【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析和肽纯化分离领域，特别是一种纯化奥曲肽的方法。
技术介绍
1、奥曲肽（octreotide）是人工合成的天然生长抑素的八肽衍生物，分子序列为d-phe-cys-phe-d-trp-lys-thr-cys-thr-ol，其药理作用与生长抑素相似，但作用持续时间更长。
2、该药物最早于1988年在美国上市，用于治疗胃肠道分泌类肿瘤和垂体肿瘤。本品具有多种生理活性，如抑制生长激素、促甲状腺素；对胃酸、胰酶、胰高血糖素和胰岛素的分泌有抑制作用；能降低胃的运动和胆囊排空，抑制缩胆囊素-胰酶泌素的分泌，减少胰腺分泌，对胰腺实质细胞膜有直接保护作用；减少内脏血流量，降低门脉压力，减少肠道过度分泌，增加肠道对水和钠的吸收。其结构式如下：
3、。
4、所以，研究高纯度和收率的奥曲肽纯化方法具有重要的意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于解决现有技术的不足，提供一种新的纯化奥曲肽的方法，该方法经过两次hplc纯化，提高了奥曲肽的纯度和收率。
2、本专利技术的目的是通过以下的技术方案来实现的。一种纯化奥曲肽的方法，其特点是，其步骤如下：
3、（1）预处理：称取奥曲肽粗品溶于流动相溶液，充分溶解，过滤待用；
4、（2）一次纯化：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以高氯酸为流动相a，以乙腈为流动相b，进行第一次hplc纯化，去除奥曲肽中的氧化杂质；
5、（3）除去溶剂，得到奥曲肽第一步样品溶液
6、（4）二次纯化：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸盐溶液为流动相a；以乙腈为流动相b，进行第二次hplc纯化，去除与奥曲肽理化性能相近的杂质；
7、（5）除去溶剂，得到奥曲肽样品溶液；
8、（6）转盐：以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以醋酸为流动相a，以乙腈为流动相b，进行转盐，得到只含醋酸盐的奥曲肽溶液；
9、（7）除去溶剂，得到奥曲肽成品溶液。
10、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（1）预处理步骤包括：
11、1)将奥曲肽粗品溶于乙腈水溶液和稀氨水溶液中得到奥曲肽粗肽水溶液；
12、2)室温放置10h，取奥曲肽水溶液用滤膜过滤除去不溶性颗粒，收集滤液备用。
13、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（2）一次纯化中：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.1%高氯酸为流动相a，以乙腈为流动相b，检测波长为220nm，进行第一次hplc线性梯度洗脱，梯度：0～40min，流动相b:22％～25％；收取含有奥曲肽样品的馏分；固定相的粒度为10μm；0.1%高氯酸的制备方法为：取1000ml水，加1ml高氯酸，混合均匀，得到0.1%高氯酸。
14、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（3）中，用旋转蒸发器水浴温度在25~30℃，真空度在-0.09mpa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽第一步样品溶液，样品溶液为酸性；用稀氨水将其调至ph 7.5~8。
15、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（4）二次纯化时：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸盐溶液为流动相a，以乙腈为流动相b，检测波长为220nm，进行第二次hplc梯度洗脱，收取含有奥曲肽样品的馏分；所述磷酸盐溶液的制备方法为：取1000ml水加0.0.5%氨水，磷酸调节ph=2.5得到磷酸盐溶液。
16、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（5）中，用旋转蒸发器水浴温度在35℃，真空度在-0.09mpa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽样品溶液，样品溶液为酸性。
17、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（6）转盐时：以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.5%醋酸为流动相a，以乙腈为流动相b，检测波长为220nm，进行转盐线性梯度洗脱，收取含有奥曲肽样品的馏分；之后用稀氨水将其调至ph 7.5~8；固定相的粒度为10μm， 0.5%醋酸酸的制备方法为：取1000ml水，加5ml醋酸，混合均匀，得到0.5%乙酸。
18、本专利技术所述的一种纯化奥曲肽的方法，其进一步优选的技术方案是：步骤（7）中，用旋转蒸发器水浴温度在35℃，真空度在-0.09mpa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽样品溶液，样品溶液为酸性。
19、与现有技术相比，本专利技术的有益之处在于：
20、本专利技术方法经过两次纯化，可以除去样品中跟奥曲肽理化性能相近的杂质，可一次收到纯度为99%以上的样品；提高了奥曲肽成品纯度和收率。
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1.一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，其步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（1）预处理步骤包括：
3.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（2）一次纯化中：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.1%高氯酸为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为220nm，进行第一次HPLC线性梯度洗脱，梯度：0～40min，流动相B:22％～25％；收取含有奥曲肽样品的馏分；固定相的粒度为10μm；0.1%高氯酸的制备方法为：取1000ml水，加1ml高氯酸，混合均匀，得到0.1%高氯酸。
4.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（3）中，用旋转蒸发器水浴温度在25~30℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽第一步样品溶液，样品溶液为酸性；用稀氨水将其调至pH 7.5~8。
5.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（4）二次纯化时：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸盐溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为22
6.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（5）中，用旋转蒸发器水浴温度在35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽样品溶液，样品溶液为酸性。
7.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（6）转盐时：以八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.5%醋酸为流动相A，以乙腈为流动相B，检测波长为220nm，进行转盐线性梯度洗脱，收取含有奥曲肽样品的馏分；之后用稀氨水将其调至pH7.5~8；固定相的粒度为10μm， 0.5%醋酸酸的制备方法为：取1000ml水，加5ml醋酸，混合均匀，得到0.5%乙酸。
8.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（7）中，用旋转蒸发器水浴温度在35℃，真空度在-0.09MPa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽样品溶液，样品溶液为酸性。
...【技术特征摘要】
1.一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，其步骤如下：
2.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（1）预处理步骤包括：
3.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（2）一次纯化中：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以0.1%高氯酸为流动相a，以乙腈为流动相b，检测波长为220nm，进行第一次hplc线性梯度洗脱，梯度：0～40min，流动相b:22％～25％；收取含有奥曲肽样品的馏分；固定相的粒度为10μm；0.1%高氯酸的制备方法为：取1000ml水，加1ml高氯酸，混合均匀，得到0.1%高氯酸。
4.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（3）中，用旋转蒸发器水浴温度在25~30℃，真空度在-0.09mpa以下除去部分乙腈，得到奥曲肽第一步样品溶液，样品溶液为酸性；用稀氨水将其调至ph 7.5~8。
5.根据权利要求1所述的一种纯化奥曲肽的方法，其特征在于，步骤（4）二次纯化时：以十八烷基硅烷键合硅胶填料为固定相，以磷酸盐溶液为流动相a，以乙...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨天赐，
申请(专利权)人：江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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