【技术实现步骤摘要】
本申请属于生物，具体涉及一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌及培养方法和应用。
技术介绍
1、n,n-二甲基乙酰胺(dmac)作为重要的化工原料以及性能优良的溶剂，在聚合物分离膜领域中得到广泛应用。膜技术发展至今，dmac作为生产工艺中的优良溶剂的性能决定其已成为膜工艺生产中的一种重要溶剂。随着经济发展不断进步的同时，聚合物分离膜生产量增加，生产过程中使用的dmac溶剂也随着膜生产量的增加而增加，由于在生产过程中dmac作为溶剂可不经消耗就随生产废水排出，对水质环境造成个很大的影响，也严重危害动植物的健康。二甲基乙酰胺化学性质稳定，难降解，生理毒性显著，且有机氮含量高，这是使聚合物分离膜生产废水难以达标处理排放的主要原因之一。
2、目前，国内外对dmac降解的方法主要有铁炭内电解法、fenton氧化、臭氧氧化、吸附和光催化氧化等处理方法，这些方法虽然对dmac废水有较好的去除效果，但此类方法工艺条件复杂，处理成本较高，且容易产生二次污染。因此，有必要探索简单方便而且经济的处理方法。
3、生化法是利用微生物降解废水中污染物的方法，因其具有低成本、高处理效率和无二次污染的优点，被广泛使用在水处理工艺中。有研究报道生化法对dmac的降解可起到较好的作用，但目前国内外筛选到的二甲基乙酰胺的降解菌种类还较少，如赤红球菌、副球菌属等较少微生物被分离出来用于处理含dmac废水。因此，分离筛选出一株二甲基乙酰胺高效降解菌株对含dmac废水的处理具有很重要意义。
技术实现思路
2、为实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
3、一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌，微生物分类命名为乙酰微小杆菌(exiguobacterium acetylicum)，为革兰氏阳性好氧杆状菌，于2023年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；其保藏编号为cgmcc no.27162。
4、所述乙酰微小杆菌菌体呈短杆状，无鞭毛，不产芽孢，菌体大小约为其菌落呈圆形，边缘光滑，表面突起，菌落呈现橙黄色光泽，能以二甲基乙酰胺为碳源和氮源进行生长。
5、所述乙酰微小杆菌的16s rdna序列如seq id no.1所示。
6、seq id no.1乙酰微小杆菌的16s rdna序列：
7、caggctcaggacgaacgctggcggcgtgcctaatacatgcaagtcgagcgcaggaaactgacggaactcttcggagggaaggcagtggaatgagcggcggacgggtgagtaacacgtaaggaacctgcctcaaggattgggataactccgagaaatcggagctaataccggatagttcaacggaccgcatggtccgctgatgaaaggcgcttcggcgtcaccttgagatggccttgcggtgcattagctagttggtgaggtaacggcccaccaaggcgacgatgcatagccgacctgagagggtgatcggccacactgggactgagacacggcccagactcctacgggaggcagcagtagggaatcttccacaatggacgaaagtctgatggagcaacgccgcgtgagtgatgaaggttttcggatcgtaaaactctgttgtaagggaagaacacgtacgagaggtaatgctcgtaccttgacggtaccttacgagaaagccacggctaactacgtgccagcagccgcggtaatacgtaggtggcaagcgttgtccggaattattgggcgtaaagcgcgcgcaggcggccttttaagtctgatgtgaaagcccccggctcaaccggggagggccattggaaactggaaggcttgagtacagaagagaagagtggaattccacgtgtagcggtgaaatgcgtagagatgtggaggaacaccagtggcgaaggcgactctttggtctgtaactgacgctgaggcgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgagtgctaggtgttggggggtttccgcccctcagtgctgaagctaacgcattaagcactccgcctggggagtacggccgcaaggctgaaactcaaaggaattgacggggacccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaactcttgacatcccattgaccgcttgagagatcaagttttcccttcggggacaatggtgacaggtggtgcatggttgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgcaacgagcgcaacccctatccttagttgccagcatttagttgggcactctagggagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcatcatgccccttatgagttgggctacacacgtgctacaatggacggtacaaagggcagcgagaccgcgaggtggagccaatcccataaagccgttcccagttcggattgcaggctgcaactcgcctgcatgaagtcggaatcgctagtaatcgcaggtcagcatactgcggtgaatacgttcccgggtcttgtacacaccgcccgtcacaccacgagagtttgcaacacccgaagccggtgaggtaaccgtaaggagccagccgtcgaaggtggggtagatgattggggtgaagtcgtaa。
8、本专利技术还提供了一种所述的乙酰微小杆菌的培养方法，包括以下步骤：
9、步骤一：采集活性污泥样品10g，加入到100ml无菌水中，于30℃恒温振荡器中振荡1h以摇匀，而后静置2h待用；
10、步骤二：取步骤一中静置得到的第一上清液10ml加入到100ml无菌水中，摇匀后静置2h；
11、步骤三：取步骤二中静置得到的第二上清液1ml滴到50ml含二甲基乙酰胺2％体积比的lb液体培养基中，在恒温振荡器中以30℃的条件培养72h后，取1ml转接到50ml含二甲基乙酰胺3％体积比的lb液体培养基中，相同条件下培养72h，如此连续转接，直到lb液体培养基中二甲基乙酰胺的体积比为6％；
12、步骤四：取步骤三中最后一个培养步骤本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌，其特征在于，微生物分类命名为乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)，于2023年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCCNo.27162。
2.根据权利要求1所述的一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌，其特征在于，所述乙酰微小杆菌的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种如权利要求1和2任意一项所述的乙酰微小杆菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.一种如权利要求1和2任意一项所述的乙酰微小杆菌在降解二甲基乙酰胺中的应用，其特征在于，将乙酰微小杆菌配置成种子液，加入到含500mg/L二甲基乙酰胺的无机盐培养基中，培养一段时间后采用高效液相色谱法测定培养基中残余二甲基乙酰胺的含量，即菌株对DMAc的降解能力。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，无机盐培养基的配制方法为：磷酸氢二钾1500mg/L、磷酸二氢钾500mg/L、MgSO4·7H2O 200mg/L、NaCl1000mg/L、500m
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，种子液的配置方法为：将乙酰微小杆菌接种到100mL营养肉汤培养基中，30℃条件下150rpm/min培养24h后得到OD600值为1.5的乙酰微小杆菌种子液。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述营养肉汤培养基的配置方法为：取1g肉汤粉、0.5g蛋白胨、0.2g酵母浸粉、0.5gNaCl、0.2g磷酸二氢钾、0.1g麦芽糊精、0.1g葡萄糖和100mL无菌水混合溶解，在高温灭菌锅中以121℃灭菌20min。
8.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在降解DMAc时，乙酰微小杆菌种子液的接种量为1-20％。
9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在降解DMAc时，无机盐培养基的pH为5～10。
10.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，在降解DMAc时，培养温度为20～40℃。
...【技术特征摘要】
1.一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌，其特征在于，微生物分类命名为乙酰微小杆菌(exiguobacterium acetylicum)，于2023年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为cgmccno.27162。
2.根据权利要求1所述的一株降解二甲基乙酰胺的乙酰微小杆菌，其特征在于，所述乙酰微小杆菌的16s rdna序列如seq id no.1所示。
3.一种如权利要求1和2任意一项所述的乙酰微小杆菌的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
4.一种如权利要求1和2任意一项所述的乙酰微小杆菌在降解二甲基乙酰胺中的应用，其特征在于，将乙酰微小杆菌配置成种子液，加入到含500mg/l二甲基乙酰胺的无机盐培养基中，培养一段时间后采用高效液相色谱法测定培养基中残余二甲基乙酰胺的含量，即菌株对dmac的降解能力。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，无机盐培养基的配制方法为：磷酸氢二钾1500mg/l、磷酸二氢钾500mg/l、mgso4·7h2o...
【专利技术属性】
技术研发人员：雷婷，李剑，姚勇，杨园园，秦青青，李科褡，杨敬葵，靳进波，任露露，邓容，张敏敏，秦舒浩，崔振宇，张凯舟，
申请(专利权)人：贵州省材料产业技术研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。