【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微流控，特别涉及一种核酸检测方法、检测系统、pcr设备及可读存储介质。
技术介绍
1、声表面波微流控芯片可以对微尺度液体进行精确控制和操纵，近三十年来取得了飞速的发展。基于微流控检测平台的检测技术比传统的检测方法通量高，节省样本与试剂用量，反应速度快，便携性好，自动化潜力高。目前已经发展为物理、微电子、材料、化学、生物、医学等多学科交叉的新型研究领域，可以在临床核酸检测、免疫蛋白检测、药物筛选等方面具有很好的应用前景。
2、聚合酶链式反应简称pcr，pcr是体外酶促合成特异dna片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等反应组成一个周期，循环进行，使目的dna得以迅速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究，还可用于疾病的诊断或任何有dna，rna的地方。
3、基于声表面波的声流体技术在芯片实验室研究领域得到了广泛关注，由于声表面波在形成和传播过程中所携带的能量和动量可以通过各种设计精确控制，如不同的数字间传感器(idt)设计和材料选择，已被广泛应用于生物样品操作和分析。
4、在核酸检测领域，现有通常通过试剂盒和大型设备对核酸进行检测，一方面因设备较大，对检测场地要求较高，另一方面，现有的设备无法同时完成核酸恒温扩增、核酸pcr扩增以及免疫抗体检测等多个步骤，灵活性和便携性较差，检测效率也较低。
技术实现思路
1、本专利技术的主要目的是提供一种核酸检测方法、检测系统
2、为实现上述目的，本专利技术提出一种核酸检测方法，所述核酸检测方法包括：
3、制备声表面波微流控芯片；
4、采用所述声表面波微流控芯片对待测样品进行核酸扩增；
5、检测所述待测样品目的基因的表达量。
6、在一实施例中，所述制备声表面波微流控芯片的步骤包括：
7、制备铌酸锂基底；
8、制备pdms中间层；
9、提供接口层；
10、键合所述铌酸锂基底和所述pdms铌酸锂基底，并连接所述接口层和所述pdms中间层，以得到所述声表面波微流控芯片。
11、在一实施例中，所述制备铌酸锂基底的步骤包括：
12、提供铌酸锂基片；
13、对所述铌酸锂基片进行清洗和抛光处理；
14、在所述铌酸锂基片上制备叉指电极的图形；
15、基于所述图形在所述铌酸锂基片上制备所述叉指电极的薄膜金属电极，以制备得到铌酸锂基底。
16、在一实施例中，所述制备pdms中间层的步骤包括：
17、提供所述pdms中间层的阳面模板；
18、将pdms预聚物和固化剂按重量比10：1均匀混合并搅拌，真空脱气30min后，形成pdms；
19、将所述pdms浇筑至所述阳面模板，真空脱气30min，并加热固化处理30min，以形成所述pdms中间层。
20、在一实施例中，所述声表面波微流控芯片设有反应室和与所述反应室相连通的第一通道、第二通道以及第三通道，所述采用所述声表面波微流控芯片对待测样品进行核酸扩增的步骤包括：
21、向所述反应室中添加磁珠和待测样品，对所述待测样品的细胞进行rna捕获；
22、向所述反应室中添加洗涤液和纯化溶液，对所述待测样品进行rna洗涤和纯化；
23、向所述反应室中添加洗涤液和洗脱液，对所述待测样品进行rna洗脱；
24、向所述反应室中添加pcr预混液，对所述待测样品进行热循环qpcr。
25、在一实施例中，所述向所述反应室中添加磁珠和待测样品，对所述待测样品的细胞进行rna捕获的步骤包括：
26、通过所述第二通道向所述反应室添加5μl所述磁珠和95μl所述待测样品；
27、通过所述声表面波微流控芯片诱导所述磁珠和所述待测样品相互碰撞；
28、保持所述声表面波微流控芯片运行5min，使所述待测样品的rna附着于所述磁珠的表面。
29、在一实施例中，所述声表面波微流控芯片还设有磁场发生器，所述向所述反应室中添加洗涤液和纯化溶液，对所述待测样品进行rna洗涤和纯化的步骤包括：
30、向所述第一通道中注入100μl第一洗涤液和100μl第一空气；
31、向所述第一通道中注入80μl纯化溶液和100μl第二空气；
32、开启所述磁场发生器，将所述第一洗涤液注入所述反应室中；
33、通过所述第一空气将所述第一洗涤液转移至所述第三通道；
34、保持所述磁场发生器，将所述纯化溶液注入所述反应室中；
35、通过所述第二空气将所述纯化溶液以及杂质转移至所述第三通道。
36、在一实施例中，所述向所述反应室中添加洗涤液和洗脱液，对所述待测样品进行rna洗脱的步骤包括；
37、向所述第一通道中注入100μl第二洗涤液和100μl第三空气；
38、向所述第一通道中注入50μl洗脱液和100μl第四空气；
39、将所述第二洗涤液注入所述反应室中，洗涤5min；
40、通过所述第三空气将所述第二洗涤液转移至所述第三通道；
41、将所述洗脱液注入所述反应室中；
42、关闭所述磁场发生器，开启所述声表面波微流控芯片；
43、通过所述第四空气将所述洗脱液转移至所述第二通道；
44、开启所述磁场发生器，并将所述磁珠转移至所述第二通道，并保留1μlrna溶液。
45、在一实施例中，所述通过所述声表面波微流控芯片进行qpcr，以产生荧光信号的步骤包括：
46、向所述第一通道中注入59μlpcr预混液；
47、将所述pcr预混液注入所述反应室，与所述rna溶液混合，以获得pcr反应液；
48、打开所述第一通道和所述第三通道，关闭所述第二通道，以分离所述pcr反应液和残留的所述洗脱液；
49、打开所述第二通道和所述第三通道，关闭所述第一通道，使位于所述第三通道中的所述pcr反应液进入所述反应室；
50、保持所述声表面波微流控芯片运行，以通过所述声表面波产生热量，进行qpcr。
51、在一实施例中，所述检测所述待测样品目的基因的表达量的步骤包括：
52、通过荧光采集模块实时获取所述声表面波微流控芯片中的荧光信号；
53、将所述荧光信号转换为荧光数据；
54、实时显示所述荧光数据，并形成荧光曲线；
55、获取所述待测样品的目的基因表达量。
56、本专利技术还提出一种检测系统，所述检测系统用于实现如上述的核酸检测方法，所述检测系统包括：
57、声表面波微流控芯片；
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1.一种核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法包括：
2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备声表面波微流控芯片的步骤包括：
3.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备铌酸锂基底的步骤包括：
4.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备PDMS中间层的步骤包括：
5.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述声表面波微流控芯片设有反应室和与所述反应室相连通的第一通道、第二通道以及第三通道，所述采用所述声表面波微流控芯片对待测样品进行核酸扩增的步骤包括：
6.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述向所述反应室中添加磁珠和待测样品，对所述待测样品的细胞进行RNA捕获的步骤包括：
7.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述声表面波微流控芯片还设有磁场发生器，所述向所述反应室中添加洗涤液和纯化溶液，对所述待测样品进行RNA洗涤和纯化的步骤包括：
8.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述向所述反应室中添加洗涤液
9.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述通过所述声表面波微流控芯片进行qPCR，以产生荧光信号的步骤包括：
10.根据权利要求1至9中任一项所述的核酸检测方法，其特征在于，所述检测所述待测样品目的基因的表达量的步骤包括：
11.一种检测系统，其特征在于，所述检测系统用于实现如权利要求1至10中任一项所述的核酸检测方法，所述检测系统包括：
12.一种PCR设备，其特征在于，所述PCR设备包括处理器、与所述处理器信号连接的存储器；
13.一种可读存储介质，其特征在于，所述可读存储介质存储有处理器可运行的程序指令，所述程序指令用于执行权利要求1至10任一项所述核酸检测方法方法。
...【技术特征摘要】
1.一种核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法包括：
2.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备声表面波微流控芯片的步骤包括：
3.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备铌酸锂基底的步骤包括：
4.根据权利要求2所述的核酸检测方法，其特征在于，所述制备pdms中间层的步骤包括：
5.根据权利要求1所述的核酸检测方法，其特征在于，所述声表面波微流控芯片设有反应室和与所述反应室相连通的第一通道、第二通道以及第三通道，所述采用所述声表面波微流控芯片对待测样品进行核酸扩增的步骤包括：
6.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述向所述反应室中添加磁珠和待测样品，对所述待测样品的细胞进行rna捕获的步骤包括：
7.根据权利要求5所述的核酸检测方法，其特征在于，所述声表面波微流控芯片还设有磁场发生器，所述向所述反应室中添加洗涤液和纯化...
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