【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药化合物，具体涉及倍半萜类化合物、制备方法及其在抗肿瘤领域的应用。
技术介绍
1、山胡椒属于樟科山胡椒属灌木植物，拉丁学名为lindera glauca(siebold&zucc.)blume。山胡椒主要分布在我国山西、陕西、甘肃、河南、四川及华东、中南等地，其具有悠久的入药历史，山胡椒味辛、大热，其根用于治疗风湿痹痛，劳伤失力，感冒，扁桃腺炎，咽炎，浮肿等。
2、随着肿瘤发病率和死亡率的上升，开发和分离抗肿瘤药物成为了紧迫的挑战。肿瘤细胞的复杂性和异质性使得传统的化疗药物难以有效治疗，而且常常会产生耐药性。天然小分子化合物在抗肿瘤方面具有疗效好、副作用少等独特的优势，是抗肿瘤新药发现的重要来源。
3、例如，el-desoky,a.h.h等从瑞香科狼毒中分离得到的倍半萜chamaejasmin a显示出对宫颈癌hela细胞的细胞毒活性，ic50为6.3μmol·l-1(el-desoky,ahmed h h et al.“chamaejasmins,cytotoxic guaiane sesquiterpenes from the root of stellerachamaejasme l.”fitoterapia vol.146(2020):104714.)；chen等从箭叶秋葵中分离出化合物2β,7,3-trihydroxycalamenene 3-o-β-d-glucoside(110)并对其作用于hela和hepg2人癌细胞株，发现化合物具有中度的细胞毒活性，ic50值分别
4、山胡椒属植物化学成分以黄酮、生物碱和倍半萜为主，且倍半萜类化合物是山胡椒属植物的特征性化学成分之一，因此，山胡椒中含有的倍半萜类化合物值得深入挖掘和研究，以期为抗肿瘤新药的研发提供更多的先导化合物。
技术实现思路
1、本专利技术提供了倍半萜类化合物，该倍半萜类化合物从樟科山胡椒属植物山胡椒的块根中分离得到，具有一定的抗肿瘤活性。
2、具体采用的技术方案如下：
3、倍半萜类化合物，选自下式所示的化合物(-)-1、化合物(+)-1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5中的任一种：
4、
5、所述的倍半萜类化合物利用山胡椒块根分离得到，具体的制备方法包括以下步骤：
6、(1)取干燥的山胡椒块根，切片后加乙醇提取得到提取液，合并提取液并浓缩得浸膏，利用石油醚萃取浸膏，得到粗提物；
7、(2)将粗提物通过正相硅胶柱层析、反相硅胶柱层析和半制备hplc纯化，从粗提物中制备获得化合物(-)-1、(+)-1、2、3、4和5。
8、优选的，步骤(1)中，使用的乙醇为浓度80-95％的工业乙醇，乙醇提取方法为热浸渍法，提取温度50-60℃，提取6-7次，每次20-24小时。
9、进一步优选的，使用的乙醇为浓度95％的工业乙醇，提取温度55℃提取7次，每次24小时。
10、具体的，步骤(2)包括以下步骤：
11、(2.1)将粗提物用正相硅胶柱层析进行梯度洗脱分离，流动相为石油醚/乙酸乙酯，石油醚和乙酸乙酯的体积比为40-0:1，收集得到7个馏份fr.1-fr.7；
12、(2.2)将馏份fr.4通过正相硅胶柱层析进行梯度洗脱分离，流动相为石油醚/乙酸乙酯，石油醚和乙酸乙酯的体积比为12-0:1，洗脱液经薄层色谱检测，合并相同组分，得到21个馏份fr.4.1-fr.4.21；
13、(2.3)将馏份fr.4.5通过反相硅胶柱层析进行梯度洗脱分离，流动相为甲醇/水，甲醇和水的体积比为60-100:40-0，收集得到54个馏分fr.4.5.1-fr.4.5.54；馏分fr.4.5.4通过半制备hplc法纯化得到化合物4和化合物5；
14、(2.4)将馏份fr.4.12过反相硅胶柱层析进行梯度洗脱分离，流动相为甲醇/水，甲醇和水的体积比为20-100:80-0，收集得到45个馏分fr.4.12.1-fr.4.12.45；
15、(2.5)馏分fr.4.12.8通过三次半制备hplc法纯化得到化合物2和化合物3；馏分fr.4.12.9通过两次半制备hplc法纯化得到化合物(-)-1和化合物(+)-1。
16、优选的，步骤(2.1)中，石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱的体积比例变化为40:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1；
17、步骤(2.2)中，石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱的体积比例变化为12:1、10:1、8:1、5:1、3:1、0:1；
18、步骤(2.3)中，甲醇/水梯度洗脱的体积比例变化为60:40、70:30、80:20、90:10、100:0；
19、步骤(2.4)中，甲醇/水梯度洗脱的体积比例变化为20:80、40:60、60:40、80:20、100:0。
20、优选的，步骤(2.1)中，所述的硅胶柱层析为正相硅胶柱层析，采用80-120目硅胶颗粒。
21、优选的，步骤(2.2)中，正相硅胶柱采用200-300目硅胶颗粒作为填料。
22、优选的，步骤(2.3)和(2.4)中，反相硅胶柱用ymc gel ods-a-hg c18硅胶填料。
23、优选的，步骤(2.3)中，半制备hplc法的条件为：welch ultimate xb-c18液相色谱柱，等度洗脱分离，流动相为体积比为65:35的乙腈/水，流速为2.0ml/min。
24、优选的，步骤(2.5)中，三次半制备hplc法纯化得到化合物2和化合物3的条件为：第一次半制备hplc法选用welch ultimate xb-c18液相色谱柱，等度洗脱分离，流动相为体积比为35:65的乙腈/水，流速为2.0ml/min；第二次半制备hplc法选用welch ultimate xb-c18液相色谱柱，等度洗脱分离，流动相为体积比为40:60的甲醇/水，流速为2.0ml/min；第三次半制备hplc法选用大赛璐ic柱，等度洗脱分离，流动相为体积比为60:40的甲醇/水，流速为1.0ml/min。
25、优本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.倍半萜类化合物，其特征在于，选自下式所示的化合物(-)-1、化合物(+)-1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5中的任一种：
2.根据权利要求1所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，乙醇提取过程中，提取温度50-60℃，提取6-7次，每次20-24小时。
4.根据权利要求2所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)包括以下步骤：
5.根据权利要求4所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，
6.根据权利要求4所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，
7.根据权利要求4所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，
8.根据权利要求4所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，
9.根据权利要求1所述的倍半萜类化合物在抗肿瘤领域中的应用。
【技术特征摘要】
1.倍半萜类化合物，其特征在于，选自下式所示的化合物(-)-1、化合物(+)-1、化合物2、化合物3、化合物4、化合物5中的任一种：
2.根据权利要求1所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的倍半萜类化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，乙醇提取过程中，提取温度50-60℃，提取6-7次，每次20-24小时。
4.根据权利要求2所述的倍半萜类化...
【专利技术属性】
技术研发人员：李华强，潘心远，秦路平，蒙雄裕，郭佳琪，曾繁荣，
申请(专利权)人：浙江中医药大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。