物,送交上海生工生物技术有限公司合成;d、将泥蚶个体提取DNA,然后分别和合成的多对引物在反应体系下进行PCR反应,检测引物的扩增情况;e、进行琼脂糖凝胶电泳检测,筛选出条带单一、扩增效率高的一对引物COINF和COINR:COINF为5’TTGATAGGGATCTGTTTAAGA 3’;COINR为5’GCCAATACAGGCAAAGAAA 3’。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:倪刚李琪孔令锋
申请(专利权)人:中国海洋大学
类型:发明
国别省市:95[中国|青岛]

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