一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法技术

技术编号:40541232 阅读:25 留言:0更新日期:2024-03-05 18:57
一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,以土霉素、卡那霉素和链霉素为模型,其检测原理为:(1)制备聚多巴胺载银颗粒,分别修饰各通道对应的显色剂和信号探针得显色纳米颗粒,(2)将各通道对应的适配体及互补探针杂交所得dsDNA修饰于磁珠表面得磁性复合物,(3)当实际牛奶样品中存在任一待测物时,它会与磁性复合物表面dsDNA中的适配体结合,导致互补探针恢复单链状态后通过碱基互补配对与信号探针结合,实现显色纳米颗粒在磁珠表面的富集,(4)加NaOH后,显色剂会大量释放至溶液中,各通道呈现不同颜色,利用酶标仪测定吸光度,绘制标准曲线,计算可得待测物浓度,(5)通过更换待测物所对应的适配体,可用于其他物质的定量分析。

【技术实现步骤摘要】

一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,属于食品分析领域。


技术介绍

1、我国畜牧业蓬勃发展,兽药使用日益广泛,不同种类的抗生素作为疾病治疗药物更加常态化和频繁化。一些养殖户为了提高经济效益不合理、大剂量联合使用多种抗生素,这导致动物源食品中多种抗生素含量超标,对食品安全构成严重威胁。残留抗生素通过食物链进入人体后,会导致机体产生多重耐药菌及潜在的dna损伤,并可能诱导细胞毒性反应,危害人类健康。因此,严格控制并检测动物源性食品中残留抗生素尤为重要。由于抗生素种类繁多,成分复杂,这为其检测方法提出了更高的要求,传统检测技术往往难以同时满足操作简单、高灵敏度、高特异性、多重检测等要求,开发新型检测技术改善现有检测方法的不足将对保障食品安全和人类健康具有重要的意义。

2、目前抗生素的检测方法已有多种,高效液相色谱法具有分辨率高、分析速度快、重现性高等优点,但前处理过程相对复杂,溶剂需要严格纯化,而且仪器设备相对昂贵。免疫学方法具有操作相对简单、快速、方法易标准化等优点,但同时敏感性相对较低,有类似于靶物质结构的干扰物质存在时,可能出现假阳性现象本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,其特征在于以土霉素、卡那霉素和链霉素为模型,(1)通过制备聚多巴胺载银颗粒并在其表面修饰各通道对应的显色剂和信号探针得显色纳米颗粒,(2)而后将各通道对应的适配体及互补探针杂交所得的dsDNA修饰于磁珠表面得磁性复合物,(3)当实际牛奶样品中存在任一待测物时,它会与磁性复合物表面dsDNA中的适配体结合,导致互补探针恢复单链状态后通过碱基互补配对与信号探针结合,实现显色纳米颗粒在磁珠表面的富集,(4)加NaOH后显色剂会大量释放至溶液中,各通道呈现不同颜色,利用酶标仪测定吸光度,绘制标准曲线,计算可得待测物浓度,(5)通过更换待测物所对应的...

【技术特征摘要】

1.一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,其特征在于以土霉素、卡那霉素和链霉素为模型,(1)通过制备聚多巴胺载银颗粒并在其表面修饰各通道对应的显色剂和信号探针得显色纳米颗粒,(2)而后将各通道对应的适配体及互补探针杂交所得的dsdna修饰于磁珠表面得磁性复合物,(3)当实际牛奶样品中存在任一待测物时,它会与磁性复合物表面dsdna中的适配体结合,导致互补探针恢复单链状态后通过碱基互补配对与信号探针结合,实现显色纳米颗粒在磁珠表面的富集,(4)加naoh后显色剂会大量释放至溶液中,各通道呈现不同颜色,利用酶标仪测定吸光度,绘制标准曲线,计算可得待测物浓度,(5)通过更换待测物所对应的适配体,可用于其他物质的定量分析。

2.根据权利要求1所述的一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,其特征在于检测方法中所述的信号探针、适配体及互补探针,序列分别为:

3.根据权利要求1所述的一种通用的牛奶中抗生素的3通道比色检测方法,其特征在于以土霉素、卡那霉素和链霉素为模型,通过制备聚多巴胺载银颗粒并在其表面修饰各通道对应的显色剂和信号探针得显色纳米颗粒,其步骤具体是取2mg聚多巴胺纳米颗粒超声分散于5ml超纯水中,加入1ml 0.278g/ml柠檬酸钠溶液和20ml 0.025m新配制硝酸银溶液室温搅拌3h,10000rpm 10min离心洗涤3次后重悬于1.0ml超纯水中后,加入20μl 10μm 3种对应通道的信号探针,37℃振荡孵育12h,离心洗涤三遍后等体积重悬,再分别加入400μl 3通道对应的显示剂,即4mm的无水乙醇溶解的酚酞溶液、5mm无水乙醇溶解的百里香酚酞溶液、6mm无水乙醇溶解的姜黄素溶液,各自37℃振荡孵育2h,10000rpm 10min超纯水离心洗涤3次后,等体积重悬到1ml水中,即可获得吸附了大量显色剂的显色纳米颗粒。

4.根据权利要求1所述的一种通用的牛奶中抗生素的3通...

【专利技术属性】
技术研发人员:许媛媛苗晋锋付思远
申请(专利权)人:南京农业大学
类型:发明
国别省市:

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