【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术和生物医药领域，具体涉及一种具有血浆稳定性的活性多肽及其制备方法。
技术介绍
1、芋螺毒素是由海洋软体动物芋螺(conus)分泌的一类用于自卫和捕食的活性肽类毒素。芋螺毒素分子质量小，通常由10-30个氨基酸残基组成，大多富含半胱氨酸，具有高度保守的二硫键骨架。芋螺毒素种类繁多，可达5万种以上，其一级结构多变，但信号肽及前导肽序列保守。根据保守的信号肽序列，芋螺毒素可分为：a、m、o、i、p、s、t等超家族(superfamily)，再依据家族中毒素的半胱氨酸骨架，结合其药理活性，又可分为α、μ、ω、δ、ψ、σ、λ、κ、γ等家族。芋螺毒素能特异性地作用于体内多种(钾、钠、钙等)离子通道、细胞膜上的各种神经递质和激素的受体，从而干扰细胞或神经中的信号传递。因此，在治疗慢性疼痛、急性疼痛、癫痫、神经保护、心血管疾病、精神失常、运动失调、痉挛症、癌症及中风等方面具有广泛的应用前景。
2、在神经型nachrs的各种亚型中，α9α10亚型在生物医药领域备受关注；α9α10烟碱型乙酰胆碱受体是由α9和α10两种亚基组成的跨膜五聚体，是一种配体门控离子通道，该受体最早被发现存在于耳蜗毛细胞中，介导橄榄耳蜗胆碱能纤维和传出神经之间的突触传递，后被证明在白细胞、背根神经节、垂体、皮肤角质细胞和精液中也有分布。研究表明，乙酰胆碱受体中的α9α10亚型可能是治疗慢性疼痛，特别是神经性疼痛的潜在靶点(mcintosh,j.m.；absalom,n.；chebib,m.；elgoyhen,a.b.vincler,m.,a
3、芋螺毒素mr1.1最初发现作用α7nachr(peng,c.,chen,w.,sanders,t.,chew,g.,liu,j.,hawrot,e.and chi,c.(2010)chemical synthesis and characterization oftwoα4/7-conotoxins. acta biochim.biophys.sin.(shanghai)42:745-753)，mr1.1能够特异性作用于老鼠α7nachr，并在体内显示镇痛活性。我们却发现mr1.1及peia针对人α9α10nachr的活性显著优于vc1.1与rgia(专利申请号：202110225081.5)。我们后续针对mr1.1进行了突变体设计，发现在其序列4号位、9号位、10号位进行引入dap突变，可以显著提高活性(专利申请号：202110225081.5)。
4、前期通过非天然氨基酸修饰等手段对α-conotoxins mr1.1进行结构修饰，其中其单类似物mr1.1[s4dap]对α9α10乙酰胆碱受体展示出高活性与高选择性。基于多肽类药物物理化学性质不稳定、分子量大不易透过细胞膜、不能口服等特性，本申请进一步对mr1.1[s4dap]进行结构修饰，以求在保持活性的前提下极大地提高其稳定性。
技术实现思路
1、本申请针对多肽类药物物理化学性质不稳定、分子量大不易透过细胞膜、不能口服等特性，通过对mr1.1[s4dap]进行不同的结构优化，得到了一种具有更好的血浆稳定性的多条，用药稳定性进一步提高，在此技术上完成了本专利技术。
2、第一方面，本专利技术提供一种具有血浆稳定性的活性多肽，所述多肽是通过对mr1.1[s4dap]的结构进行修饰获得，所述修饰包括但不限于亚甲硫缩醛修饰、三氮唑修饰、主链环化修饰、酰胺键修饰、侧链环化和非天然氨基酸修饰；其中：
3、mr1.1[s4dap]的序列为：gccdap本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种具有血浆稳定性的活性多肽，所述多肽是通过对Mr1.1[S4Dap]的结构进行修饰获得，所述修饰包括但不限于亚甲硫缩醛修饰、三氮唑修饰、主链环化修饰、酰胺键修饰、侧链环化和非天然氨基酸修饰；其中：
2.一种多聚体，由两个或多个多肽单体聚合而成，其中至少一个多肽单体为权利要求1所述的具有血浆稳定性的活性多肽；所述多聚体的各多肽单体之间通过共价键连接。
3.一种融合蛋白或缀合物，所述融合蛋白或缀合物含有权利要求1所述的具有血浆稳定性的活性多肽。
4.本专利技术提供一种核酸分子，其编码权利要求1-3所述的活性多肽、多聚体或融合蛋白或缀合物。
5.一种构建体，其特征在于，所述建构体包含权利要求1-3的所述的活性多肽、多聚体或融合蛋白或缀合物的核酸分子。
6.一种宿主细胞，其包含权权利要求4-5的核酸分子和/或构建体，或者所述宿主细胞被权利要求4-5的核酸分子和/或前述的构建体转化或转染。
7.一种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1-6任一项所述的活性多肽、多聚体、融合蛋白或缀合物、核酸分子、构建体、宿主细
8.如权利要求1-7任一项所述的活性多肽、多聚体、融合蛋白或缀合物、核酸分子、构建体、宿主细胞、药物组合物在α9α10nAChR抑制剂中的用途，其中所述α9α10nAChR包括人α9α10nAChR、鼠α9α10nAChR。
9.如权利要求1-7任一项所述的活性多肽、前述多聚体、前述融合蛋白或缀合物、前述核酸分子、前述构建体、前述宿主细胞、前述药物组合物在制备治疗镇痛、抗肿瘤、和/或治疗神经系统疾病中的应用。
10.一种如权利要求1所述的具有血浆稳定性的活性多肽得制备方法，其特征在于，所述活性多肽在线性肽合成的基础上，对线性肽的结构进行修饰获得；所述修饰方法包括但不限于亚甲硫缩醛修饰、三氮唑修饰、主链环化、酰胺键修饰、侧链环化和非天然氨基酸修饰；所述制备方法包括如下步骤：
...【技术特征摘要】
1.一种具有血浆稳定性的活性多肽，所述多肽是通过对mr1.1[s4dap]的结构进行修饰获得，所述修饰包括但不限于亚甲硫缩醛修饰、三氮唑修饰、主链环化修饰、酰胺键修饰、侧链环化和非天然氨基酸修饰；其中：
2.一种多聚体，由两个或多个多肽单体聚合而成，其中至少一个多肽单体为权利要求1所述的具有血浆稳定性的活性多肽；所述多聚体的各多肽单体之间通过共价键连接。
3.一种融合蛋白或缀合物，所述融合蛋白或缀合物含有权利要求1所述的具有血浆稳定性的活性多肽。
4.本发明提供一种核酸分子，其编码权利要求1-3所述的活性多肽、多聚体或融合蛋白或缀合物。
5.一种构建体，其特征在于，所述建构体包含权利要求1-3的所述的活性多肽、多聚体或融合蛋白或缀合物的核酸分子。
6.一种宿主细胞，其包含权权利要求4-5的核酸分子和/或构建体，或者所述宿主细胞被权利要求4-5的核酸分子和/或前述的构建体转化或转染。
7.一...
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