【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及几种抗骨质疏松肽及其制备方法与应用。
技术介绍
1、骨质疏松症(osteoporosis，op)是一种全身性骨量减少、骨显微结构退变，并伴有骨脆性增加、骨强度下降、易发生骨折的疾病，其主要临床表现为胸背部和下腰部骨骼疼痛、畸形及骨折。随着人口老龄化的加速，骨质疏松症已成为我国乃至世界面临的重要公共健康问题。目前常用的雌激素替代疗法、特立帕肽等药物在防治骨质疏松症方面均表现出一定的副作用，而接受度较高的联合维生素d补钙法对部分人来说效果欠佳，且过量补充还会增加结石、心血管疾病的风险。
2、鹿皮胶具有强筋健骨功效，其含有大量的胶原蛋白，而胶原蛋白是骨骼中含量最多的蛋白质，已有大量研究表明胶原肽可以改善骨代谢，且具有来源广、生物利用度高、安全无副作用等优点，是预防骨质疏松症的良好天然食源性成分。从鹿皮胶中寻找能够预防和/或治疗骨质疏松症的有效成分是迫切需要解决的问题。
技术实现思路
1、专利技术目的：为克服现有技术中存在的问题，本专利技术通过大量实验筛选，优选出抗骨质疏松的多肽及其制备方法。
2、本专利技术的技术方案为：
3、具有抗骨质疏松活性的多肽，所述多肽如序列seq1的氨基酸序列分别为：
4、p2：gap(+15.99)gdrgep(+15.99)gpp(+15.99)gpagf；
5、p3：gsagpp(+15.99)gatgfp(+15.99)gaagr；
6、p4：sgdr
7、p6：gqagvmgfp(+15.99)gpk。
8、本专利技术所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，包括以下步骤：
9、(1)以鹿皮胶为原料，所述原料经水浴加热烊化，调ph至7～8.0，配制获得鹿皮胶蛋白水溶液；
10、(2)向鹿皮胶蛋白液中加入胰蛋白酶，搅拌恒温酶解，获得酶解反应产物；
11、(3)酶解结束后，对步骤(2)获得的酶解反应产物进行高温灭酶，获得鹿皮胶抗骨质疏松酶解液；
12、(4)将步骤(3)得到的酶解液通过固相萃取柱进行分离，分别以纯水，不同浓度乙腈依次进行洗脱；收集洗脱液，浓缩得到抗骨质疏松活性的多肽。
13、作为优选方案，以上所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，包括以下步骤：
14、(1)以鹿皮胶为原料，所述原料经水浴加热烊化，调ph至8.0，配制获得鹿皮胶蛋白水溶液；
15、(2)向鹿皮胶蛋白液中加入5％的5000u/g的胰蛋白酶，在温度为37℃和ph为8.0条件下搅拌恒温酶解2h，获得酶解反应产物；
16、(3)酶解结束后，对步骤(2)获得的酶解反应产物进行高温灭酶，高温灭酶温度为95～105℃，时间为10～20min，获得鹿皮胶抗骨质疏松酶解液；
17、(4)将步骤(3)得到的酶解液通过固相萃取柱进行分离，分别以纯水，不同浓度5％、10％、15％、20％、40％、80％的乙腈依次进行洗脱；收集10％和15％乙腈洗脱液，浓缩得到抗骨质疏松活性的多肽。
18、本专利技术所述的多肽在制备治疗骨质疏松和/或进行骨修复的药物、食品或保健品中中的应用。特别优选多肽浓度为20μg/ml；
19、一种抗骨质疏松活性的药物，它包括以上序列表seq1中的一条或多条多肽。
20、有益效果：
21、(1)本专利技术所述制备方法所用原料为鹿皮胶，资源较为丰富。
22、(2)本专利技术所述制备方法采用胰蛋白酶对鹿皮胶进行酶解，酶解效果较好，能有效地将鹿皮胶蛋白酶解呈具促骨形成作用的多肽。
23、(3)本专利技术所述鹿皮胶促骨形成多肽食用安全性高，在体内具有较强的促骨形成作用。
24、(4)本专利技术所述鹿皮胶促骨形成肽可应用于食品工业、制药工业、饲料工业等，具有重要的经济价值。
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1.具有抗骨质疏松活性的多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列分别为：
2.权利要求1所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.权利要求1中的一条或多条多肽在制备治疗骨质疏松和/或进行骨修复的药物、食品或保健品中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述多肽浓度为20μg/mL。
6.一种抗骨质疏松活性的药物，其特征在于：它包括权利要求1所述的多肽。
【技术特征摘要】
1.具有抗骨质疏松活性的多肽，其特征在于：所述多肽的氨基酸序列分别为：
2.权利要求1所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的具有抗骨质疏松活性的多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
...【专利技术属性】
技术研发人员：华永庆，毛洪运，刘睿，郑云枫，
申请(专利权)人：南京中医药大学，
类型：发明
国别省市：
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