基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法技术

本发明专利技术属于分子生物学和分子生态学技术领域，具体公开了基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法。本发明专利技术创新设计方法，筛选出两组食蚊鱼的RPA特异性引物与探针，结合侧流层析试纸条检测法，建立了一种食蚊鱼的RPA‑LFD检测方法。该方法操作简便、灵敏性高、特异性强、短时间内实现结果可视，能够满足环境DNA样本的检测要求；且不需要精密仪器，在38℃、50min内即可得到检测结果，能够实现现场检测，适合野外快速监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学和分子生态学，具体涉及基于rpa技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合、试剂盒及方法。

技术介绍

1、食蚊鱼(gambusia affinis)，是鳉形目胎鳉科食蚊鱼属鱼类。由于其强大的环境适应能力以及繁殖能力，与中国本土小型鱼类占据了相似的生态地位，给本地生物带来了食物竞争压力，栖息地竞争压力等，且食蚊鱼是一种杂食性动物，可以捕食仔鱼和其他物种的卵，因此被列为了入侵物种。原本为防治蚊虫而引入食蚊鱼，却因为缺少天敌和有效管理而大量繁殖。原本在广东广泛分布的青鳉鱼数量剧减，被认为与食蚊鱼入侵有直接关系。

2、环境dna(environmental dna，简称edna)技术是一种基于生物体在环境中释放的dna片段进行检测和分析的新兴技术，生物体通过蜕皮、粪便、尿液、孢子、鳃腔粘液等方式，在环境中释放dna片段，这些dna片段称为环境dna。环境dna在生物多样性研究中的优势在于能从环境样品中获得目标生物dna，在不影响生物体的同时能取得较为全面的生物体信息。环境dna样本背景复杂，可能含有多物种dna，要求检测方法相对其他物种尤本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合，其特征在于：选自以下两组之一：

2.基于RPA技术现场检测食蚊鱼的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的基于RPA技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合。

3.基于RPA技术现场检测食蚊鱼的方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的基于RPA技术现场检测食蚊鱼的方法，其特征在于：步骤S3中，RPA扩增的反应体系为：10μM的上下游引物各2μL、10μM的探针0.6L、buffer A 29.4μL、buffer B 2.5μL、DNA模板2μL、无酶无菌水11.5μL。p>

5.根据权...

【技术特征摘要】

1.基于rpa技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合，其特征在于：选自以下两组之一：

2.基于rpa技术现场检测食蚊鱼的试剂盒，其特征在于：包括权利要求1所述的基于rpa技术现场检测食蚊鱼的引物探针组合。

3.基于rpa技术现场检测食蚊鱼的方法，其特征在于：包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的基于rpa技术现场检测食蚊鱼的方法，其特征在于：步骤s3中，rpa扩增的反应体系为：10...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晨虹，张秋灏，王辉，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：