【技术实现步骤摘要】
本公开涉及经过改进的过继性细胞疗法。更具体地说，本公开涉及经过改进的信号传导分子、细胞和使用其的方法。
技术介绍
1、全球受癌症困扰的人数在1975年到2000年间翻了一番。癌症是全球发病率和死亡率的第二大原因，其中在2012年，新发病例约为1410万，癌症相关死亡人数达820万。最常见的癌症是乳腺癌、肺癌和支气管癌、前列腺癌、结肠癌和直肠癌、膀胱癌、皮肤黑色素瘤、非霍奇金淋巴瘤、甲状腺癌、肾癌和肾盂癌、子宫内膜癌、白血病和胰腺癌。预计未来二十年内新发癌症病例的数量将上升到2200万。
2、免疫系统在检测和对抗人类癌症方面发挥着关键作用。大多数转化细胞很快被免疫哨兵检测到，并通过克隆表达的t细胞受体(tcr)对抗原特异性t细胞进行活化而被破坏。因此，癌症可以被认为是免疫病症，免疫系统无法发挥必要的抗肿瘤应答以持久地抑制和消除所述疾病。为了更有效地对抗癌症，在过去几十年中开发的某些免疫疗法干预特别关注于增强t细胞免疫性。这些治疗仅产生了零星的疾病缓解病例，并没有取得实质性的全面成功。使用靶向抑制t细胞活化的分子(如ctla-4或pd-1)的单克隆抗体的最近疗法已显示出更显著的抗肿瘤作用；然而，由于全身免疫活化，这些治疗还与大量毒性相关。
3、最近，已经在早期临床试验中研究和测试了基于t细胞的分离、修饰、扩增和重新输注的过继性细胞免疫疗法策略。由于其选择性识别和强大的效应机制，t细胞通常是癌症免疫疗法的选择效应细胞。这些治疗证实了不同的成功率，但有少数患者经历了持久的缓解，从而突出了基于t细胞的免疫疗法尚未实
4、细胞毒性t细胞对肿瘤细胞相关抗原的成功识别启动靶向肿瘤溶解并为任何有效的癌症免疫疗法奠定基础。肿瘤浸润t细胞(til)表达特异性指向肿瘤相关抗原的tcr；然而，大量的til仅限于少数人类癌症。工程化t细胞受体(tcr)和嵌合抗原受体(car)有可能提高基于t细胞的免疫疗法对许多癌症和其它免疫病症的适用性。
5、此外，最先进的工程化t细胞仍然受到由癌细胞、炎性细胞、基质细胞和细胞因子组成的复杂的免疫抑制肿瘤微环境的调控。在这些组分中，癌细胞、炎性细胞和抑制性细胞因子对t细胞表型和功能产生不利影响。共同地，肿瘤微环境促使t细胞最终分化为耗竭型t细胞。
6、t细胞耗竭是慢性环境中的t细胞功能障碍的状态，所述状态以以下为标志：抑制性受体的表达增加或抑制性受体的信号传导增加；效应细胞因子的产生减少；以及对抗和消除癌症的能力下降。耗竭型t细胞还示出呈分层方式的功能丧失：在耗竭早期，il-2产生减少并且丧失体外杀伤能力；在耗竭中期，丧失tnf-α产生；并且在耗竭晚期，丧失ifn-γ和gzmb产生。肿瘤微环境中的大多数t细胞分化为耗竭型t细胞并且丧失消除癌症的能力并且最终被清除。
7、转化生长因子β(tgfβ)是一种多效细胞因子，已经作为免疫抑制信号分子牵涉进肿瘤微环境。tgfβ结合到tgfβr1和tgfβr2丝氨酸/苏氨酸激酶受体复合物，从而导致下游转录因子smad2和smad3的受体介导磷酸化。许多肿瘤通过获得tgfβr2受体和/或下游smad信号传导蛋白中的突变来避开tgfβ的细胞抑制和抗增殖作用。tgfβ抑制涉及t细胞的体外效应子和溶细胞活性(包含ifnγ分泌)的关键分子。
8、迄今为止，针对使用中和抗体或激酶抑制剂来抑制tgfβ信号传导的临床试验产生的结果令人失望，并且尚未报道显著的疗效。
技术实现思路
1、本公开总体上部分涉及经过改进的tgfβ信号转换器(嵌合tgfβ受体或ctbr)、基因修饰的细胞、组合物和使用其的方法。
2、在各个实施例中，设想了一种融合多肽，其包括：第一多肽，其包括：tgfβr2的细胞外tgfβ1结合结构域、跨膜结构域和免疫受体细胞内信号传导结构域；多肽切割信号；以及第二多肽，其包括tgfβr1的细胞外tgfβ1结合结构域、跨膜结构域和免疫受体细胞内信号传导结构域。
3、在另外的实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
4、在特定实施例中，所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
5、在一些实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ1细胞内信号传导结构域。在各个实施例中，所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ2跨膜结构域。在特定实施例中，所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ1跨膜结构域。在特定实施例中，所述融合蛋白被称为ctbr12或ctbr12信号转换器。
6、在某些实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ2细胞内信号传导结构域。在另外的实施例中，所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ1跨膜结构域。在特定实施例中，所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ2跨膜结构域。在特定实施例中，所述融合蛋白被称为ctbr12或ctbr12信号转换器。
7、在另外的实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-7rα细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域。在一些实施例中，所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-7rα跨膜结构域。在特定实施例中，所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。在特定实施例中，所述融合蛋白被称为ctbr7或ctbr7信号转换器。
8、在各个实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-7rα细胞内信号传导结构域。在另外的实施例中，所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。在某些实施例中，所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-7rα跨膜结构域。在特定实施例中，所述融合蛋白被称为ctbr7或ctbr7信号转换器。
9、在另外的实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rβ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域。在各个实施例中，所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rβ跨膜结构域。在各个实施例中，所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。在特定实施例中，所述融合蛋白被称为ctbr15或ctbr15信号转换器。
10、在特定实施例中，所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种融合多肽，其包括：
2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
4.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-12Rβ2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-12Rβ1细胞内信号传导结构域。
5.根据权利要求4所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-12Rβ2跨膜结构域。
6.根据权利要求4或权利要求5所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-12Rβ1跨膜结构域。
7.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-12Rβ1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫
8.根据权利要求7所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-12Rβ1跨膜结构域。
9.根据权利要求7或权利要求8所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-12Rβ2跨膜结构域。
10.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-7Rα细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域。
11.根据权利要求10所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-7Rα跨膜结构域。
12.根据权利要求10或权利要求11所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
13.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-7Rα细胞内信号传导结构域。
14.根据权利要求13所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
15.根据权利要求13或权利要求14所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-7Rα跨膜结构域。
16.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rβ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域。
17.根据权利要求16所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rβ跨膜结构域。
18.根据权利要求16或权利要求17所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
19.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rβ细胞内信号传导结构域。
20.根据权利要求19所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
21.根据权利要求19或权利要求20所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rβ跨膜结构域。
22.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-21R细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域。
23.根据权利要求22所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-21R跨膜结构域。
24.根据权利要求22或权利要求23所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
25.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-2Rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是IL-21R细胞内信号传导结构域。
26.根据权利要求25所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括IL-2Rγ跨膜结构域。
27.根据权利要求25或权利要求26所述的融合多肽，...
【技术特征摘要】
1.一种融合多肽，其包括：
2.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域从细胞因子受体、白细胞介素受体、模式识别受体或toll样受体分离。
4.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ1细胞内信号传导结构域。
5.根据权利要求4所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ2跨膜结构域。
6.根据权利要求4或权利要求5所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ1跨膜结构域。
7.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-12rβ2细胞内信号传导结构域。
8.根据权利要求7所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ1跨膜结构域。
9.根据权利要求7或权利要求8所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-12rβ2跨膜结构域。
10.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-7rα细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域。
11.根据权利要求10所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-7rα跨膜结构域。
12.根据权利要求10或权利要求11所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
13.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-7rα细胞内信号传导结构域。
14.根据权利要求13所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
15.根据权利要求13或权利要求14所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-7rα跨膜结构域。
16.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rβ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域。
17.根据权利要求16所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rβ跨膜结构域。
18.根据权利要求16或权利要求17所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
19.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rβ细胞内信号传导结构域。
20.根据权利要求19所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
21.根据权利要求19或权利要求20所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rβ跨膜结构域。
22.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-21r细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域。
23.根据权利要求22所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-21r跨膜结构域。
24.根据权利要求22或权利要求23所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
25.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-2rγ细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-21r细胞内信号传导结构域。
26.根据权利要求25所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-2rγ跨膜结构域。
27.根据权利要求25或权利要求26所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-21r跨膜结构域。
28.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-18r1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-18rap细胞内信号传导结构域。
29.根据权利要求28所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-18r1跨膜结构域。
30.根据权利要求28或权利要求29所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-18rap跨膜结构域。
31.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-18rap细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-18r1细胞内信号传导结构域。
32.根据权利要求31所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-18rap跨膜结构域。
33.根据权利要求31或权利要求32所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-18r1跨膜结构域。
34.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1r1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rap细胞内信号传导结构域。
35.根据权利要求34所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-1r1跨膜结构域。
36.根据权利要求34或权利要求35所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-1rap跨膜结构域。
37.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rap细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1r1细胞内信号传导结构域。
38.根据权利要求37所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-1rap跨膜结构域。
39.根据权利要求37或权利要求38所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-1r1跨膜结构域。
40.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rap细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rl2细胞内信号传导结构域。
41.根据权利要求22所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-1rap跨膜结构域。
42.根据权利要求40或权利要求41所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-1rl2跨膜结构域。
43.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rl2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是il-1rap细胞内信号传导结构域。
44.根据权利要求43所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括il-1rl2跨膜结构域。
45.根据权利要求43或权利要求44所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括il-1rap跨膜结构域。
46.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是ifnar1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是ifnar2细胞内信号传导结构域。
47.根据权利要求46所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括ifnar1跨膜结构域。
48.根据权利要求46或权利要求47所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括ifnar2跨膜结构域。
49.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是ifnar2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是ifnar1细胞内信号传导结构域。
50.根据权利要求49所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括ifnar2跨膜结构域。
51.根据权利要求49或权利要求50所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括ifnar1跨膜结构域。
52.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr1细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr1细胞内信号传导结构域。
53.根据权利要求52所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括tlr1跨膜结构域。
54.根据权利要求52或权利要求53所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括tlr1跨膜结构域。
55.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr2细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr2细胞内信号传导结构域。
56.根据权利要求55所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括tlr2跨膜结构域。
57.根据权利要求55或权利要求56所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括tlr2跨膜结构域。
58.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr3细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr3细胞内信号传导结构域。
59.根据权利要求58所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括tlr3跨膜结构域。
60.根据权利要求58或权利要求59所述的融合多肽，其中所述第二多肽的所述跨膜结构域包括tlr3跨膜结构域。
61.根据权利要求1所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr4细胞内信号传导结构域，并且所述第二多肽的所述免疫受体细胞内信号传导结构域是tlr4细胞内信号传导结构域。
62.根据权利要求61所述的融合多肽，其中所述第一多肽的所述跨膜结构域包括tlr4跨...
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