【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及转基因植物，具体涉及osgxmt1基因、grna引物对和重组载体在改善水稻秸秆酶解效率中的应用。
技术介绍
1、化石燃料的大量使用造成全球范围内的环境问题和能源危机。以纤维素乙醇为代表的生物质能源是化石燃料的理想替代能源。植物细胞壁是纤维素乙醇能源生产的主要原料，然而，细胞壁的抗降解结构阻碍纤维素酶对木质纤维素的降解效率。半纤维素是植物细胞壁中含量最丰富的非晶体多糖，其支链糖基葡萄糖醛酸的甲基化修饰影响半纤维素与纤维素和木质素相互作用，从而影响细胞壁的结构。
2、尽管据报道水稻基因组中含有5个gxmt基因家族成员，但gxmt基因对水稻的影响仍然未知。
技术实现思路
1、为挖掘一种改善水稻秸秆酶解效率的方法，本专利技术提供了osgxmt1基因、grna引物对和重组载体在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，本专利技术通过敲除osgxmt1基因提高水稻秸秆直接酶解效率以及酸或碱预处理后酶解效率，从而提高水稻秸秆利用效率。
2、本专利技术提供了osgxmt1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，所述osgxmt1基因cds序列如seq id no.1所示，其编码的氨基酸序列如seq id no.2所示。
3、进一步地，通过敲除所述osgxmt1基因改善水稻秸秆酶解效率。
4、进一步地，敲除所述osgxmt1基因过程如下:
5、合成osgxmt1基因的grna引物序列，所述grna引物如seq id no.3-4所示；
...【技术保护点】
1.OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，所述OsGXMT1基因CDS序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，通过敲除所述OsGXMT1基因改善水稻秸秆酶解效率。
3.根据权利要求2所述的OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，敲除所述OsGXMT1基因过程如下:
4.根据权利要求3所述的OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，将gRNA引物序列片段双链化得双链gRNA序列片段过程为：将合成的目的基因gRNA引物序列片段按摩尔浓度比1：1混合，于94-98℃条件下解链10-15分钟，自然冷却过程中，gRNA正向和反向引物序列发生双链化，获得双链gRNA序列片段。
5.根据权利要求3所述的OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，将双链gRNA序列片段连接至载体pRGEB32过程为：使用的基因编辑载体为pRGEB32，用
6.根据权利要求3所述的OsGXMT1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，所述农杆菌为EHA105。
7.一种gRNA引物对，其特征在于，所述gRNA引物对用于敲除权利要求1所述的OsGXMT1基因；
8.一种包含权利要求7所述的gRNA引物对的重组载体。
9.一种包含权利要求8所述的重组载体的重组菌株。
10.权利要求7所述的gRNA引物对、权利要求8所述的重组载体或权利要求9所述的重组菌株在改良水稻秸秆酶解效率中的应用。
...【技术特征摘要】
1.osgxmt1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，所述osgxmt1基因cds序列如seq id no.1所示，其编码的氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.根据权利要求1所述的osgxmt1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，通过敲除所述osgxmt1基因改善水稻秸秆酶解效率。
3.根据权利要求2所述的osgxmt1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，敲除所述osgxmt1基因过程如下:
4.根据权利要求3所述的osgxmt1基因在改善水稻秸秆酶解效率中的应用，其特征在于，将grna引物序列片段双链化得双链grna序列片段过程为：将合成的目的基因grna引物序列片段按摩尔浓度比1：1混合，于94-98℃条件下解链10-15分钟，自然冷却过程中，grna正向和反向引物序列发生双链化，获得双链grna序列片段。
5.根据权利要求3所述的osg...
【专利技术属性】
技术研发人员：江琳琳，阮楠，徐铨，李丰成，黄玉威，尹学琳，赫天一，张一，刘畅，王晔，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：
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