【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物防治领域，特别涉及双链rna作为杀虫增效剂。
技术介绍
1、苏云金芽胞杆菌（bacillus thuringiensis， bt）表达的杀虫蛋白可以有效防治靶标害虫和减少化学农药的使用。然而靶标害虫可以通过一系列防御反应削弱bt蛋白的杀虫活性，因此单一使用杀虫蛋白用来防治靶标害虫的效果有限、并且容易诱导靶标害虫对杀虫蛋白产生抗性。若能筛选获得靶标害虫防御相关基因，并通过使用防御基因的双链rna来抑制防御反应，将有助于极大程度地提高bt杀虫蛋白的杀虫活性，并基于此，可以大大降低bt杀虫蛋白的用量，降低成本，并且可能延缓靶标害虫抗性的产生。然而，目前对于防御基因的研究十分有限，尚未明确对bt杀虫蛋白具有明细防御作用的基因。
技术实现思路
1、本专利技术之一提供了一种沉默靶标昆虫自体snx-20基因表达在提高杀虫蛋白对所述靶标昆虫防治效果中的应用，其中，所述杀虫蛋白为cry蛋白，所述靶标昆虫为鳞翅目（lepidoptera）昆虫中的至少一种。
2、在一个具体实施方式中，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在40%以上。
3、在一个具体实施方式中，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在50%以上。
4、在一个具体实施方式中，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在60%以上。
5、在一个具体实施方式中，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在70%以上。
6、在
7、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为禾草螟属（chilo）昆虫中的至少一种，或灰翅夜蛾属（spodoptera）昆虫中的至少一种。
8、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为二化螟（chilo suppressalis walker）或草地贪夜蛾（spodoptera frugiperda）。
9、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry9aa蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry1fa蛋白。
10、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry9aa3蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry1fa3蛋白。
11、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如genbank no. ade60735.1所示的cry9aa3蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如seq id no. 19所示的cry1fa3蛋白。
12、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如seqid no. 18的cry9aa655蛋白。
13、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsrna中的正义链的序列如seq id no. 1所示或seq id no. 4所示；对于所述夜蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsrna中的正义链的序列如seq idno. 7或seq id no. 10所示。其中，在作为rna时，序列中的t替换为u。
14、本专利技术之二提供了一种联合用药物，其包括用于沉默靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsrna和cry蛋白，所述靶标昆虫为本专利技术之一中任意一项所述的应用中的所述的靶标昆虫；所述cry蛋白为本专利技术之一中任意一项所述的应用中的所述cry蛋白。其中，所述dsrna和所述cry蛋白可以先后施用，也可以同时施用，优选先后施用；优选在施用所述dsrna 48小时后再施用所述cry蛋白。
15、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsrna中的正义链的序列如seq id no. 1或seq id no. 4所示；对于所述夜蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsrna中的正义链的序列如seq id no. 7或seq id no. 10所示。其中，在作为rna时，序列中的t替换为u。
16、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为为鳞翅目（lepidoptera）昆虫中的至少一种。
17、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为螟蛾科（pyralidae）昆虫中的至少一种，或夜蛾科（noctuidae）昆虫中的至少一种。
18、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为禾草螟属（chilo）昆虫中的至少一种，或灰翅夜蛾属（spodoptera）昆虫中的至少一种。
19、在一个具体实施方式中，所述靶标昆虫为二化螟（chilo suppressalis walker）或草地贪夜蛾（spodoptera frugiperda）。
20、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry9aa蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry1fa蛋白。
21、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry9aa3蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry1fa3蛋白。
22、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如genbank no. ade60735.1所示的cry9aa3蛋白；对于所述夜蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如seq id no. 19所示的cry1fa3蛋白。
23、在一个具体实施方式中，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如seqid no. 18的cry9aa655蛋白。
24、本专利技术的有益效果：本专利技术首次发现沉默鳞翅目昆虫自体的snx-20基因的表达可以显著提升cry蛋白对所述鳞翅目昆虫的活性。例如，沉默二化螟cssnx-20基因的表达可以显著提升cry9a蛋白对二化螟的活性；沉默草地贪夜蛾sfsnx-20基因的表达可以显著提升cry1f蛋白对草地贪夜蛾的活性。据此，可以将其dsrna制剂与cry蛋白制剂联合用药，以提高生物源杀虫剂的活性，并延缓害虫对生物源杀虫剂的抗性。
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1.沉默靶标昆虫自体snx-20基因表达在提高杀虫蛋白对所述靶标昆虫防治效果中的应用，其中，所述杀虫蛋白为Cry蛋白，所述靶标昆虫为鳞翅目（Lepidoptera）昆虫中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在40%以上。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标昆虫为螟蛾科（Pyralidae）昆虫中的至少一种，或夜蛾科（Noctuidae）昆虫中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标昆虫为二化螟（Chilosuppressalis Walker）或草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，所述Cry蛋白为Cry9Aa蛋白；
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，所述Cry蛋白为氨基酸序列如Genbank No. ADE60735.1所示的Cry9Aa3蛋白；
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，
8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsRNA中的正义链的序列如SEQ ID No. 1所示或SEQ ID No. 4所示；
9.一种联合用药物，其包括用于沉默靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsRNA和Cry蛋白，所述靶标昆虫为权利要求1至8中任意一项所述的应用中的所述的靶标昆虫；所述Cry蛋白为权利要求1至8中任意一项所述的应用中的所述Cry蛋白。
10.根据权利要求9所述的联合用药物，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的dsRNA中的正义链的序列如SEQ ID No. 1或SEQ ID No. 4所示；
...【技术特征摘要】
1.沉默靶标昆虫自体snx-20基因表达在提高杀虫蛋白对所述靶标昆虫防治效果中的应用，其中，所述杀虫蛋白为cry蛋白，所述靶标昆虫为鳞翅目（lepidoptera）昆虫中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，沉默所述靶标昆虫自体snx-20基因表达的沉默效率在40%以上。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标昆虫为螟蛾科（pyralidae）昆虫中的至少一种，或夜蛾科（noctuidae）昆虫中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述靶标昆虫为二化螟（chilosuppressalis walker）或草地贪夜蛾（spodoptera frugiperda）。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为cry9aa蛋白；
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，对于所述螟蛾科昆虫，所述cry蛋白为氨基酸序列如genba...
【专利技术属性】
技术研发人员：张杰，李思睿，王泽宇，王桂荣，耿丽丽，束长龙，
申请(专利权)人：中国农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：
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