【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及病理试剂领域，具体涉及一种动物眼球固定液及其制备方法。
技术介绍
1、组织需经过及时有效的固定才能完成包埋及切片。组织固定的作用在于保持组织、细胞的固有形态和结构，防止细菌的腐蚀和组织细胞的自溶，保存细胞内固有的物质，使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止内源性及外源性酶的反应，使细胞或组织基本上保持与生活时的状态一致，还应使组织硬化，便于组织的修切。目前，组织切片主要通过将病理组织包埋在石蜡块中，利用石蜡对于组织固定支撑，以确保制备的病理组织切片结构完整满足研究或教学的需求。
2、眼球的结构精密复杂，眼球壁各层组织软硬程度相差悬殊，且视网膜、脉络膜、巩膜之间连接性差，制作眼球病理切片的时候，石蜡块包埋眼球是比较困难的，这是由于石蜡不容易进入到眼球内部，也就无法形成有效的支撑作用，限制最终的切片工艺实施，容易出现固定不充分、组织变形及丢失的问题。目前，在视网膜疾病术后病理诊断及其模型的研究中，大多采用固定液的方式固定眼球，但由于眼球结构复杂，各层细胞差异较大，软硬程度差距较大，固定液穿透力差，造成眼球壁组织发生收缩，极易导致连接不紧密的视网膜色素上皮层与其余视网膜分离，即产生固定液性视网膜脱离现象。因此，无法使用常规的固定液对眼球进行固定。
3、现有技术公开了一种用于眼球组织的固定液，由房水等渗液、乙酸、甲醛、无水乙醇和纯水组成，能够充分的渗透至眼球组织中，但该方法仍存在固定液渗透至眼球组织中，导致眼球组织体积膨胀或皱缩的问题，且使用该固定液包埋眼球组织在切片前，需要对眼球组织冷冻，去除房水和玻
技术实现思路
1、因此，本专利技术要解决的技术问题在于克服现有技术中的固定液固定眼球后切片染色效果不佳的缺陷，从而提供一种动物眼球固定液及其制备方法，能够保持动物眼球结构的完整性，染色清晰。
2、一方面，本专利技术提供一种动物眼球固定液，包括如下体积份的组分，冰醋酸5－10份；甲醛5－10份；无水乙醇3－10份；氯仿7－20份。
3、优选的，所述冰醋酸7－9份，甲醛6－9份，无水乙醇6－8份，氯仿10－15份。
4、更优选的，所述冰醋酸7份，甲醛9份，无水乙醇6份，氯仿10份。
5、所述冰醋酸的质量浓度为50％－65％。
6、所述甲醛的质量浓度为40－45％。
7、另一方面，本专利技术提供上述动物眼球固定液的制备方法为按照各组分的体积份将各组分混合即可。
8、上述动物眼球固定液或由动物固定液的制备方法制得的动物眼球固定液在动物眼球组织切片制备的应用。
9、所述动物眼球组织切片制备的步骤为，将预处理后的眼球浸泡于所述动物眼球固定液中静置，对浸泡后的眼球切片。
10、所述动物眼球为大鼠眼球。
11、可选的，所述静置的时间为20h以上。
12、可选的，所述预处理的步骤包括采用生理盐水对眼球清洗。
13、本专利技术技术方案，具有如下优点：
14、1.本专利技术提供的动物眼球固定液，包括如下体积份的组分，冰醋酸5－10份；甲醛5－10份；无水乙醇3－10份；氯仿7－20份。无水乙醇具有硬化、脱水和固定的作用，但其组织渗透力较弱，固定速率较慢；冰醋酸对组织穿透速率快，不会造成组织硬化，但其能够使组织膨胀，影响动物眼球的固定效果；甲醛组织穿透力强，具有一定的组织收缩能力；而氯仿不仅具有很强的杀菌能力，能够有效杀灭固定液中的细菌和真菌，从而保证生物样品的清洁度，还具有较强的抗氧化能力，能够阻止样品氧化酵解，延缓样品腐败，而且氯仿可以与样品中的蛋白质发生结合反应，将蛋白质固定在细胞内。本专利技术提供的动物眼球固定液，利用一定比例无水乙醇、冰醋酸、甲醛和氯仿复配的协同增效的作用，不仅克服了乙醇渗透力弱、组织收缩过度的缺陷，能够中和乙醇、甲醛和氯仿对组织的收缩作用，还能抵消冰醋酸对组织的膨胀作用。本专利技术的动物眼球固定液具有极强的穿透力，可以在较短的时间内，使动物眼球固定液均匀的进入眼球壁各层结构，能够有效避免眼球壁皱缩及视网膜脱离，实现固定化的眼球组织完整、细胞间连接紧密。
15、2.本专利技术提供的动物眼球固定液，所述冰醋酸7－9份，甲醛6－9份，无水乙醇6－8份，氯仿10－15份。由于眼球组织结构特殊，眼球壁各层组织软硬程度相差悬殊，且各层次间连接性差，传统的固定液固定的组织在后续脱水过程中易造成眼球变形，球壁各层次结构分离，尤其是视网膜极易脱离。本专利技术提供一种优选的比例，复配得到的动物眼球固定液能够有效的保持眼球的形态，防止视网膜的破碎和脱落，对眼球后续形态学、组织学和病理学的研究有积极而深远的意义。
16、本专利技术采用了少量的无水乙醇作为动物眼球固定液的组分，避免动物眼球固定液中乙醇浓度过高导致组织过度硬化，固定时间过长造成组织收缩明显且质脆的现象。
17、3.本专利技术提供的动物眼球固定液制备方法，将各组分按照一定比例混合即可，步骤简单，可操作性强。
18、4.本专利技术提供的动物眼球固定液或动物眼球固定液的制备方法制得的动物眼球固定液能够应用于眼球组织切片制备，利用本专利技术提供的动物眼球固定液制得的眼球组织切片质量高，染色清楚，组织结构保持完整，没有出现细胞层之间脱落或变形，也没有皱缩，无视网膜脱落，碎裂现象，同时，本专利技术提供的动物眼球固定液中采用了氯仿，利用了氯仿与染色剂的结合能力强，在制备动物眼球结构染色切片与染色剂结合能力强，染色效果好。
19、5.本专利技术提供的动物眼球固定液应用于大鼠眼球。大鼠眼球在固定的操作中，由于需要摘取晶状体，因此，很难做到饱满的切片，本专利技术提供的动物眼球固定液，能够在固定化大鼠眼球后，即使摘取晶状体，仍能保持大鼠眼球结构的完整性。
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1.一种动物眼球固定液，其特征在于，包括如下体积份的组分
2.根据权利要求1所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸7－9份，甲醛6－9份，无水乙醇6－8份，氯仿10－15份。
3.根据权利要求2所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸7份，甲醛9份，无水乙醇6份，氯仿10份。
4.根据权利要求3所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸的质量浓度为50％－65％。
5.根据权利要求4所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述甲醛的质量浓度为40－45％。
6.根据权利要求1－5任一项所述的动物眼球固定液的制备方法，其特征在于，按照各组分的体积份将各组分混合。
7.根据权利要求1－5任一项所述的动物眼球固定液或由权利要求6所述的动物眼球固定液的制备方法制得的动物眼球固定液在动物眼球组织切片制备的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述动物眼球组织切片的制备方法，包括如下步骤，将预处理后的眼球浸泡于所述动物眼球固定液中静置，对浸泡后的眼球切片；和/或，
9.根据权利要
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述预处理的步骤包括采用生理盐水对眼球清洗。
...【技术特征摘要】
1.一种动物眼球固定液，其特征在于，包括如下体积份的组分
2.根据权利要求1所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸7－9份，甲醛6－9份，无水乙醇6－8份，氯仿10－15份。
3.根据权利要求2所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸7份，甲醛9份，无水乙醇6份，氯仿10份。
4.根据权利要求3所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述冰醋酸的质量浓度为50％－65％。
5.根据权利要求4所述的动物眼球固定液，其特征在于，所述甲醛的质量浓度为40－45％。
6.根据权利要求1－5任一项所述的动物眼球固定液...
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