一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法。本发明专利技术用于检测日本血吸虫地域株的上游引物核苷酸序列如ＳＥＱ?ＩＤ?ＮＯ：１所示，下游引物核苷酸序列如ＳＥＱ?ＩＤ?ＮＯ：２所示。本发明专利技术引物用于检测日本血吸虫地域株时，是用上述引物对待测模板ＤＮＡ进行ＣＡＰＳ－ＰＣＲ扩增，并对扩增产物进行ＣＡＰＳ酶切反应，将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外光下观察，阳性结果呈现未被酶切的单带，阴性结果呈现完全酶切的双带。本发明专利技术建立了用于日本血吸虫地域株鉴别的快速、特异、敏感的ＣＡＰＳ方法，可准确鉴定日本血吸虫地域株。含有本发明专利技术引物的试剂盒操作简单程序化，方法特异性强，敏感度高，结果判定客观，适合推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及血吸虫的检验检测领域，具体涉及一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物、包含该引物的试剂盒及检测方法。
技术介绍
日本血吸虫病是世界卫生组织确定的六大重点热带病之一，也是我国三种重大人类疾病之一，具有重要公共卫生及社会经济学意义。在我国，目前该病主要在江苏、安徽、江西、湖北、湖南、云南和四川7个省份流行，有约5000万人受到威胁，约80万人和超过10万头牛受到感染。近年来，由于一些控制血吸虫措施的废弃及洪水、南水北调等引起的环境变化，使得该病在一些地区又有所抬头，给该病的防控带来新的挑战。由于自然环境长期阻隔，我国各地日本血吸虫分离株虽然存在不同程度的遗传变异，但环境的变化及中间宿主钉螺的迁徙，造成了不同地区分离株的变异呈现不规律性。因而，有效鉴定地域株及监测血吸虫病的发生、发展规律，寻找血吸虫不同类型以及与流行区地理位置相关的分子标记，并建立我国日本血吸虫溯源分析方法，将为个体发病、地区性暴发、阻断区重新流行及国外带虫者带入等的病原溯源，以及我国日本血吸虫病的流行趋势预测、疾病预测、疾病预警和防控等提供理论资料。
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有检测日本血吸虫中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物，其特征在于上游引物核苷酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１所示，下游引物核苷酸序列如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２所示。

【技术特征摘要】
1.一种用于检测日本血吸虫云南地理株的引物，其特征在于上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。2.一种试剂盒，其特征在于包含权利要求1所述的用于检测日本血吸虫云南地理株的引物。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包含如下组分：(1)DNA裂解液：核裂解液、EDTA、蛋白酶K和RNase A溶液的混合溶液；(2)CAPS-PCR反应液：dATP、dTTP、dGTP、dCTP、上游引物、下游引物和MgCl2的混合溶液；(3)CAPS反应液：限制性内切酶Nde I和10×H缓冲液；(4)日本血吸虫云南地理株DNA阳性对照和其他地区日本血吸虫阴性对照。4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包含Taq DNA聚合酶。5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括如下组分：(1)DNA裂解液，27.5mL：为100个反应的200μL核裂解液、50μl pH 8.0的0.5mol/L的EDTA、20μl蛋白酶K和5μL RNase A溶液的混合溶液；(2)CAPS-PCR反应液，2.5mL：为终浓度200μmol/L的dATP、dTTP、dGTP、dCTP，终浓度0.2pmol/μL的上游引物和下游引物，2mmol/L的MgCl2的混合溶液；(3)CAPS反应液，1.0mL：包含1U/μL、100μL的限制性内切酶Nde I和10×H缓冲液100μL；(4)日本血吸虫云南地理株DNA阳性对照100μL和其他地理株DNA阴性对照100μL；(5)Taq DNA聚合...

【专利技术属性】
技术研发人员：李娟，林瑞庆，赵光辉，邹丰才，宋慧群，袁子国，朱兴全，陈芳，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]