【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，具体涉及血清trna-valtac-3作为肝癌诊断生物标志物的应用。
技术介绍
1、肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,hcc)是全世界癌症相关死亡率的第三大常见原因。我国约有90％原发性肝癌与乙型肝炎密切相关。手术是肝癌的主要治疗手段，但多数早期肝癌患者无症状，就诊时已处于晚期。被诊断为早期的肝癌可以通过切除或者肝移植的方式治疗，相较于晚期肝癌5年生存率更高。目前ct、超声、mai等影像学技术已被应用于hcc的早期诊断，但这些技术很难发现直径≤1cm的病灶，不足以在早期阶段检测hcc，临床仍然缺乏敏感的诊断方法或生物标志物。因此对肝癌早期诊断的研究是亟待解决的科学问题。
2、转运rna(transfer rna，trna)，又称传送核糖核酸、转移核糖核酸，通常简称为trna，是一种由76-90个核苷酸所组成的rna，其3'端可以在氨酰-trna合成酶催化之下，接附特定种类的氨基酸。tsrna是trna在核酸酶rnasez或dicer作用下产生的、长度约18-40个核苷酸的非编码小rna。已有研究表明，tsrnas对多种癌症的产生和发展起着至关重要的作用，例如，在慢性b淋巴细胞白血病(cll)中，ts-3676可能作为肿瘤抑制因子发挥作用。值得注意的是，tsrna在血清中比较稳定，其可能是多种疾病(包括胰腺癌、肝癌和乳腺癌)的生物标志物。已有研究表明血清线粒体tsrna(trf-gln-ttg-006)可作为一种新的肝细胞癌生物标志物。血清tsrna在乙肝相关性肝癌中应
技术实现思路
1、本专利技术的目的是针对上述问题，提供一种血清trna-valtac-3作为肝癌诊断生物标志物的应用。
2、本专利技术为了实现其目的，采用的技术方案是：
3、检测样本中生物标志物的试剂在制备肝癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中应用，所述生物标志物为trna-valtac-3。
4、在上述的应用的技术方案中，与正常对照相比，trna-valtac-3在患者中的表达水平显著上调。
5、在上述的应用的技术方案中，所述检测样本为血清样本。
6、在上述的应用的技术方案中，所述肝癌为乙肝相关性肝癌。
7、在上述的应用的技术方案中，患者的待测样本中trna-valtac-3的含量通过总rna提取、反转录、荧光定量pcr进行检测得到。
8、在上述的应用的技术方案中，所述荧光定量pcr的扩增引物序列如seq id no.5和6所示。
9、在上述的应用的技术方案中，荧光定量pcr反应体系为：5μl sybr green、正向引物和反向引物各0.2μl、2μl cdna样品和2.6μl ddh2o；pcr反应程序如下：95℃预变性1min，95℃变性10sec，60℃退火30sec，72℃延伸15sec，40个循环，72℃至95℃融解曲线分析5sec。
10、在上述的应用的技术方案中，所述应用的具体方法是：检测患者的血清样本中的trna-valtac-3的水平，如果trna-valtac-3相较于正常水平显著上调，则该患者判定为肝癌高风险患者。
11、本专利技术的有益效果是：
12、本专利技术研究表明，血清trna-valtac-3在乙肝相关性肝癌患者中显著上调，肿瘤切除后血清trna-valtac-3表达显著下调，提示trna-valtac-3与肝癌密切相关，可能为肿瘤细胞分泌到血清中。通过roc分析显示，血清trna-valtac-3对乙肝相关性肝癌患者和hc具有较好的区分效力，这为肝癌患者的早期诊断提供了一种新的潜在的生物标志物，具有潜在的临床应用价值。血清样品容易获取，疑似病人查血可作为早期筛查指标，有异常早期治疗，提高肝癌5年生存率；相比影像学及有创检查更简便、更能让病人接受。现有肝癌标志物如：afp、afu、pivka-ii灵敏度较低，而本专利技术提供的标志物trna-valtac-3的检测灵敏度高，结合其他标志物的联合诊断，一方面可以提高检测灵敏度，另一方面也提高了诊断的准确性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.检测样本中生物标志物的试剂在制备肝癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中应用，其特征在于：所述生物标志物为tRNA-ValTAC-3。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：与正常对照相比，tRNA-ValTAC-3在患者中的表达水平显著上调。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述检测样本为血清样本。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肝癌为乙肝相关性肝癌。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：患者的待测样本中tRNA-ValTAC-3的含量通过总RNA提取、反转录、荧光定量PCR进行检测得到。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述荧光定量PCR的扩增引物序列如SEQID NO.5和6所示。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：荧光定量PCR反应体系为：5μL SYBRGreen、正向引物和反向引物各0.2μL、2μL cDNA样品和2.6μL ddH2O；PCR反应程序如下：95℃预变性1min，95℃变性10sec，60℃退火30sec，72℃延伸15sec，
8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述应用的具体方法是：检测患者的血清样本中的tRNA-ValTAC-3的水平，如果tRNA-ValTAC-3相较于正常水平显著上调，则该患者判定为肝癌高风险患者。
...【技术特征摘要】
1.检测样本中生物标志物的试剂在制备肝癌早期诊断或筛查的试剂或试剂盒中应用，其特征在于：所述生物标志物为trna-valtac-3。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：与正常对照相比，trna-valtac-3在患者中的表达水平显著上调。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述检测样本为血清样本。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肝癌为乙肝相关性肝癌。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：患者的待测样本中trna-valtac-3的含量通过总rna提取、反转录、荧光定量pcr进行检测得到。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在...
【专利技术属性】
技术研发人员：唐翌姝，胡琳，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：
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