System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种升高IR-HepG2细胞的胰岛素敏感指数的胞内多糖及制备制造技术_技高网

一种升高IR-HepG2细胞的胰岛素敏感指数的胞内多糖及制备制造技术

技术编号:40606782 阅读:3 留言:0更新日期:2024-03-12 22:13
本发明专利技术公开了液体发酵白耙齿菌胞内多糖的制备及其在提高HepG2细胞的胰岛素敏感指数上的应用。所述的白耙齿菌胞内多糖是通过液体发酵白耙齿菌得到菌丝体,将菌丝体冷冻干燥后,超声辅助水提,得提取液,后经醇沉、离心、干燥等步骤得到白耙齿菌胞内多糖。在细胞水平探究白耙齿菌胞内多糖对胰岛素敏感指数的作用,结果显示,在试验浓度范围内,白耙齿菌胞内多糖对HepG2细胞没有细胞毒性作用,白耙齿菌胞内多糖的高剂量组(1mg/mL)、中剂量组(0.5mg/mL)和低剂量组(0.25mg/mL)均具有较为显著的葡萄糖消耗作用,可显著升高IR‑HepG2细胞的葡萄糖消耗和胰岛素敏感指数,显示了白耙齿菌胞内多糖具有较好的升高IR‑HepG2细胞的胰岛素敏感指数和降糖作用。本发明专利技术针对白耙齿菌胞内多糖开展通过升高IR‑HepG2细胞的胰岛素敏感指数相关活性的研究,可为药用真菌多糖的研究与开发提供了实验依据以及理论基础,同时也为从药用真菌中开发提高胰岛素敏感指数的药物及保健品提供新的思路。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药用真菌领域,主要涉及一种可以升高ir-hepg2细胞的胰岛素敏感指数的胞内多糖的制备和应用。


技术介绍

0、技术背景

1、糖尿病是由于机体胰岛素分泌相对不足或绝对不足而引起机体糖、脂肪、蛋白质代谢紊乱,并以持续高血糖为典型特征的一种综合症,主要为:1型糖尿病(t1dm)、2型糖尿病(t2dm)。t2dm常合并糖脂代谢紊乱、胰岛β细胞功能受损、胰岛素抵抗、胰岛素敏感指数降低等并发症的发生风险。为控制t2dm病发展,保障患者的生命安全,需改变机体的高血糖状态,减轻胰岛β细胞功能受损及胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感指数。

2、众多流行病学证据证明糖尿病与胰岛素抵抗有关。人们普遍认为胰岛素抵抗(ir)是t2dm的主要发病机制之一,胰岛素抵抗与t2dm关联性十分恒定。ir是指胰岛素受体(insr)对胰岛素(ins)的敏感性降低,导致机体对葡萄糖的摄取和利用的能力降低,致使葡萄糖大量堆积在血液或内脏中,使机体出现高血糖现象。t2dm需增强胰岛β细胞分泌胰岛素的能力,伴随疾病的进一步发展,胰岛β细胞的功能下降至不能代偿ir,胰岛素处于长期缺乏的状态,造成t2dm病情加重。因此,改善胰岛素敏感性是治疗t2dm的方法之一。目前临床上常用的胰岛素增敏剂主要是吡格列酮和罗格列酮,但是此类药物经常会导致体重增加,早期产品曲格列酮被报道曾引起致死性肝损伤,尽管目前使用的吡格列酮和罗格列酮尚无肝毒性的临床证据,谨慎起见在使用此类胰岛素增敏剂后仍需定期检查肝功能。白耙齿菌多糖已被许多学者证实具有抗炎、抗菌、利尿、具有抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用,可用于治疗肾小球肾炎等作用,并已开发成益肾康胶囊,用于治疗慢性肾炎。药用真菌富含多种活性成分,其中多糖为主要的天然活性成分之一,对白耙齿菌胞内多糖开展通过升高hepg2细胞的胰岛素敏感指数相关活性的研究,可为药用真菌多糖的研究与开发提供了实验依据以及理论基础,同时也为从药用真菌中开发提高胰岛素敏感指数的药物及保健品提供新的思路。


技术实现思路

1、本专利技术针对现存技术问题,提出一种具有升高ir-hepg2细胞的胰岛素敏感指数活性的白耙齿菌胞内多糖。

2、为了实现本专利技术目的,采用的技术方案如下:

3、白耙齿菌胞内多糖在制备升高胰岛素敏感指数药物或保健品中的应用。

4、优选地,所述白耙齿菌胞内多糖可用于制备胰岛素增敏药物或保健品。

5、优选地,所述白耙齿菌胞内多糖可用于制备具备增加葡萄糖消耗量功能药物或保健品。

6、优选地,所述白耙齿菌液体发酵方法包括如下:将白耙齿菌用液体pda培养基作为种子液,按照10%接种量将种子液倒入液体真菌培养基里,在摇床上以150r/min转速、28-32℃环境温度摇菌培养12-15天。根据本专利技术的一种具体实例,其白耙齿菌可按照如下方法发酵培养:

7、(1)白耙齿菌以母种在pda液体培养基培养得到种子液;

8、(2)种子瓶发酵培养:在温度28℃-32℃,空气湿度50%-70%,转速150r/min条件下发酵4-6天;

9、(3)真菌发酵培养基:按照每升培养基含20g麦芽粉、10g味精、0.5gkh2po4、0.3gmgso4·7h2o、10g葡萄糖、3g酵母膏、1g玉米粉、20g甘露醇,装液量400ml/l;

10、(4)将(2)中的种子液在超净台无菌条件下按10%接种量接种到真菌液体培养基的发酵瓶中;

11、(5)发酵瓶发酵生产培养:在温度28℃-32℃,空气湿度50%-70%,转速150r/min条件下发酵12-15天,得到白耙齿菌的菌丝体;

12、(6)将(5)中菌丝体与发酵液过滤,取菌丝体再经过冻干、粉碎、过筛,用于后续提取胞内多糖。

13、优选地,所述白耙齿菌胞内多糖的制备方法包括如下:将白耙齿菌干燥粉碎后用体积分数为95%的乙醇浸提2次后干燥,再取干燥滤渣用热水提取回流2次后取滤液浓缩除杂,加4倍体积无水乙醇醇沉收集沉淀物浓缩。根据本专利技术的一种具体实例,其白耙齿菌胞内多糖可按照如下方法制备:

14、(1)取发酵得到的白耙齿菌,干燥粉碎后加入体积分数为95%乙醇浸泡提取2次,每次浸泡12小时,过滤,保留滤渣。

15、(2)将步骤(1)所得的滤渣烘干加入纯水超声破壁15min,并热水回流提取,提取时间3小时,过滤,重复上述提取步骤两次,纯水加入量均为菌粉质量50倍量,收集合并滤液,弃滤渣。所得滤液于55℃旋蒸浓缩至四分之一,加3%三氯乙酸溶液中4℃过夜后离心,上清液加4倍体积无水乙醇醇沉,边加边搅拌,静置过夜,获得沉淀物,干燥沉淀物。

16、本专利技术的有益之处是:

17、(1)本专利技术研究确定了白耙齿菌胞内多糖具有升高胰岛素敏感指数、增加葡萄糖消耗的作用,具有制备胰岛素增敏药物的成药潜力,具有潜在且巨大的社会效益和经济效益。

18、(2)白耙齿菌胞内多糖的成分无细胞毒性,安全可控,具有较高的实际应用价值。

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【技术保护点】

1.一种升高IR-HepG2细胞的胰岛素敏感指数的白耙齿菌胞内多糖及其制备。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌胞内多糖用于制备促进葡萄糖消耗量的药物或保健品。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌胞内多糖用于制备提高胰岛素敏感指数的药物或保健品。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌发酵用液体PDA培养基作为种子液,按照10%接种量将种子液倒入液体真菌培养基里,在28-32℃,以150r/min转速在摇床摇菌培养12-15天。

5.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌胞内多糖的制备方法包括如下:将白耙齿菌干燥粉碎后用体积分数为95%的乙醇浸提2次后干燥,再取干燥滤渣用超声辅助热水回流提取2次后,过滤,滤液浓缩后,加3%三氯乙酸溶液,于4℃过夜除蛋白后,加4倍体积无水乙醇醇沉,收集沉淀物,浓缩即得。

【技术特征摘要】

1.一种升高ir-hepg2细胞的胰岛素敏感指数的白耙齿菌胞内多糖及其制备。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌胞内多糖用于制备促进葡萄糖消耗量的药物或保健品。

3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌胞内多糖用于制备提高胰岛素敏感指数的药物或保健品。

4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述白耙齿菌发酵用液体pda培养基作为种子液,按...

【专利技术属性】
技术研发人员:杨立芳吴金城刘洪存严静章唐桀孔超男
申请(专利权)人:广西民族大学
类型:发明
国别省市:

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