一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法技术

技术编号:40712592 阅读:42 留言:0更新日期:2024-03-22 11:14
本发明专利技术公开了一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法,涉及组织病理学与生物技术领域。该包埋方法包括以下步骤:通过溶解基质胶,将类器官释放于多聚甲醛(PFA)固定液中,得到类器官的PFA悬液;对所述类器官的PFA悬液进行脱水处理后,再经透明处理,之后离心得到类器官沉淀;在所述类器官沉淀中加入融化的石蜡快速重悬,之后进行浸蜡处理,然后吸弃上清,用融化的石蜡再次快速重悬,转移至柱模中,之后凝固,脱模,得到柱形蜡块;将所述柱形蜡块放入模具中,利用石蜡进行包埋,脱模以及切片处理,得到所述石蜡切片。该包埋方法可以实现类器官的高效、高速和高质量回收固定及石蜡包埋,为类器官的切片技术提供最佳手段与前期保障。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及组织病理学与生物,特别是涉及一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法


技术介绍

1、现有技术制备类器官回收固定的石蜡切片普遍采用琼脂糖法,目前较为常用的方法如下:

2、一、类器官收集

3、1、类器官收集(例如24孔板,收集1~2孔类器官,大约200~500个类器官);

4、2、4℃静置10min,离心弃去大部分上清。

5、二、琼脂糖凹槽制备

6、1、称量0.2~0.4g琼脂糖,加入至烧杯或者小试剂瓶内;

7、2、加入10ml左右pbs;

8、3、微波炉高火融化,每隔5s暂停打开,观察,重复数次至琼脂糖融化完全;

9、4、取200μl融化琼脂糖,加入至600μl 1.5ml ep管内(如图1所示);

10、5、在盛有琼脂糖的1.5ml ep管内插入一小0.5ml ep管,使琼脂糖形成一圆尖底凹槽,室温或者4℃冰箱静置数分钟,至琼脂糖凝固,轻轻转动小0.5ml ep管,取出0.5ml ep管,可看到琼脂糖内形成一个深圆尖底槽;

...

【技术保护点】

1.一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述PFA固定液的浓度为4wt%。

3.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述溶解基质胶的温度为4℃。

4.根据权利要求3所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述溶解基质胶的时间不低于1h。

5.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,依次使用体积分数为70%、80%、90%和100%的乙醇溶液进行脱水处理。

6.根据权利要求5所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,使用各浓度乙醇...

【技术特征摘要】

1.一种用于类器官回收固定的石蜡切片包埋方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述pfa固定液的浓度为4wt%。

3.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述溶解基质胶的温度为4℃。

4.根据权利要求3所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,所述溶解基质胶的时间不低于1h。

5.根据权利要求1所述的石蜡切片包埋方法,其特征在于,依次使用体积分数为70%、80%、90%和100%的乙醇溶液进行脱水处理。

6.根据权利要求5所述的石蜡切片包埋...

【专利技术属性】
技术研发人员:金鑫魏战勇张曼李庆豪胡慧孙娟项玉强夏璐祖少坡
申请(专利权)人:河南农业大学
类型:发明
国别省市:

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