【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术与生物医药领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽及其编码核酸、与非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽特异性结合的单克隆抗体，以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
技术介绍
1、非洲猪瘟(asf)是由非洲猪瘟病毒(asfv)引起的出血性疾病，感染后能引起家猪和野猪高烧、心跳加快、皮肤发绀和出血性病变等临床症状。该病具有极强的传染性和近100％的致死率。自1921年在肯尼亚首次发现非洲猪瘟病毒以来，它已蔓延到大多数撒哈拉以南的非洲国家。2018年，我国辽宁省首次发现asf，随后便在各地急剧传播，给养猪业带来了毁灭性的打击，造成了巨大的经济损失。迄今为止，非洲猪瘟病毒已蔓延到其他亚洲国家，包括越南、柬埔寨、蒙古、缅甸、老挝、菲律宾、朝鲜和韩国。
2、asfv是一种有包膜的双链dna病毒，病毒粒子由五层结构组成，分别是核样、核壳、内膜、二十面体衣壳和外膜。asfv的基因组长度范围为170-193kb，具体取决于分离株，编码150-167种参与病毒复制、转录和发病机制的蛋白质。迄今为止，由于asfv结构的复杂性以及对asfv保护性免疫机制的认知有限，尚未成功开发出有效的疫苗或抗病毒药物。
3、目前，亚单位疫苗(也称为组分疫苗)是极具开发潜力的一种疫苗，通常是用纯化的重组蛋白或筛选出的具有免疫活性的特定表位的重组蛋白制成。对于asfv，重组蛋白p30、p54和p72等是开发亚单位疫
4、研究表明，asfv的一些非结构蛋白参与调控宿主细胞的抗病毒免疫反应，在asfv感染和复制过程中也发挥着重要作用。已有研究报道，asfv编码的一种非结构蛋白pb602l能作为主要衣壳蛋白p72的伴侣，具有良好的抗原性，在猪接种后十天就能检测到pb602l蛋白抗体(dpi)。所以，对asfv未知功能的非结构蛋白(如pb25r蛋白)的抗原性进行研究鉴定也存在一定的必要性，可能为asfv表位疫苗的开发提供材料基础。
技术实现思路
1、本专利技术主要解决的技术问题是提供一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽，其作为免疫原能激活免疫动物的体液免疫和细胞免疫。
2、其次，本专利技术提供一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽及其编码核酸在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
3、再次，本专利技术提供一种与非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位特异性结合的单克隆抗体、以及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。
4、最后，本专利技术提供一种抗非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的单克隆抗体或杂交瘤细胞株在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
5、为解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
6、一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽，所述非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽包含如seq id no：1所示的氨基酸序列。
7、本专利技术提供的非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位为b细胞线性表位，最小抗原表位位于非洲猪瘟病毒pb125r蛋白第52-62位氨基酸(即52-dplasqrdiyy-62)，其中关键氨基酸为d52、y62、q57和r58。经小鼠模型实验验证该抗原表位具有免疫活性，且在不同的非洲猪瘟病毒毒株中高度保守。
8、一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽的编码核酸。
9、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述编码核酸为dna或rna，在不改变编码氨基酸序列的前提下，可以根据密码子的偏好性进行修饰改造。
10、一种包含非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
11、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述生物材料包括但不限于重组表达载体(如质粒载体、病毒载体)、基因表达盒、重组菌、宿主细胞(如原核细胞、真核细胞)。
12、一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸、生物材料的应用，所述应用包括以下任一种或多种：
13、(1)在制备预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物中的应用；
14、(2)在制备检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂中的应用。
15、一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物，所述药物包含以下一种或多种有效成分：
16、(1)非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽；
17、(2)非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽的编码核酸；
18、(3)包含非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽或其编码核酸的生物材料。
19、作为本专利技术一种优选的实施方案，，所述药物为预防和/或治疗性疫苗。具体的，所述疫苗可以为核酸疫苗，其中包含非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽的编码核酸，如dna疫苗、rna疫苗。所述疫苗也可以为多肽疫苗、重组蛋白疫苗或合成长肽疫苗，其中包含非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽。
20、作为本专利技术一种优选的实施方案，所述疫苗还可以包含免疫调节剂或佐剂，包括但不限于聚-iclc(poly-iclc)、1018iss、amplivax、mf59、as03、as04、as15、bcg、cp-870、cp-893、cpg7909、cyaa、环二核苷酸(如sting)、dslim、gm-csf、il-2、ic30、ic31。
21、一种检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，所述试剂可以为免疫检测和/或诊断试剂，试剂中包含非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽，可用于检测非洲猪瘟病毒感染后产生的能够特异性识别并结合pb125r蛋白的抗原表位肽的抗体。所述试剂也可以为分子检测和/或诊断试剂，试剂中包含检测非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽的编码核酸的引物、探针、分子信标等，所述引物、探针、分子信标根据上述本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种非洲猪瘟病毒pB125R蛋白的抗原表位肽，其特征在于：所述非洲猪瘟病毒pB125R蛋白的抗原表位肽包含如SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
5.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、或者检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种有效成分：
6.一种抗非洲猪瘟病毒pB125R蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为CCTCC NO：C2023251的杂交瘤细胞株ASFV-pB125R-9G11(Hybridoma cell line ASFV-pB125R-9G11)分泌产生。
7.一种用于制备如权利要求6所述的单克隆抗体的杂
8.一种如权利要求6所述的单克隆抗体、或者如权利要求7所述的杂交瘤细胞株的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
9.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物，其特征在于：所述药物包含以下一种或多种有效成分：
10.一种检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述试剂为免疫检测和/或诊断试剂，包含以下一种或多种有效成分：
...【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽，其特征在于：所述非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的抗原表位肽包含如seq id no：1所示的氨基酸序列。
2.一种如权利要求1所述的抗原表位肽的编码核酸。
3.一种包含如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸的生物材料。
4.一种如权利要求1所述的抗原表位肽、或者如权利要求2所述的编码核酸、或者如权利要求3所述的生物材料的应用，其特征在于：所述应用包括以下任一种或多种：
5.一种预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染的药物、或者检测和/或诊断非洲猪瘟病毒感染的试剂，其特征在于：所述药物或试剂包含以下一种或多种有效成分：
6.一种抗非洲猪瘟病毒pb125r蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体由保藏在中国典型培养物保藏中心、保藏编号为cctcc no：c2023251的杂交瘤细...
【专利技术属性】
技术研发人员：韩世充，张改平，赵燕燕，何文瑞，万博，任豪杰，胡曼，林志钊，张雨杭，
申请(专利权)人：河南农业大学，
类型：发明
国别省市：
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