【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物，具体涉及一种黄色短杆菌及其应用。
技术介绍
1、缬氨酸（l-val），学名2-氨基-3-甲基丁酸，是人体八大必需氨基酸之一，与l-亮氨酸、l-异亮氨酸统称为支链氨基酸，在医药、调味品、营养添加剂、饲料添加剂等方面有着广泛的应用。特别是在医药领域，缬氨酸可用于与其他必需氨基酸配制成复合氨基酸输液，尤其是高支链氨基酸输液及口服液，不仅可以提高人体免疫力，还能促进病人康复及手术后复原。此外，其还应用于血脑屏障、肝昏迷、慢性肝硬化及肾功能衰竭的治疗，先天性代谢缺陷病的膳食治疗，败血症及术后糖尿病患者的治疗，肿瘤患者的营养支持治疗等。
2、缬氨酸生产方法主要有化学合成法、提取法和发酵法。提取法和化学合成法由于存在原料来源受限制、生产成本高、污染环境等缺陷而难以实现工业化生产。微生物发酵法具有原料成本低、反应条件温和、容易实现大规模生产等优点，是目前生产l-缬氨酸最主要的方法。目前来看，l-缬氨酸主要利用菌株进行微生物发酵生产，是非常经济的一种生产方法。因此，利用微生物发酵法生产缬氨酸具有重要意义。
3、cn103215322a公开了一种提高l-缬氨酸产率的发酵方法，将缬氨酸生产菌接种至含有甜菜碱的发酵培养基中进行发酵，得到l-缬氨酸，甜菜碱可作为缬氨酸生产菌的甲基供体，用于调节细胞内的渗透压、促进脂肪代谢及蛋白质合成等，此外还能够刺激菌体生长、促进产酸。
4、cn1844356a公开了一种黄色短杆菌突变株及用于发酵法生产l-缬氨酸的工艺，其以黄色短杆菌cicc10135为出发菌种，
5、“食品与发酵工业2001年，张伟国等人”以l-缬氨酸产生菌黄色短杆菌xq-2为出发菌株，经诱变处理及定向筛选，获得一株l-缬氨酸高产菌黄色短杆菌xq-8，其摇瓶发酵72h后，提高了l-缬氨酸产量。
6、cn101962664a公开了一种高效生产l-缬氨酸的发酵工艺，其以营养缺陷型和缬氨酸渗漏型菌株为生产菌株，通过调节发酵罐搅拌转速和风量将溶氧控制在适当的水平，通过流加液氨控制ph，并通过流加一定浓度的葡萄糖溶液将残糖控制在较低水平，发酵60h后l-缬氨酸的产量和转化率大幅度提高。
7、cn113913478a公开了一种发酵黄色短杆菌产l-缬氨酸的方法。本专利技术将gapa和ilvbnc基因通过表达载体导入黄色短杆菌中，筛选获得高产l-缬氨酸菌株的黄色短杆菌工程菌。
8、黄色短杆菌(brevibacterium flavum)作为食品安全级的微生物，具有易培养、不产孢子等优点，因此是一类重要的工业生产菌株，可用于生产包括l-缬氨酸在内的多种氨基酸。黄色短杆菌是一种无芽孢的、细胞为短小棒状呈八字排列的革兰氏阳性细菌，属于放线菌目棒状杆菌属。黄色短杆菌中l-缬氨酸的生物合成路径已经明确。葡萄糖经过糖酵解途径生成l-缬氨酸合成的重要前体--丙酮酸，丙酮酸再通过4步反应即可合成l-缬氨酸。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种产缬氨酸的高性能菌株。
2、为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是：
3、产缬氨酸的黄色短杆菌株(brevibacterium flavum) vg2023d-20，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmcc no.27546。
4、具体地，
5、所述菌株的菌落为圆形，边缘整齐，中间有明显突起，半透明有光泽，淡黄色，产缬氨酸。
6、具体地，
7、所述菌株具备耐高温性能。
8、具体地，
9、所述菌株的最适发酵温度为33-36℃。
10、进一步地，
11、所述菌株是通过化学诱变联合紫外诱变获得。
12、另一方面，本专利技术还涉及上述任其一所述的菌株在发酵产氨基酸中的应用。
13、优选地，所述氨基酸为缬氨酸。
14、另一方面，本专利技术还涉及一种利用所述的菌株发酵制备缬氨酸的方法。
15、本专利技术的菌株的有益效果主要包括：
16、本专利技术通过化学诱变联合紫外诱变筛选出一株高产缬氨酸的突变菌株黄色短杆菌(brevibacterium flavum) vg2023d-20，最适发酵温度为33-36℃，最适发酵温度范围较出发菌株更宽，而且耐高温，有利于应对发酵后期局部温度过高导致的产酸效率下降。最适温度条件下，同等发酵温度相比较，以33℃为例，vg2023d-20较出发菌株的发酵产酸量提高了22.5%，以34℃为例，vg2023d-20较出发菌株的发酵产酸量提高了23.4%。出发菌株在发酵50h后产缬氨酸产量没有明显提升，而vg2023d-20菌株可以在60h内持续高效率发酵产酸。与出发菌株相比，vg2023d-20菌株的发酵周期更长，提高了10h以上，具有更高的实用价值。发酵后期，会产生大量的酸性副产物，造成局部ph过低，损害菌株的活力，ph在3-7之间vg2023d-20菌株均能够保持较高的活力，而出发菌株的ph范围为5-7之间，说明vg2023d-20更能耐受高ph环境。
17、实施方式
18、为了使本
的人员更好地理解本申请中的技术方案，下面将结合本申请具体实施例，对本专利技术进行更加清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都应当属于本专利技术保护的范围。
19、实施例
20、黄色短杆菌(brevibacterium flavum) vg2023d-20，其于2023年6月5日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，保藏号为cgmcc no.27546。
21、出发菌株采集于公司缬氨酸生产车间的发酵废弃菌体，挑取一环接入装有牛肉膏蛋白胨培养基的三角瓶中，35℃摇床培养24小时，离心收集菌体，用ph7.0磷酸缓冲液悬浮菌体得到浓度为1亿cfu/ml菌液；将菌液和浓度200μg/ml的亚硝基胍溶液按照1:2的体积比混匀，置于培养皿中，采用20w的紫外灯照射，波长254nm；灯与培养皿距离为20cm，照射时间为1min，间隔30min后，再照射1min，共重复照射三次，最终筛选出一株高产缬氨酸的突变菌株黄色短杆菌(brevibacterium flavum) vg2023d-20。
22、理化性质：在营养培养基上，培养40小时后，菌落为圆形，边缘整齐，中间有明显突起，半透明有光泽，淡黄色，产缬氨酸，16s dna检测鉴定该菌株属于黄色短杆菌。出发菌株最适发酵温度为33-34℃，vg2023d-20菌株本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.产缬氨酸的黄色短杆菌株(Brevibacterium flavum) VG2023D-20，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.27546。
2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株的菌落为圆形，边缘整齐，中间有明显突起，半透明有光泽，淡黄色，产缬氨酸。
3.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株具备耐高温性能。
4.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株的最适发酵温度为33-36℃。
5.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株是通过化学诱变联合紫外诱变获得。
6.权利要求1-5任其一所述的菌株在发酵产氨基酸中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述氨基酸为缬氨酸。
8.一种利用权利要求1-5任其一所述的菌株发酵制备缬氨酸的方法。
【技术特征摘要】
1.产缬氨酸的黄色短杆菌株(brevibacterium flavum) vg2023d-20，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmcc no.27546。
2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株的菌落为圆形，边缘整齐，中间有明显突起，半透明有光泽，淡黄色，产缬氨酸。
3.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，所述菌株具备耐高温性能。
...【专利技术属性】
技术研发人员：冯世红，李学朋，王飞，王奎智，
申请(专利权)人：新疆阜丰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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