【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因检测，具体涉及一种鉴别猪繁殖与呼吸综合征病毒不同流行毒株的引物及试剂盒。
技术介绍
1、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，prrs)是一种高度接触性传染病，各种猪只均易感染，由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcinereproductive and respiratory syndrome virus，prrsv)感染引起，临床表现为发热、母猪屡配不孕或中后期流产、仔猪成活率降低、不同阶段猪只呼吸障碍等症状[1]。prrs在世界各地广泛流行，严重影响母猪繁殖性能和育肥猪料肉比，给世界各国的生猪养殖业造成巨大的经济损失[2]。
2、prrsv为动脉炎病毒科(arteriviridae)动脉炎病毒属(arterivirus)成员，是单股正链rna病毒，基因组长13～15kb，至少包含有10个开放阅读框，prrsv分为prrsv-1型和prrsv-2型两个基因型，目前国内流行的主要为prrsv-2型[3]。prrsv具有广泛的遗传变异性，流行以来经常发生突变，流行毒株包括经典prrsv(c-prrsv)、高致病性蓝耳毒株(hp-prrsv)[4]、类nadc30毒株(类nadc30)和类nadc34毒株(类nadc34)[5]。类nadc30毒株和类nadc34毒株均因其较高的重组和突变率近年来备受关注[6]。
3、随着生猪养殖规模的扩大及养殖密度的增加，猪病原混合感染比例逐渐上升，prrsv亦为严重的免疫抑制疾病，该
4、参考文献
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17、[9]long 本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株的引物，其特征在于，包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的正向引物和核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的反向引物。
2.权利要求1所述引物在制备鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株中的试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株的PCR反应体系为20μL，包括以下组分：2×PCR MasterMix 10μL、10μmol/mL上下游引物各1.6μL、cDNA2μL和ddH2O 4.8μL。
4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株的PCR反应程序为95℃预变性3min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸1min 15s，40个循环；72℃延伸5min。
5.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述引物扩增PRRSV经典毒株的
6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述引物扩增PRRSV经典毒株的目标片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；
7.一种鉴别PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株和类NADC34毒株的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物和PCR检测试剂。
8.根据权利要求7所述试剂盒，其特征在于，所述PCR检测试剂包括2×PCR MasterMix。
9.根据权利要求8所述试剂盒，其特征在于，还包括反转录试剂和阳性标准品。
10.根据权利要求9所述试剂盒，其特征在于，所述阳性标准品包括以下至少一种：含所述引物扩增PRRSV经典毒株的目标片段的重组质粒、包含有所述引物扩增高致病毒株的目标片段的重组质粒、包含所述引物扩增类NADC30毒株的目标片段的重组质粒、包含所述引物扩增类NADC34毒株的目标片段的重组质粒；
...【技术特征摘要】
1.一种鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的引物，其特征在于，包括核苷酸序列如seq id no:1所示的正向引物和核苷酸序列如seq id no:2所示的反向引物。
2.权利要求1所述引物在制备鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株中的试剂盒中的应用。
3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的pcr反应体系为20μl，包括以下组分：2×pcr mastermix 10μl、10μmol/ml上下游引物各1.6μl、cdna2μl和ddh2o 4.8μl。
4.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述鉴别prrsv经典毒株、高致病毒株、类nadc30毒株和类nadc34毒株的pcr反应程序为95℃预变性3min；94℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸1min 15s，40个循环；72℃延伸5min。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：王金涛，师源，蹇艳银，倪民婷，张耕馨，张佳怡，卢淳，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，
类型：发明
国别省市：
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