【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于环境dna检测，具体涉及一种用于检测区分福寿螺的dna宏条形码引物、试剂盒及用途。
技术介绍
1、环境dna(environmental dna，edna)是指从环境样品(如水、粪便、土壤、排泄物等)中直接提取到的所有dna片段集合。从环境样品中直接提取dna片段后利用各种分子生物学手段对环境中的生物进行定性或定量分析的方法被称为edna技术。在水生动物调查研究中，edna技术与传统的调查方法相比，具有高效、快速、高灵敏度及对生物体无损伤的特点。近年来，edna技术已经在水生生物入侵、珍稀物种监测、生物多样性评估以及生物量估测等方面得到广泛应用。
2、福寿螺(pomacea spp.)是重要的外来入侵有害生物，由于其食性贪婪且少有天敌，对水稻等作物产量和品质造成了重要影响，危及粮食安全，急需治理。更加高效的抑制福寿螺对农业生产的危害有着重要意义。因此，及时、准确地监测福寿螺在水体中的早期扩散有利于防控其进一步入侵。传统的监测主要以现场观察和调查问卷为主，操作难度大，费时费工，且无法准确对福寿螺进行早期监测预警。
3、快速准确地掌握福寿螺野外分布状况和种群数量是开展入侵防控工作的重要基础。在田间采集中，目前调查福寿螺入侵分布的主流方法以目视调查和活体采集为主，传统调查方法存在未发现螺体或卵块、生境不适宜采集活体成螺或卵块、入侵早期难以监测等问题。因此，如何有效的对福寿螺进行监测鉴定尤为重要。
技术实现思路
1、针对现有技术中的上述不足，本专利技术
2、为实现上述目的，本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：
3、一种用于检测区分福寿螺(pomacea canaliculata)的dna宏条形码引物，其序列如下：
4、18srrna-2-f：5’-cactggtggtcttgtagttgactatcc-3’；(seq id no.1)
5、18srrna-2-r：5’-gactcctgtggtactgtgtctgttc-3’。(seq id no.2)
6、上述dna宏条形码引物在制备检测区分福寿螺的试剂或试剂盒中的用途。
7、一种检测区分福寿螺的试剂盒，包括上述dna宏条形码引物。
8、上述dna宏条形码引物，或试剂盒在检疫、监测和/或防治福寿螺中的用途。
9、一种检测环境中福寿螺的方法，采用上述dna宏条形码引物，或试剂盒，对待测样品edna进行pcr扩增，根据扩增结果判断样品中是否含有福寿螺。
10、进一步地，如若在129bp处有条带出现，则说明样品中含有福寿螺。
11、本专利技术的有益效果：
12、本专利技术通过设计筛选出高特异性、高灵敏度的dna宏条形码引物，设计出能快速且精准地区分福寿螺与水田其他水生生物的引物，来构建水体中福寿螺edna-宏条形码监测技术，可用于检测不同水体类型中福寿螺的发生情况，为今后运用edna-宏条形码技术对福寿螺进行早期监测预警提高技术参考。
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1.一种用于检测区分福寿螺的DNA宏条形码引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO1～2所示。
2.权利要求1所述的DNA宏条形码引物在制备检测区分福寿螺的试剂或试剂盒中的用途。
3.一种检测区分福寿螺的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的DNA宏条形码引物。
4.权利要求1所述的DNA宏条形码引物，或权利要求3所述的试剂盒在检疫、监测和/或防治福寿螺中的用途。
5.一种检测环境中福寿螺的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的DNA宏条形码引物，或权利要求3所述的试剂盒，对待测样品eDNA进行PCR扩增，根据扩增结果判断样品中是否含有福寿螺。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，PCR扩增体系包括：上下游引物各1μL、DNA1μL、Easy Taq mix 12.5μL，最后用ddH2O补足至25μL。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，PCR反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，59℃退火30s，72℃延伸1min，35个循环；72℃延伸10min，4℃保存。
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