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用于生产视黄醇乙酸酯的方法技术

技术编号:40679994 阅读:3 留言:0更新日期:2024-03-18 19:19
本发明专利技术涉及一种用于在宿主细胞,特别是产油酵母例如耶氏酵母属(Yarrowia)中生产视黄醇乙酸酯的新颖方法,其中产物纯度可随着不希望的副产物的减少而增大。特别地,所述新颖方法包括例如在补料分批发酵过程中,在乙醇存在下发酵。这种方法在用于生产维生素A的生物技术方法中特别有用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍


技术实现思路

【技术保护点】

1.一种用于在真菌宿主细胞,特别是产油酵母细胞,优选地耶氏酵母属中生产视黄醇乙酸酯的方法,所述方法包括在乙醇存在下发酵所述宿主细胞。

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述发酵是补料分批发酵。

3.根据权利要求2所述的方法,所述方法包括在所述分批阶段期间将浓度为约5%(v/v)或更低的乙醇添加到所述培养基中。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,所述方法包括在不存在甘油三酯,优选地植物油的情况下发酵所述宿主细胞。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中包括脂肪酸视黄酯(FARE)在内的副产物的形成被减少或消除,优选地与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,基于总类视黄醇减少至少约50%。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,基于总类视黄醇的视黄醇乙酸酯的百分比增大,优选地增大了至少约25%。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,总类视黄醇的产量增大,优选地增大至少约30%。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中所述宿主细胞用异源基因转化并表达所述异源基因,优选地编码催化将视黄醇转换成视黄醇乙酸酯的乙酰化酶,更优选地真菌酶,最优选地源自Lachancea mirantina的真菌酶的基因。

9.根据权利要求8所述的方法,其中所述乙酰化酶在序列中包含一个或多个氨基酸取代,所述序列与SEQ ID NO:18具有至少约20%,例如25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、92%、95%、97%、98%、99%或高达100%的同一性,其中所述一个或多个氨基酸取代位于与选自由以下组成的组的氨基酸残基对应的位置处:在根据SEQ ID NO:18的多肽中的位置68、69、72、73、171、174、176、178、291、292、294、301、307、308、311、312、320、322、334、362、405、407、409、480、483、484、490、492、520、521、522、524、525、526以及它们的组合。

10.一种用于减少视黄醇到FARE的酶促转换的方法,优选地其中基于总类视黄醇的FARE的百分比小于25%,所述方法包括在乙醇存在下发酵产生视黄醇乙酸酯的宿主细胞。

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种用于在真菌宿主细胞,特别是产油酵母细胞,优选地耶氏酵母属中生产视黄醇乙酸酯的方法,所述方法包括在乙醇存在下发酵所述宿主细胞。

2.根据权利要求1所述的方法,其中所述发酵是补料分批发酵。

3.根据权利要求2所述的方法,所述方法包括在所述分批阶段期间将浓度为约5%(v/v)或更低的乙醇添加到所述培养基中。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,所述方法包括在不存在甘油三酯,优选地植物油的情况下发酵所述宿主细胞。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中包括脂肪酸视黄酯(fare)在内的副产物的形成被减少或消除,优选地与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,基于总类视黄醇减少至少约50%。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,基于总类视黄醇的视黄醇乙酸酯的百分比增大,优选地增大了至少约25%。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中与包括在不存在乙醇的情况下发酵所述宿主细胞的方法相比,总类视黄醇的产量增大,优选地增大至少约30%。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:彼得·路易斯·休斯顿瓦尔米克·卡努拜·维亚斯安娜·西姆博尔纳格拉布斯卡里德·查德伯恩·多滕克里斯托弗·马克·法雷尔伊桑·拉姆
申请(专利权)人:帝斯曼知识产权资产管理有限公司
类型:发明
国别省市:

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