一种重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法及其应用技术

本发明专利技术公开一种重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法及其应用，包括以下步骤收集蛋白质原液；蛋白质原液经免疫亲和层析，洗脱杂质；免疫亲和层析后的溶液经阴离子交换层析，去除毒素；阴离子交换层析后的溶液经分子筛，得纳米颗粒抗原。本发明专利技术的技术方案能够通过免疫亲和层析、阴离子交换层析和分子筛等技术步骤，可以高效地去除杂质和微量污染物，从而获得高纯度的重组犬瘟热病毒疫苗蛋白；纯化过程中的甘油和缓冲液的选择可以提高蛋白质的稳定性，并保持其抗原功能的完整性，确保疫苗的有效性和免疫效果，从而满足兽用疫苗的标准要求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法及其应用。

技术介绍

1、犬瘟热病毒属单链负链rna病毒，其基因组容易发生变异，并且缺乏内切修复机制，因此犬瘟热病毒的遗传变异速度相对较快。目前，犬瘟热疫苗的生产通常依托于犬瘟热病毒在细胞的复制和增殖，分为减毒疫苗和灭活疫苗。但犬瘟热病毒的变异可能产生免疫逃逸突变体，使得原来的疫苗效力降低。相对来说，以保守的抗原肽作为疫苗成分的表位疫苗在对抗易变异的犬瘟热病毒方面具有一定的优势。

2、表位疫苗不需要真核细胞中复杂的修饰和调控，属于较为简单的基因表达。因此，在犬瘟热疫苗的制造过程中，选择高通量、低成本的原核表达系统具有优势。2022年，bowang等研究人员在大肠杆菌中表达了基于犬瘟热病毒血凝素的表位纳米颗粒，这些纳米颗粒能够有效诱导抗犬瘟热病毒的中和抗体和细胞免疫(wang b,li s,qiao y,et al.self-assembling ferritin nanoparticles coupled with linear sequences from caninediste本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述收集蛋白质原液的步骤包括：

3.根据权利要求2所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述蛋白质原液经免疫亲和层析，洗脱杂质的步骤包括：

4.根据权利要求3所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述平衡液1包括0.02M PB缓冲液，5％～20％甘油，平衡液1的pH值为7.5～8.5；

5.根据权利要求1所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述免疫亲和层析后的溶液经阴离子交换层...

【技术特征摘要】

1.一种重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述收集蛋白质原液的步骤包括：

3.根据权利要求2所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述蛋白质原液经免疫亲和层析，洗脱杂质的步骤包括：

4.根据权利要求3所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述平衡液1包括0.02m pb缓冲液，5％～20％甘油，平衡液1的ph值为7.5～8.5；

5.根据权利要求1所述的重组犬瘟热病毒疫苗的纯化方法，其特征在于，所述免疫亲和层析后的溶液经阴...

【专利技术属性】
技术研发人员：王猛，魏彦刚，
申请(专利权)人：中山迈托姆生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：