【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药，具体涉及抗弓形虫的单克隆抗体及其制备方法与应用。
技术介绍
1、刚地弓形虫是一种机会致病性寄生虫，属于顶复门原虫，能够感染包括人类在内的所有温血脊椎动物。全世界约有1/3的人群感染弓形虫，免疫力正常的人群感染弓形虫，通常表现为隐性感染。但某些免疫功能低下的个体(如艾滋病、器官移植或癌症患者)可能会导致弓形虫脑病、视网膜脉络膜炎等疾病，严重时甚至危及生命。孕妇首次感染可造成胚胎先天损害，例如畸胎、死胎、流产等。
2、磷酸化和去磷酸化之间的平衡是由蛋白激酶和磷酸酶微妙地调节的，对几乎所有的生物过程都至关重要。弓形虫的不同生命周期高度复杂，许多关键步骤都是由磷酸化精确调控。相关研究表明在恶性疟原虫中pfppm2在虫体内发挥着重要作用。me49弓形虫含2c结构域蛋白磷酸酶ppm2a(tgme49_232340)是疟原虫pfppm2的同源物，但ppm2a在弓形虫中的作用尚不清楚。
3、因此，提供一种高灵敏度、强特异性的抗弓形虫ppm2a抗体，对识别和检测样本中ppm2a含量、探究ppm2a在弓形虫中的定位、筛选与ppm2a相互作用的蛋白、帮助研究ppm2a蛋白的作用机制等具有非常重要的作用。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出抗弓形虫ppm2a的单克隆抗体或其抗原结合片段，能够特异性识别弓形虫ppm2a，灵敏度高。
2、本专利技术还提供与上述单克隆抗体或其抗原结合片段相关的生物材料
3、本专利技术还提供一种产品。
4、本专利技术还提供上述单克隆抗体或上述生物材料的应用。
5、本专利技术还提供一种上述或其抗原结合片段的制备方法。
6、根据本专利技术的第一方面实施例的一种抗弓形虫的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区；
7、所述重链可变区包含cdr1、cdr2和cdr3；
8、所述重链可变区的cdr1的氨基酸序列如seq id no.1第13～20位所示；
9、所述重链可变区的cdr2的氨基酸序列如seq id no.1第38～45位所示；
10、所述重链可变区的cdr3的氨基酸序列如seq id no.1第84～87位所示；
11、所述轻链可变区包含cdr1、cdr2和cdr3；
12、所述轻链可变区的cdr1的氨基酸序列如seq id no.3第25～34位所示；
13、所述轻链可变区的cdr2的氨基酸序列如seq id no.3第52～54位所示；
14、所述轻链可变区的cdr3的氨基酸序列如seq id no.3第91～98位所示。
15、根据本专利技术的一些实施例，所述重链可变区的氨基酸序列包含a1)至a3)中的任一种：
16、a1)如seq id no.1所示的氨基酸序列；
17、a2)将seq id no.1经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加，且与seqid no.1所示的蛋白具有相同功能的氨基酸序列；
18、a3)与seq id no.1具有80％、85％或90％以上的同源性，且与seq id no.1所示的蛋白具有相同功能的氨基酸序列；
19、所述轻链可变区的氨基酸序列包含a4)至a6)中的任一种：
20、a4)如seq id no.3所示的氨基酸序列；
21、a5)将seq id no.3经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加，且与seqid no.3所示的蛋白具有相同功能的氨基酸序列；
22、a6)与seq id no.3具有80％、85％或90％以上的同源性，且与seq id no.3所示的蛋白具有相同功能的氨基酸序列。
23、术语“同源性”指在将序列对齐并在必要时引入缺口以达到最大百分比同源性后，且不将保守性取代视为序列相同性的一部分的情况下，候选序列上与相应的天然多肽的残基相同的aa残基的百分比。用于比对的方法和算法是本领域已知的。
24、根据本专利技术的一些实施例，所述单克隆抗体或其抗原结合片段选自全长抗体、fab、fab’、f(ab’)2、fv、scfv、双特异性抗体和多特异性抗体中的至少一种。
25、根据本专利技术的一些实施例，所述抗弓形虫包括抗弓形虫ppm2a。
26、根据本专利技术的第二方面实施例的一种与上述单克隆抗体或其抗原结合片段相关的生物材料，所述生物材料包含b1)至b4)中的任一种；
27、b1)编码上述单克隆抗体或其抗原结合片段的核酸分子；
28、b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒；
29、b3)含有b1)所述核酸分子或b2)所述表达盒的重组载体；
30、b4)含有b1)所述核酸分子或b2)所述表达盒或b3)所述重组载体的重组生物细胞。
31、根据本专利技术的一些实施例，b1)所述核酸分子可以是dna，如cdna、基因组dna或重组dna；所述核酸分子也可以是rna，如mrna或hnrna等。
32、根据本专利技术的一些实施例，b1)所述核酸分子包含编码上述单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区的核酸分子和编码上述单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的核酸分子；其中，
33、编码所述重链可变区的核酸分子的核苷酸序列包含b1)至b3)中的任一种：
34、b1)如seq id no.2所示的核酸分子的核苷酸序列；
35、b2)将seq id no.2经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加，且与seqid no.2所示的蛋白具有相同功能的核酸分子的核苷酸序列；
36、b3)与seq id no.2具有80％、85％或90％以上的同源性，且与seq id no.2所示的蛋白具有相同功能的核酸分子的核苷酸序列；
37、编码所述轻链可变区的核酸分子的核苷酸序列包含b4)至b6)中的任一种：
38、b4)如seq id no.4所示的核酸分子的核苷酸序列；
39、b5)将seq id no.4经过一个或几个氨基酸的取代和/或缺失和/或添加，且与seqid no.4所示的蛋白具有相同功能的核酸分子的核苷酸序列；
40、b6)与seq id no.4具有80％、85％或90％以上的同源性，且与seq id no.4所示的蛋白具有相同功能的核酸分子的核苷酸序列。
41、根据本专利技术的一些实施例，b2)所述表达盒是指能够在宿主细胞中表达所述单克隆抗体的dna，该dna不但可包括启动所述单克隆抗体的编码基因转录的启动子，还可包括终止所述单克隆抗体的编码基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括复制起始位点、转录起始序列、增强子序列、选择元件或报告基因。
42、根据本专利技术的一些实施例，b3)中所本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗弓形虫的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区；
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包含A1)至A3)中的任一种：
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段选自全长抗体、Fab、Fab’、F(ab’)2、Fv、scFv、双特异性抗体和多特异性抗体中的至少一种。
4.一种与权利要求1至3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段相关的生物材料，其特征在于，所述生物材料包含B1)至B4)中的任一种；
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子包含编码如权利要求1至3中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的重链可变区的核酸分子和编码如权利要求1至3中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的轻链可变区的核酸分子；其中，
6.一种产品，其特征在于，所述产品包含C1)或C2)中的至少一种；
7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于，
8.根据权利要求6所述的产品，其特征在于，所述产品包含试剂、检测板、芯片、试纸和试剂盒中的至少一种。
9.权利要求1至3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，或权利要求4至5任一项所述的生物材料在D1)至D4)中的任一种应用；
10.一种如权利要求1至3中任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的制备方法，其特征在于，通过培养如权利要求4或5中所述的重组生物细胞得到。
...【技术特征摘要】
1.一种抗弓形虫的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区；
2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述重链可变区的氨基酸序列包含a1)至a3)中的任一种：
3.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述单克隆抗体或其抗原结合片段选自全长抗体、fab、fab’、f(ab’)2、fv、scfv、双特异性抗体和多特异性抗体中的至少一种。
4.一种与权利要求1至3任一项所述的单克隆抗体或其抗原结合片段相关的生物材料，其特征在于，所述生物材料包含b1)至b4)中的任一种；
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，所述核酸分子包含编码如权利要求1至3中任一项所述的单克隆抗...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭鸿娟，吴蔚玲，邹伟浩，陈棋棋，辛紫萱，郑书雨，
申请(专利权)人：南方医科大学，
类型：发明
国别省市：
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