【技术实现步骤摘要】
本专利技术实施例涉及天然物提取，具体涉及一种基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法。
技术介绍
1、目前关于艾蒿多糖(artemisia argyi polysaccharide,aap)的提取方法主要有水提法、醇提法、水蒸汽蒸馏法、超声和微波辅助提取法等。其中传统水提法具有提取率低，能耗大等缺点；醇提法虽易于实现工业化生产，但提取物中杂质较多；水蒸汽蒸馏法具有便于分离的优点，但缺点也明显：挥发油与水发生水和反应使其产生异味，添加后容易导致饲料适口性变差，不利于饲喂动物，此外，除水仪价格昂贵，且无法降低处理高生物需氧量废水的成本；超声波辅助法可以缩短提取时间并提高提取率，然而目前常用的超声仪容量稍显不足；微波辅助法虽然对特定植物成分具有较高提取率，但对植物的细胞结构影响较大易造成溶剂残留，此外，微波设备价格昂贵，不易于实现工业化生产。而酶提醇沉法是一种低温提取的方法，具有提取条件最温和，反应速度快等优势，并且酶提醇沉法可以降低体系中的活化能，同时通过酶解破坏细胞结构，促进多糖的释放从而提高多糖的提取率。
技术实现思路
1、为此，本专利技术实施例提供一种基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法。
2、为了实现上述目的，本专利技术实施例提供如下技术方案：
3、一种基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，所述方法包括如下步骤：
4、(1)将艾蒿粉末、纤维素酶和蒸馏水混合，用保鲜膜封口后，在恒温摇床中培养，以液料比、酶解
5、(2)以液料比、酶解时间、酶解温度为自变量，以艾蒿提取率为响应值进行三因素三水平的box-behnken实验设计；
6、(3)对步骤(2)的试验数据进行回归拟合分析，建立拟合模型，根据design expert软件分析，确定最佳工艺参数。
7、进一步地，其特征在于，步骤(2)中，液料比为25～35：1，酶解时间为2～4h，酶解温度为45～55℃。
8、进一步地，所述拟合模型的二次方程为：
9、y＝13.86+0.49a+0.12b+0.78c+0.027ab-0.083ac-0.083bc-1.02a2-0.45b2-
10、1.76c2；其中，y为艾蒿多糖提取率，a为液料比、b为酶活时间、c为酶解温度。
11、进一步地，所述最佳工艺参数为：液料比35:1，酶解时间4h，酶解温度55℃。
12、进一步地，所述艾蒿粉末的制备方法如下：收取艾蒿的地上部分，剔除杂草，于室内阴干后粉碎为絮状，使用石油醚在索氏提取器中脱脂12h后，晾干备用。
13、进一步地，所述纤维素酶与艾蒿粉末的质量比为1:10。
14、进一步地，所述方法还包括：培养结束后取出再置于70℃恒温水浴锅中1h，对酶进行灭活。
15、进一步地，所述方法还包括：对酶进行灭活后，冷却至室温，使用抽滤瓶进行抽滤，取滤液，弃去残渣，将滤液置入旋转蒸发仪中，以70℃温度将滤液蒸发浓缩至原体积的1/5，向浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，置入4℃冰箱中醇沉24h，醇沉后再次抽滤，所得沉淀置入冻干机冷冻干燥48h后，即为艾蒿多糖。
16、本专利技术实施例具有如下优点：
17、1)酶提法优点：植物细胞的细胞壁主要构成成分为纤维素，采用纤维素酶法提取艾蒿中的活性多糖，可以使植物细胞壁水解，从而使其中的活性成分得到充分释放，更易于溶解与提取。此方法与传统水提法相比，能够有效提高多糖的提取率。
18、2)响应面法优点：常用的优化方法有正交设计法与响应面法，正交设计选取的代表点通常无法全面地反应整体情况，具有局限性。响应面法能够对数据进行多项式拟合，结合design-expert软件给出清晰直观的等高线图与三维立体图，更便于分析不同因素之间的交互作用，得出提取多糖的最佳条件。
19、本专利技术采用响应面法对艾蒿多糖的提取条件进行优化，以期获得最佳提取工艺。以液料比、酶解温度和酶解时间三个因素进行响应面实验，以艾蒿多糖提取率为响应值，使用design-expertv8.0.6软件进行分析，所得最佳提取条件为液料比35:1(ml/g)，酶解温度55℃，酶解时间4h。
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1.一种基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，步骤(2)中，液料比为25～35：1，酶解时间为2～4h，酶解温度为45～55℃。
3.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述拟合模型的二次方程为：
4.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述最佳工艺参数为：液料比35:1，酶解时间4h，酶解温度55℃。
5.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述艾蒿粉末的制备方法如下：
6.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述纤维素酶与艾蒿粉末的质量比为1:10。
7.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述方法还包括：培养结束后取出再置于70℃恒
8.根据权利要求7所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述方法还包括：对酶进行灭活后，冷却至室温，使用抽滤瓶进行抽滤，取滤液，弃去残渣，将滤液置入旋转蒸发仪中，以70℃温度将滤液蒸发浓缩至原体积的1/5，向浓缩液中加入4倍体积的无水乙醇，置入4℃冰箱中醇沉24h，醇沉后再次抽滤，所得沉淀置入冻干机冷冻干燥48h后，即为艾蒿多糖。
...【技术特征摘要】
1.一种基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，步骤(2)中，液料比为25～35：1，酶解时间为2～4h，酶解温度为45～55℃。
3.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述拟合模型的二次方程为：
4.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述最佳工艺参数为：液料比35:1，酶解时间4h，酶解温度55℃。
5.根据权利要求1所述的基于响应面分析法优化酶解醇沉提取艾蒿多糖工艺的方法，其特征在于，所述艾蒿粉末的制备方法如下...
【专利技术属性】
技术研发人员：金晓，邢仲耘，张学凯，韩志鹏，史彬林，李昕桐，李佳莹，田逸飞，周涵琼，韩笑，徐元庆，邢媛媛，红雷，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：
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