一种高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种高产L‑高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法及应用，涉及微生物代谢工程技术领域，效果是通过提供的经过改造后的重组大肠杆菌相比于野生型能够更好地利用葡萄糖等碳源物质进行L‑高丝氨酸的生产，并且能力更强，转化率更高。经过改造后得到的性能最优的菌株在发酵生产L‑高丝氨酸方面的水平相比于野生型有明显提升，5L罐发酵水平从32.17g/L提升至60.87g/L，产率提高了89.21％，并且由工程菌dh5aα的发酵生长曲线可知，在发酵32h后L‑高丝氨酸产量最大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物代谢工程，更具体地说，它涉及一种高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法及应用。

技术介绍

1、l-高丝氨酸(homoserine，2-amino-4-hydroxybutyricacid)，是一种非蛋白氨基酸。可用于蛋氨酸、苏氨酸、胱硫醚、l-高丝氨酸内酯、γ-丁内酯、1,4-丁二醇、o-乙酰高丝氨酸与手性除草剂l-草胺膦等化学物质的生产，是一种极具潜力的中间体。l-高丝氨酸及其衍生物具有丰富的的生物活性，例如可提高植物的抗逆性，促进家禽生长，还可以有效地抑制镰状红细胞、并作为抗真菌药物，当前l-高丝氨酸的生产方法包括化学合成法、化学手性拆分法和生物法。

2、目前，化学合成法、化学手性拆分法和生物法来生产l-高丝氨酸，其中化学合成法使用的原料比较容易获得，收率较高，但是提纯步骤较为复杂，反应时间长，而化学手性拆分法指在混旋的高丝氨酸溶液中，加入手性试剂进行反应，使l/d-高丝氨酸性质发生差异，从而分离出l-高丝氨酸。该方法产率较低，由于在该过程中加入了大量的有机溶剂，因此会产生较大的污染，上述两种生产制备l-高丝氨酸的方式本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，分为以下步骤；

2.根据权利要求1所述的高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，所述构建基因工程菌大肠杆菌，包括以下步骤；

3.根据权利要求1所述的高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌菌株发酵L-高丝氨酸的应用具有如下步骤；

4.根据权利要求3所述的一种高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：对对高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌菌株进行菌种活化和种子液的培养方法分为如下步骤进行；

5.根据权利要求3所述的一种高产L-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，分为以下步骤；

2.根据权利要求1所述的高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于，所述构建基因工程菌大肠杆菌，包括以下步骤；

3.根据权利要求1所述的高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌菌株发酵l-高丝氨酸的应用具有如下步骤；

4.根据权利要求3所述的一种高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌的构建方法，其特征在于：对对高产l-高丝氨酸的重组大肠杆菌菌株进行菌种活化和种子液的培养方法分为如下步骤进行；

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【专利技术属性】
技术研发人员：张兰平，胡明华，朱瑞，魏田军，汤飞荣，
申请(专利权)人：南京华洲药业有限公司，
类型：发明
国别省市：