【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物药物，具体涉及一种新型的抗体药物偶联物制备方法。
技术介绍
1、目前肿瘤治疗手段主要包括手术、放疗、化疗、靶向治疗及免疫治疗等。而对于中晚期肿瘤患者，化疗仍然是主要治疗手段。但是，传统的化疗药物通常不具备肿瘤靶向性，毒副作用大(zhong l，yang sy et al.sig transduct target ther.2021.6：201)。如果将细胞毒性化疗药物与抗体通过进行偶联，制备成抗体药物偶联物(antibody-drugconjugate，adc)，则可兼具小分子化疗药物的强效杀伤和抗体药物的精准靶向优势，相较于传统化疗药物，具有更好的疗效和更小的毒副作用(chau ch，figg wd.lancet.2019394：793-804)。
2、偶联技术对于adc药物的制备极为关键。早期adc药物多采用非定点偶联技术，导致药物抗体比(drug-to-antibody ratio，dar)不可控，药物一致性差。定点偶联制备的adc药物形式均一，dar可控，是理想的adc药物制备方式。目前普遍采用的定点偶联技术主要包括了酶催化定点偶联，非天然氨基酸定点偶联，化学修饰定点偶联以及糖基修饰定点偶联等，使adc药物的活性、稳定性以及毒副反应取得了明显改善，但是这些定点偶联技术多需要对抗体进行化学修饰或者基因工程化改造，不仅可能会影响抗体的功能，还存在技术难度较大、通用性差等缺点(fu zw，zhang yet al.sig transduct target ther.2022.7：93；wu kl，
3、制备adc药物的抗体类型主要为igg类抗体。为制备igg类adc药物，除将化学药物直接与igg抗体偶联外，还可能利用igg结合结构域(igg-binding domain，igbd)作为载体，先将化学药物偶联到igbd上，再将携带化学药物的igbd与igg混合，在igbd的介导下，使化学药物通过共价或非共价方式偶联到igg上。已有研究选择的igbd对igg抗体的亲和力有限，将携带化学药物的igbd与igg混和后，igbd不能介导化学药物与抗体形成稳定的adc，需要在igbd中引入非天然氨基酸、酶促基团、光促基团等特殊基团或使用交联剂，仍然存在较大的技术难度和较高的成本(matsuda y.et al.molecular pharmaceutics.2021.18：4058-4066；wu kl，xiao h et al.bioconjug chem.202132：1947-1959；lee t，chungsj.org lett.2020.22：8419-8423.)。如果能筛选出高亲和力的igbd，将化学药物与其偶联后，只需将其与igg抗体简单混合即可获得稳定的adc药物。相比于共价偶联，该制备过程更简单快速。而且，若筛选到的igbd能结合不同种类的igg，将携带化学药物的igbd与不同的igg抗体混合，即可快速制备出针对不同靶标的adc，适应于多种疾病的治疗，极具应用前景。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种新型的抗体药物偶联物制备方法。
2、本专利技术提供了一种igg结合结构域，它包括seq id no.2所示的氨基酸序列和seqid no.4所示的氨基酸序列。
3、进一步地，前述的igg结合结构域还包括seq id no.6所示的氨基酸序列。
4、进一步地，前述的igg结合结构域是seq id no.6所示的氨基酸序列连接seq idno.2所示的氨基酸序列和seq id no.4所示的氨基酸序列而得。
5、进一步地，前述的igg结合结构域的氨基酸序列如seq id no.8所示。
6、本专利技术还提供了前述的igg结合结构域在制备抗体药物偶联物中的用途。
7、进一步地，所述抗体药物偶联物的抗体为igg抗体。
8、本专利技术还提供了一种抗体药物偶联物，它是由前述的igg结合结构域连接药物和抗体而得。
9、进一步地，所述抗体为igg抗体；
10、和/或，所述药物为抗肿瘤药物、细胞毒素药物、光敏剂、光热剂、声敏剂、放射性核素。
11、本专利技术还提供了前述的抗体药物偶联物的制备方法，它包括如下步骤：
12、通过固相偶联法将药物偶联到前述的igg结合结构域上，将得到的偶联物与抗体孵育，即得；
13、优选地，所述孵育为室温孵育0.5～1h；
14、和/或，所述偶联物与抗体的摩尔比为1∶1。
15、本专利技术还提供了前述的抗体药物偶联物在制备抗肿瘤药物中的用途。
16、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
17、本专利技术提供了一种igg结合结构域，该igg结合结构域对igg的亲和力高，可以通过fab结合多种igg，且结合后的复合物稳定性好。此外，该igg结合结构域可以与多种药物偶联，然后与igg抗体通过简单混合的方法制备得到抗体药物偶联物。本专利技术igg结合结构域可快速制备出针对不同靶标的adc，适应于多种疾病的治疗，具有良好的应用前景。
18、显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
19、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种IgG结合结构域，其特征在于：它包括SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列和SEQ IDNO.4所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的IgG结合结构域，其特征在于：它还包括SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的IgG结合结构域，其特征在于：它是SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列连接SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列和SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列而得。
4.根据权利要求3所述的IgG结合结构域，其特征在于：它的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。
5.权利要求1～4任一项所述的IgG结合结构域在制备抗体药物偶联物中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：所述抗体药物偶联物的抗体为IgG抗体。
7.一种抗体药物偶联物，其特征在于：它是由权利要求1～4任一项所述的IgG结合结构域连接药物和抗体而得。
8.根据权利要求7所述的抗体药物偶联物，其特征在于：所述抗体为IgG抗体；
9.权利要求7或8所述的抗体药物偶联物
10.权利要求7或8所述的抗体药物偶联物在制备抗肿瘤药物中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种igg结合结构域，其特征在于：它包括seq id no.2所示的氨基酸序列和seq idno.4所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的igg结合结构域，其特征在于：它还包括seq id no.6所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的igg结合结构域，其特征在于：它是seq id no.6所示的氨基酸序列连接seq id no.2所示的氨基酸序列和seq id no.4所示的氨基酸序列而得。
4.根据权利要求3所述的igg结合结构域，其特征在于：它的氨基酸序列如seq id no.8所示。
【专利技术属性】
技术研发人员：陶泽，卢晓风，杨浩，程惊秋，
申请(专利权)人：四川大学华西医院，
类型：发明
国别省市：
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